一种过冷状态下无冰晶低温保存方法和复苏方法技术

本发明专利技术公开了一种过冷状态下无冰晶低温保存方法和复苏方法，涉及低温医学技术领域。该过冷状态下无冰晶低温保存方法包括：向悬浮有细胞或组织的冷冻保护液中加入油类物质，使油类物质完全覆盖于冷冻保护液的表面形成样本，将样本进行低温保存。本申请可以在

【技术实现步骤摘要】
一种过冷状态下无冰晶低温保存方法和复苏方法


[0001]本专利技术涉及低温医学
，具体而言，涉及一种过冷状态下无冰晶低温保存方法和复苏方法。

技术介绍

[0002]我国每年新增重型肝炎患者百余万，其中通过肝移植手术得到救治的患者不足1%，临床上迫切需要满足这部分患者治疗需求。生物人工肝已被临床实践证实作为一种器官替代的有效治疗方案。实际上，随着生物人工肝在临床的大量运用，需要建立由丰富经验的团队在无菌条件下用特殊设备进行肝细胞的扩增、功能及安全性等标准化评价的“细胞工厂”，并以此建立类似于血库的生物人工用肝细胞库来满足临床需要。
[0003]细胞低温保存是通过低温限制细胞酶的活性，减缓生化反应进程，抑制生物体的新陈代谢，降低能量消耗，并逐渐达到低能耗的状态，延长细胞保存时间。
[0004]0℃~4℃左右是组织、器官和细胞短期存储的解决方案，但缺血再灌注损伤及保存时间短仍是客观存在的问题。深低温保存虽能长时间保存细胞，但细胞内冰晶形成、高浓度细胞毒性保存剂、操作程序繁琐等限制了临床应用。细胞悬液在零度以下的过冷状态低于均衡凝本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种过冷状态下无冰晶低温保存方法，其特征在于，其包括：向悬浮有细胞或组织的冷冻保护液中加入油类物质，使所述油类物质完全覆盖于所述冷冻保护液的表面形成样本，将所述样本进行低温保存；所述油类物质包括轻链矿物油和橄榄油中的至少一种；所述冷冻保护液包括DMEM培养基或UW液。2.根据权利要求1所述的过冷状态下无冰晶低温保存方法，其特征在于，所述冷冻保护液中的细胞密度为1
×
106~5
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106/ml。3.根据权利要求1所述的过冷状态下无冰晶低温保存方法，其特征在于，所述冷冻保护液还包括聚乙二醇和3
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O
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甲基
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d葡萄糖，其中，所述聚乙二醇在所述冷冻保护液中的体积百分比浓度为3
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7%，所述3
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O
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甲基
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d葡萄糖在所述冷冻保护液中的浓度为0.1
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0.5mol/L，所述冷冻保护液中不含DMSO。4.根据权利要求1所述的过冷状态下无冰晶低温保存方法，其特征...

【专利技术属性】
技术研发人员：高毅，李阳，黄楚颖，
申请(专利权)人：广东乾晖生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：