一种肝移植术后他克莫司初始剂量的预测模型及其个体化应用制造技术

本发明专利技术涉及生物技术领域，具体是一种肝移植术后他克莫司初始剂量的预测模型及其个体化应用。本发明专利技术将来自2个移植中心的247例原位肝移植患者纳入研究，使用供体和受体DMET Plus芯片筛选重要位点，对来自中心1的150例受者及其相应供者的肝脏进行基因分型。此外，该模型还纳入临床变量，通过LASSO回归构建他克莫司药代动力学预测模型，结果表明在发展队列和验证队列中AUC分别为0.878和0.790，在推荐浓度范围(RCR,4

【技术实现步骤摘要】
一种肝移植术后他克莫司初始剂量的预测模型及其个体化应用


[0001]本专利技术涉及生物
，具体地说，是一种肝移植术后他克莫司初始剂量的预测模型及其个体化应用。

技术介绍

[0002]他克莫司是钙调神经磷酸酶抑制剂，是实体器官和造血干细胞移植后主要的免疫抑制药物
[1
‑
3]。充分的免疫抑制对于抑制排斥反应和提高移植存活率至关重要；过度免疫抑制可导致一系列严重的药物不良反应，如感染、糖尿病、肾功能不全等，并且他克莫司治疗窗口狭窄，个体间和个体内变异较大，使常规剂量调整复杂化
[4
‑
6]。另一方面，患者之间的剂量差异很大，高达20倍或以上(0.5～10mg/天)，中国患者通常只使用目前指南推荐剂量的一半来维持免疫平衡。因此，精确的个性化剂量对于减少钙调磷酸酶抑制剂的暴露，同时实现低急性排斥率
[7]是很重要的。
[0003]治疗性药物监测(Therapeutic drug monitoring,TDM)是临床日常应用中最常用的免疫抑制治疗策略，可有效改善药物的疗效和安全性
[8,9]。以往，在肝移植术后早期通过监测血谷浓度来不断调整他克莫司的剂量，然后找到个体化剂量。此后，药物基因组学的临床价值下降，他克莫司血谷浓度检测频率降低。然而，这种“试错”过程容易引起排斥或药物不良反应。因此，预测他克莫司清除率，提供初始剂量准确的参考范围，以便在早期短时间内达到免疫平衡，在免疫抑制治疗中至关重要。
[0004]近年来，药物基因组学研究提供了一种根据基因型预测药物代谢表型的积极策略
[10
‑
12]。细胞色素P450(CYP)3A家族中的酶负责他克莫司的氧化代谢
[13
‑
15]。临床药物遗传学实施联盟(CPIC)最近提出了他克莫司的使用指南，试图提供CYP3A5基因型和给药剂量相关的解释。受体的代谢表型相应地被分为3类，包括携带CYP3A5 rs776746AA的快代谢者(EM，携带两个功能等位基因的个体)、携带CYP3A5 rs776746AG的中间代谢者(IM，携带一个功能性等位基因和一个非功能性等位基因的个体)，以及携带CYP3A5 rs776746GG的慢代谢者(PM，携带两个非功能性等位基因的个体)，这种简单的CPIC
‑
EIP分类法适用于许多器官移植手术后，包括肾、心脏、肺和造血干细胞移植，以及供者和受体基因型相同的肝移植[16]。
[0005]然而，目前的包括CYP3A5基因型的CPIC
‑
EIP分类，在异体肝移植中应用有其局限性。首先，几乎所有临床肝移植都是同种异体的，受体和相应的供体基因型不同，两组基因组的整合使影响他克莫司代谢的遗传因素复杂化。其次，中国个体与其他种族个体之间确实存在着相当大的遗传差异，这可能导致临床表现的差异。此外，CPIC
‑
EIP分类只考虑了CYP3A5基因等主要因素，忽略了次要因素，对个体来说不够准确。基于以上考虑，迫切需要构建一种新的、全面的方案来指导中国肝移植患者他克莫司个体化用药。
[0006]在本研究中，我们首先使用包括供体和受体的药物代谢酶和转运体(DMET)Plus芯片，在发展队列中广泛筛选影响他克莫司代谢的药物基因组标志物。筛选候选位点并结合
临床特征建立预测他克莫司初始剂量的预测模型。本研究在更全面、系统的基因分型基础上，旨在为肝移植术后他克莫司初始给药提供有用的指导模型，特别是针对中国人群。关于本专利技术一种肝移植术后他克莫司初始剂量的预测模型及其个体化应用目前还未见报道。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的是针对现有技术的不足，提供一种肝移植术后他克莫司初始剂量的预测模型及其个体化应用。
[0008]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案是：
[0009]第一方面，本专利技术提供了一种预测肝移植术后他克莫司初始剂量的试剂盒，所述试剂盒含有检测受体SLCO1B1 rs4149015、受体CHST10 rs3748930、受体CYP3A5 rs776746、供体CYP3A5 rs776746基因型的试剂。
[0010]优选地，所述试剂盒还包含检测总胆红素含量的试剂。
[0011]优选地，所述试剂盒还包括记载有如下模型和评判方法的载体：
[0012]他克莫司首次给药剂量的计算公式为：Y＝0.491*Weight+0.165*SLCO1B1 rs4149015(受体)+0.126*CHST10 rs3748930(受体)+0.352*CYP3A5 rs776746(供体)+0.313*CYP3A5rs776746(受体)+0.001*总胆红素；
[0013]其中，当SLCO1B1 rs4149015(受体)位点为AA时代入的数值为0，为AG时代入的数值为1.5，为GG时代入的数值为3；
[0014]当CHST10 rs3748930(受体)位点为CC时代入的数值为0，为CG时代入的数值为1.5，为GG时代入的数值为3；
[0015]当CYP3A5 rs776746(供体)位点为AA时代入的数值为0，为AG时代入的数值为3，为GG时代入的数值为6；
[0016]当CYP3A5 rs776746(受体)位点为AA时代入的数值为0，为AG时代入的数值为3.5，为GG时代入的数值为7；
[0017]总胆红素代表患者血清总胆红素含量，计量单位是μmol/L，按照公式Points(总胆红素)＝血清总胆红素含量/25计算得到分值；
[0018]Weight代表患者体重，计量单位是kg；
[0019]根据患者的指标计算得出Y值，即总得分，然后再结合患者体重和总得分，根据图5找到患者肝移植后他克莫司首次给药剂量，给药剂量的计量单位是mg/d。
[0020]优选地，检测基因型的试剂为基因测序试剂、基因特异性引物、基因特异性探针或基因芯片。
[0021]优选地，所述试剂盒适用于中国人群。
[0022]第二方面，本专利技术提供了一种试剂组合在制备预测肝移植术后他克莫司初始剂量的试剂盒中的应用，所述试剂组合含有检测受体SLCO1B1 rs4149015、受体CHST10 rs3748930、受体CYP3A5 rs776746、供体CYP3A5 rs776746基因型的试剂。
[0023]优选地，所述试剂组合还包含检测总胆红素含量的试剂。
[0024]优选地，检测基因型的试剂为基因测序试剂、基因特异性引物、基因特异性探针或基因芯片。
[0025]第三方面，本专利技术提供了一种非诊断和治疗目的的预测肝移植术后他克莫司初始
剂量的方法，包括以下步骤：
[0026]计算Y值，Y＝0.491*Weight+0.165*SLCO1B1 rs4149015(受体)+0.126*CHST10rs3748930(受体)+0.352*CYP3A5 rs776746(供体)+0.本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种预测肝移植术后他克莫司初始剂量的试剂盒，其特征在于，含有检测受体SLCO1B1 rs4149015、受体CHST10 rs3748930、受体CYP3A5 rs776746、供体CYP3A5 rs776746基因型的试剂。2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，还包含检测总胆红素含量的试剂。3.根据权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒还包括记载有如下模型和评判方法的载体：他克莫司首次给药剂量的计算公式为：Y＝0.491*Weight+0.165*SLCO1B1 rs4149015(受体)+0.126*CHST10 rs3748930(受体)+0.352*CYP3A5 rs776746(供体)+0.313*CYP3A5 rs776746(受体)+0.001*总胆红素；其中，当SLCO1B1 rs4149015(受体)位点为AA时代入的数值为0，为AG时代入的数值为1.5，为GG时代入的数值为3；当CHST10 rs3748930(受体)位点为CC时代入的数值为0，为CG时代入的数值为1.5，为GG时代入的数值为3；当CYP3A5 rs776746(供体)位点为AA时代入的数值为0，为AG时代入的数值为3，为GG时代入的数值为6；当CYP3A5 rs776746(受体)位点为AA时代入的数值为0，为AG时代入的数值为3.5，为GG时代入的数值为7；总胆红素代表患者血清总胆红素含量，计量单位是μmol/L，按照公式Points(总胆红素)＝血清总胆红素含量/25计算得到分值；Weight代表患者体重，计量单位是kg；根据患者的指标计算得出Y值，即总得分，然后再结合患者体重和总得分，根据图5找到患者肝移植后他克莫司首次给药剂量，给药剂量的计量单位是mg/d。4.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，检测基因型的试剂为基因测序试剂、基因特异性引物、基因特异性探针或基因芯片。5.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于，所述试剂盒适用于中...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭志海，刘园，张金彦，张坤，苏昭杰，史宝洁，王杰，王瑞，肖毅，
申请(专利权)人：上海市第一人民医院，
类型：发明
国别省市：