一株苹果专化型层出镰孢菌及其应用制造技术

本发明专利技术公开了一株苹果专化型层出镰孢菌及其应用，该菌株已于2021年5月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，其保藏编号为：CGMCC NO.22426。本发明专利技术的苹果专化型层出镰孢菌对苹果组培苗致病力较强，对甜瓜、葡萄巨峰、草莓、番茄、辣椒、芹菜、粉蕉、小麦、毛桃、樱桃均无侵染性。因此，本发明专利技术的层出镰孢菌仅对苹果砧木具有致病性，属于苹果专化型，这对我国抗病砧木的选育和苹果连作障碍的防治具有重要意义。防治具有重要意义。防治具有重要意义。

【技术实现步骤摘要】
一株苹果专化型层出镰孢菌及其应用


[0001]本专利技术涉及农业微生物
，具体涉及一株苹果专化型层出镰孢菌及其应用。

技术介绍

[0002]公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
[0003]我国主要的苹果栽植区为环渤海地区和西北黄土高原地区。随着苹果新品种的不断更新和现代宽行矮化密植栽培模式的推广，大面积的老龄苹果园亟待更新。由此产生的苹果再植病问题变得更加严重，且受影响的幼树数量和症状的严重性随着时间的推移而增加。苹果连作障碍的症状具体表现为枝条生长迟缓、果实品质和产量下降、根毛发育迟缓、皮层组织和根尖坏死发黑，严重阻碍了苹果产业的可持续发展。因此，探索导致苹果再植病害发生的主要微生物因素，将为病害管理提供重要的参考价值和理论基础。
[0004]苹果连作障碍(Apple Replant Disease，ARD)的致病因素非常复杂，包括生物和非生物因素，以有害土传真菌为主的生物因素占主导地位。在曾种植过苹果的土壤中重新种植苹果后的1
‑
2年内，病原微生物开始在根际土壤中积累，而根际土壤经熏蒸或厌氧消毒处理后，苹果植株生长明显改善，进一步验证了微生物因素是导致ARD发生的主要因素。Nyoni等发现在南非地区疫霉与苹果再植病显著相关。Moein等发现腐霉、不规则腐霉、最终腐霉、豌豆疫霉和仙人掌疫霉DNA的绝对含量与苹果根系的侵染率显著相关。Tilston等利用高通量测序技术研究发现在英国肯特地区腐霉属、柱孢属和镰孢属是造成苹果连作障碍的主要病原菌。Kelderer等研究发现腐皮镰孢菌、尖孢镰孢菌、柱孢属真菌和双核丝核菌是引起意大利地区苹果连作障碍的主要病原菌。从以上研究中可以得出，导致ARD发生的有害真菌类型在不同国家或地区是不同的。
[0005]镰孢菌是一类常见的植物病原菌，能侵染上百种植物，引起如枯萎、根腐和茎腐等多种病害，地理分布和寄主范围较广泛。毕秋艳等研究发现木贼镰孢菌是河北省大豆主产区的主要致病菌。邹庆甲等研究发现镰孢菌是河北省苹果园根际土壤中分离频率最高的有害真菌。王功帅等研究发现镰孢菌是引起环渤海湾地区苹果连作障碍的主要病原菌。
[0006]镰孢菌病害多为土传病害，在农业生产中极难防治，且镰孢菌变异较多，种内存在不同的专化型，如棉花、黄瓜、西瓜、香蕉、甜瓜、番茄等多种尖孢镰孢菌专化型先后被分离鉴定。因此，专化型的鉴别对于抗病育种及病害防治具有重要的理论和实践意义。但目前在苹果连作障碍中起关键致病作用的镰孢菌苹果专化型鲜有报道，且机理尚不明确。

技术实现思路

[0007]针对上述现有技术的不足，本专利技术的目的是提供一株苹果专化型层出镰孢菌及其应用。本专利技术的苹果专化型层出镰孢菌对苹果组培苗致病力较强，对甜瓜、葡萄巨峰、草莓、
番茄、辣椒、芹菜、粉蕉、小麦、毛桃、樱桃均无侵染性。因此，本专利技术的层出镰孢菌仅对苹果砧木具有致病性，属于苹果专化型，这对我国抗病砧木的选育和苹果连作障碍的防治具有重要意义。
[0008]具体的，本专利技术涉及以下技术方案：
[0009]本专利技术的第一方面，提供一株苹果专化型层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)MR5，层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)的中文分类命名也可以为“层生镰刀菌(Fusarium proliferatum)”，这两种分类命名表示的是同一种菌。该MR5菌株已于2021年5月17日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心(简称CGMCC，地址为：北京市朝阳区北辰西路1号院3号)，其生物保藏号为：CGMCC NO.22426。
[0010]所述苹果专化型层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)MR5分离自连作苹果园患病根系，具有如下特征：
[0011]在PDA培养基上25℃培养3d，菌落直径为24
‑
25mm，30℃菌落长满90mm培养皿，25℃菌落直径为74
‑
75mm。菌落初为白色，后变为肉桂色，7d后逐渐变为紫色，菌落背面产生灰紫色到深紫色色素。气生菌丝白色，菌丝羊绒状，较细，分布均匀，平铺。
[0012]产孢梗：气生菌丝上有大量产孢梗，分枝较多，单瓶梗或复瓶梗常见，常见一个较长的产孢细胞旁边有一个很短的产孢点，或形成“Z”字形的复瓶梗，为典型的层出镰孢菌复瓶梗。
[0013]小型分生孢子着生状态：小型分生孢子在产孢细胞顶端形成分生孢子链或聚集成假头状。分生孢子链较短，中等长度。链生和假头生小型分生孢子可以在同一分生孢子梗的两个孢子细胞上同时出现。气生菌丝上产生大量的小型分生孢子，棒糙形或卵形，一隔，顶端略膨大，较为细长，基部平截，5
‑
16.5μm
×
2.0
‑
4.0μm，多为0隔。
[0014]大型分生孢子形成于橘黄色的分生孢子座上。3
‑
5隔，分隔明显，30
‑
52.5μm
×
2.5
‑
4μm，多产生于KCLA培养基上。大型分生孢子细长，孢子较直，两端略弯曲呈舟形，基细胞具典型的足跟状。大型分生孢子具有典型的李瑟组特征。厚垣抱子不易形成。单生、对生或形成较短的串生、简单的聚生。孢子表面光滑或粗糙，透明，略微浅黄色。
[0015]本专利技术的第二方面，提供上述苹果专化型层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)MR5作为指示病原菌在如下(1)或(2)中的应用：
[0016](1)防治苹果连作障碍；
[0017](2)筛选具有防治苹果连作障碍功效的生防制剂。
[0018]本专利技术的第三方面，提供一种具有防治苹果连作障碍功效的生防制剂的筛选方法，包括以下步骤：
[0019]采用双培养法，以权利要求1所述的苹果专化型层出镰孢菌MR5为指示病原菌，根据抑菌圈的大小对生防制剂进行筛选。
[0020]本专利技术的第四方面，提供上述苹果专化型层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)MR5作为指示病原菌在选育具有抗重茬能力的苹果砧木中的应用。
[0021]本专利技术的第五方面，提供一种苹果抗病砧木的选育方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0022]在田间条件下，以苹果苗木的一年生枝条作为接种材料，接种上述苹果专化型层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)MR5，统计接种后苹果苗木的侵染率和病情指数，筛选
出高度抗病的苹果苗木作为苹果抗病砧木。
[0023]所述高度抗病是指：侵染率≤10％，病情指数≤10％。
[0024]针对枯萎症状进行0
‑
4级评分。0＝健康枝条或无症状枝条；1＝1
‑
33％的枝条组织受萎黄、芽坏死或落叶影响；2＝34
‑
66％受影响的组织；3＝67
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株苹果专化型层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)MR5，其保藏编号为：CGMCC NO.22426。2.权利要求1所述的苹果专化型层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)MR5作为指示病原菌在如下(1)或(2)中的应用：(1)防治苹果连作障碍；(2)筛选具有防治苹果连作障碍功效的生防制剂。3.一种具有防治苹果连作障碍功效的生防制剂的筛选方法，其特征在于，包括以下步骤：采用双培养法，以权利要求1所述的苹果专化型层出镰孢菌(Fusarium proliferatum)MR5为指示病原菌，根据抑菌圈的大小对生防...

【专利技术属性】
技术研发人员：尹承苗，段亚楠，毛志泉，吕毅，刘鑫，陈学森，沈向，
申请(专利权)人：山东农业大学，
类型：发明
国别省市：