用于T细胞受体基因组装的组合物和方法技术

本文提供了用于组装编码T细胞受体的核酸序列的组合物和方法。序列的组合物和方法。序列的组合物和方法。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于T细胞受体基因组装的组合物和方法
[0001]交叉引用
[0002]本申请要求2019年4月5日提交的美国临时专利申请号62/829,813、2019年4月25日提交的美国临时专利申请号62/838,465、2019年9月10日提交的美国临时专利申请号62/898,053和2020年2月10日提交的美国临时专利申请号62/972,231的权益，它们各自以引用的方式整体并入本文。

技术介绍

[0003]T细胞受体(TCR)可负责识别抗原
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主要组织相容性复合物，从而导致炎症应答的启动。存在许多T细胞子集，包括细胞毒性T细胞和辅助T细胞。细胞毒性T细胞(也称为CD8+T细胞)杀伤异常细胞，例如病毒感染的细胞或肿瘤细胞。辅助T细胞(也称为CD4+T细胞)有助于其他免疫细胞的激活和成熟。细胞毒性T细胞和辅助T细胞两者均在识别特异性靶抗原后执行它们的功能，从而触发它们各自的反应。T细胞的抗原特异性可由T细胞表面上表达的TCR来定义。T细胞受体是由两条多肽链组成的异源二聚体蛋白，最常见的是α链和β链，但是少数T细胞可以表达γ和δ链。TCR的特定本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于产生编码T细胞受体(TCR)链或其部分的核酸分子的方法，其包括：(a)提供至少一种核酸分子，其包含编码TCR链的CDR3的序列；(b)提供多种核酸分子，所述多种中的每种核酸分子包含衍生自TCR V基因的序列，其中所述多种核酸分子包含衍生自至少两种不同TCR V基因的至少两种不同序列；以及(c)将(a)的所述至少一种核酸分子与(b)的所述多种核酸分子在同一区室中接触，其中(a)的所述至少一种核酸分子能够与所述多种核酸分子中的核酸分子连接，以产生包含编码所述CDR3的序列和衍生自所述至少两种不同TCR V基因中的一种的序列的第三核酸分子，从而产生编码所述TCR链或其部分的所述核酸分子。2.如权利要求1所述的方法，其中所述至少一种核酸分子包含第一多种核酸分子，其中所述第一多种核酸分子中的每种核酸分子包含编码TCR链的CDR3的序列。3.如权利要求1或2所述的方法，其中(a)的所述至少一种核酸分子能够与所述多种核酸分子中的核酸分子特异性地连接，所述多种核酸分子中的核酸分子包含衍生自所述至少两种不同TCR V基因中的任何单个给定TCR V基因的序列。4.如权利要求1所述的方法，其中所述至少一种核酸分子还包含所述TCR链的J区。5.如权利要求2所述的方法，其中所述第一多种核酸分子中的每种核酸分子还包含TCR链的J区。6.如权利要求1
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5中任一项所述的方法，其中所述至少两种TCRV基因是人TCR V基因或小鼠TCR V基因。7.如权利要求1
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6中任一项所述的方法，其中所述至少两种TCRV基因选自由人TRAV1
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1、TRAV1
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2、TRAV2、TRAV3、TRAV4、TRAV5、TRAV6、TRAV7、TRAV8
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1、TRAV8
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2、TRAV8
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3、TRAV8
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4、TRAV8
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6、TRAV9
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1、TRAV9
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2、TRAV10、TRAV12
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1、TRAV12
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2、TRAV12
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3、TRAV13
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1、TRAV13
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2、TRAV14、TRAV16、TRAV17、TRAV18、TRAV19、TRAV20、TRAV21、TRAV22、TRAV23、TRAV24、TRAV25、TRAV26
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1、TRAV26
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2、TRAV27、TRAV29、TRAV30、TRAV34、TRAV35、TRAV36、TRAV38
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1、TRAV38
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2、TRAV39、TRAV40和TRAV41组成的组。8.如权利要求1
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6中任一项所述的方法，其中所述至少两种TCRV基因选自由人TRBV2、TRBV3
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1、TRBV4
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1、TRBV4
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2、TRBV4
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3、TRBV5
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1、TRBV5
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4、TRBV5
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5、TRBV5
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6、TRBV5
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8、TRBV6
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1、TRBV6
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2、TRBV6
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3、TRBV6
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4、TRBV6
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5、TRBV6
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6、TRBV6
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8、TRBV6
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9、TRBV7
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2、TRBV7
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3、TRBV7
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4、TRBV7
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6、TRBV7
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7、TRBV7
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8、TRBV7
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9、TRBV9、TRBV10
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1、TRBV10
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2、TRBV10
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3、TRBV11
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1、TRBV11
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2、TRBV11
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3、TRBV12
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3、TRBV12
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4、TRBV12
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5、TRBV13、TRBV14、TRBV15、TRBV16、TRBV18、TRBV19、TRBV20
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1、TRBV24
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1、TRBV25
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1、TRBV27、TRBV28、TRBV29
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1和TRBV30组成的组。9.如权利要求1
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8中任一项所述的方法，其中衍生自所述至少两种不同TCR V基因的所述多种序列中的每种序列包含编码L
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PART1、L
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PART2、FR1、CDR1、FR2、CDR2和/或FR3的序列。10.如权利要求1
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9中任一项所述的方法，其中所述TCR链为TCRα链、TCRβ链、TCRγ链或TCRδ链。11.如权利要求1
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10中任一项所述的方法，其中所述至少一种核酸分子还包含编码额外TCR链的额外CDR3的额外序列。12.如权利要求11所述的方法，其中所述至少一种核酸分子包含所述额外TCR链的额外
J区。13.如权利要求11或12所述的方法，其中所述编码CDR3的序列和所述编码额外CDR3的额外序列相隔至多100个核苷酸。14.如权利要求11
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13中任一项所述的方法，其中所述TCR链和所述额外TCR链为TCR链的同源对。15.如权利要求1
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14中任一项所述的方法，其中所述至少一种核酸分子包含连接序列，所述连接序列能够将所述至少一种核酸分子与所述多种核酸分子中的核酸分子连接以产生所述第三核酸分子。16.如权利要求15所述的方法，其中所述至少一种核酸分子和所述多种核酸分子中的核酸分子编码功能性TCR链或其部分。17.如权利要求15或16所述的方法，其中所述多种核酸分子中的核酸分子包含抗连接序列，所述抗连接序列与(a)的所述至少一种核酸分子的所述连接序列互补。18.如权利要求1
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17中任一项所述的方法，其还包括将(a)的所述至少一种核酸分子与(b)的所述多种核酸分子中的核酸分子连接。19.如权利要求18所述的方法，其中连接包括使(a)的所述至少一种核酸分子与(b)的所述多种核酸分子中的核酸分子杂交。20.如权利要求19所述的方法，其中杂交包括使(a)的所述至少一种核酸分子的所述连接序列与(b)的所述多种核酸分子中的核酸分子的所述抗连接序列杂交。21.如权利要求18
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20中任一项所述的方法，其还包括(i)使用(a)的所述至少一种核酸分子作为模板延伸所述多种核酸分子中的核酸分子的游离3...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈曦，伊利，
申请(专利权)人：根路径基因组学公司，
类型：发明
国别省市：