GSK126在制备抗骨肉瘤的药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了GSK126在制备抗骨肉瘤的药物中的应用，涉及药物新用途的技术领域。本发明专利技术发现GSK126能够显著抑制骨肉瘤细胞增殖，增加自噬小体的表达，诱导骨肉瘤细胞的自噬达到抑制骨肉瘤生长的效果。所述GSK126可用于开发治疗骨肉瘤的新型药物，具有广阔的医用前景和经济价值。经济价值。经济价值。

【技术实现步骤摘要】
GSK126在制备抗骨肉瘤的药物中的应用


[0001]本专利技术涉及药物新用途的
，具体涉及GSK126在制备抗骨肉瘤药物中的应用。

技术介绍

[0002]骨肉瘤是原发性间叶组织恶性肿瘤，好发于青少年长骨干骺端，尤其是股骨远端和胫骨近端，具有肺转移早、致残率高、复发率高等特性。手术、药物化疗是本病的标准治疗方案，骨肉瘤治疗的新进展已经使患者的预后得到了显著改善，但骨肉瘤发生转移或复发的患者5年总生存率仍然低于30％。骨肉瘤是一种分化缺陷病，与成骨分化相关基因及(或)表观遗传改变有关，表现为间充质干细胞或成骨细胞分化受阻。
[0003]研究表明，表观遗传的改变在肿瘤的发生发展中起着重要作用，并受表观遗传蛋白的调节。果蝇Zeste基因增强子人类同源物2(enhancer of zeste homolog2，EZH2)是表观遗传蛋白家族的一种，能够催化组蛋白H3赖氨酸27(H3K27)三甲基化，沉默下游相关基因，导致肿瘤的发生及干细胞多向分化障碍。研究发现，表观遗传蛋白EZH2在多种肿瘤中异常表达，但EZH2在骨肉瘤中的作用尚不明确。近年来，由于EZH2在多种肿瘤中的作用越来越受到重视，针对EZH2开发的小分子抑制剂越来越受欢迎。EZH2潜在抑制剂主要分为两类，一类是半胱氨酸水解酶抑制剂，属于间接性抑制剂，如3
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deazaneplanocinA(DZNeP)；另一类是甲硫氨酸竞争性抑制剂，属于直接性抑制剂，如GSK126。研究表明，EZH2间接性抑制剂在多种肿瘤中发挥着抑制作用，但是EZH2直接性抑制剂GSK126在骨肉瘤中的作用目前暂无相关报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于克服现有技术的不足，提供GSK126在制备抗骨肉瘤的药物中的应用。
[0005]为实现上述目的，本专利技术采取的技术方案为：GSK126在制备抗骨肉瘤的药物中的应用。
[0006]EZH2基因编码的是一种组蛋白赖氨酸N
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甲基转移酶，参与DNA甲基化从而抑制其他基因转录，EZH2也可甲基化组蛋白H3第27位赖氨酸。EZH2的突变或者过表达与多种类型癌症相关，如乳腺癌、前列腺癌、黑色素瘤和膀胱癌等。GSK126是一种新型的直接抑制EZH2的小分子化合物，目前未见其具有治疗骨肉瘤功效的报道。
[0007]专利技术人在研究中意外发现GSK126能够显著抑制骨肉瘤细胞增殖，增加自噬小体的表达，诱导骨肉瘤细胞的自噬达到抑制骨肉瘤生长的效果。因此，GSK126可用于开发抗骨肉瘤的新型药物，具有广阔的医用前景和经济价值。
[0008]作为本专利技术所述的应用的优选实施方式，所述GSK126的分子式为C
31
H
38
N6O2，分子量为526.27。
[0009]作为本专利技术所述的应用的优选实施方式，所述抗骨肉瘤是抑制骨肉瘤细胞增殖。
[0010]作为本专利技术所述的应用的优选实施方式，所述抗骨肉瘤是增加自噬小体的表达。
[0011]作为本专利技术所述的应用的优选实施方式，所述抗骨肉瘤是诱导骨肉瘤细胞的自噬。
[0012]作为本专利技术所述的应用的优选实施方式，所述GSK126在药物中的浓度为5～15μM。
[0013]本专利技术还提供一种药物组合物，所述药物组合物包括GSK126和药学上可接受的载体。
[0014]作为本专利技术药物组合物的优选实施方式，所述药物组合物中GSK126的浓度为5～15μM。
[0015]本专利技术还提供上述药物组合物在制备抗骨肉瘤药物中的应用。
[0016]本专利技术的有益效果：本专利技术提供GSK126在制备抗骨肉瘤的药物中的应用，将GSK126应用于治疗骨肉瘤，不仅为制备抗骨肉瘤的药物提供了一种新来源，同时也发掘出了GSK126新的药用价值。
附图说明
[0017]图1：A：人骨肉瘤Saos
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2细胞在不同浓度的GSK126处理后的增殖实验结果图；B：人骨肉瘤U2OS细胞在不同浓度的GSK126处理后的增殖实验结果图。
[0018]图2:A：人骨肉瘤Saos2细胞在不同浓度的GSK126处理后的免疫荧光实验图；B：人骨肉瘤U2OS细胞在不同浓度的GSK126处理后的免疫荧光实验图。
[0019]图3:人骨肉瘤Saos
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2细胞、人骨肉瘤Saos2细胞在不同浓度GSK126作用后细胞内自噬相关蛋白p62和LC3的表达水平图。
具体实施方式
[0020]以下通过实施例形式的具体实施方式，对本专利技术的上述内容再作进一步的详细说明。但不应将此理解为本专利技术上述主题的范围仅限于以下的实例。凡基于本专利技术上述内容所实现的技术均属于本专利技术的范围。
[0021]实施例1细胞增殖实验
[0022](1)实验材料：人骨肉瘤Saos
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2细胞株与人骨肉瘤U2OS细胞株，购自中科院上海细胞库；高糖DMEM购自美国Gibco公司；胎牛血清购自美国Gibco公司；MTS细胞增殖试剂盒购自Promega(美国普洛麦格公司)；GSK126购自Selleck(中国,上海蓝木化工有限公司)；96孔板购自Thermo(美国赛默飞公司)。
[0023](2)实验方法：将人骨肉瘤Saos2细胞和人骨肉瘤U2OS细胞分别接种于96孔板，每孔约2000个细胞，100μl培养液，分别加入GSK126浓度为5μM、10μM、15μM的GSK126药物，于37℃，5％CO2培养，培养48h后分别加入20μlMTS，继续37℃孵育2h，于OD 490nm检测吸光度值。
[0024](3)实验结果如图1所示。由图1可知，GSK126能显著抑制骨肉瘤细胞的增殖，且抑制效果随GSK126浓度的升高而增强。
[0025]实施例2免疫荧光实验
[0026](1)实验材料：人骨肉瘤Saos
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2细胞株与人骨肉瘤U2OS细胞株，购自中科院上海细胞库；GSK126购自Selleck(中国,上海蓝木化工有限公司)；兔抗人LC3多克隆抗体购自CST(美国Cell signaling technology公司)；FITC荧光二抗、DAPI染液购自Sigma(美国西格玛
公司)；山羊血清、多聚甲醛溶液购自武汉博士德公司。
[0027](2)实验方法：将人骨肉瘤Saos2细胞和人骨肉瘤U2OS细胞经浓度为5μM、10μM、15μM的GSK126处理48小时后，用4％多聚甲醛溶液固定15分钟，再用PBS洗3遍，并用10％的山羊血清封闭，然后加入1:100稀释的兔抗人LC3一抗，于4℃孵育过夜，次日加入1:200稀释的FITC
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IgG二抗，于室温孵育1小时，最后加入DAPI复染细胞核，封片，荧光显微镜于观察结果。
[0028](3)实验结果如图2所示。由图2可知，GSK126能够增加自噬小体的表达，且随GSK126浓度的升高而，自噬小体的表达增多。
[0029]实施例3免疫印本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.GSK126在制备抗骨肉瘤的药物中的应用。2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述GSK126的分子式为C
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N6O2，分子量为526.27。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抗骨肉瘤是抑制骨肉瘤细胞增殖。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述抗骨肉瘤是增加自噬小体的表达。5.根据权利要求1所述的应用...

【专利技术属性】
技术研发人员：熊喜峰，王鹏珍，汤楠，张金丽，赖旭东，刘志河，李爱国，
申请(专利权)人：广州市红十字会医院暨南大学医学院附属广州红十字会医院，
类型：发明
国别省市：