高产Apicidin的野生菌株、突变株及其用途制造技术

技术编号:31714227 阅读:124 留言:0更新日期:2022-01-01 11:18
本申请公开一种高产Apicidin的野生菌株、突变株及其用途:野生菌株分类命名为亚洲镰刀菌Fusarium asiaticum,株号为18155,保藏号为CCTCC M20211190;利用基因组测序和次生代谢基因簇预测分析提取Apicidin合成基因簇的调控基因(FaAps2)序列;还在亚洲镰刀菌菌株18155基础上,利用基因改造进一步将FaAps2进行过量表达,构建了FaAps2过表达突变体菌株(OE::FaAps2)。在大米培养基中,过表达突变体菌株产Apicidin的能力显著提升,在大米培养基中培养21天,Apicidin的产量高达3148.41mg/kg,是野生菌株的2504倍。是野生菌株的2504倍。

【技术实现步骤摘要】
高产Apicidin的野生菌株、突变株及其用途


[0001]本专利技术属于应用微生物领域,尤其涉及一种具有抗癌活性的镰刀菌天然代谢产物、一类组蛋白乙酰化酶抑制剂Apicidin大量合成的产生菌筛选和高产突变体构建方法及其应用。

技术介绍

[0002]Apicidin[cyclo(N

O

methyl

L

tryptophanyl

L

isoleucinyl

D

pipecolinyl

L
‑2‑
amino
‑8‑
oxodecanoyl)]是一种真菌产生的天然次生代谢产物,具有环四肽结构。Apicidin具有抑制组蛋白乙酰化活性,是一类组蛋白去乙酰化酶抑制剂(histone deacetylase inhibitors,HDACi)。Apicidin在癌症治疗中有着广阔的应用前景,对多种癌细胞具有抗增殖活性,可以抑制肿瘤细胞生长、诱导本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种高产Apicidin野生菌株,其特征在于,分类命名为亚洲镰刀菌Fusarium asiaticum,株号为18155,保藏号为CCTCC M 20211190。2.一种编码Apicidin生物合成的转录调控因子的FaAps2基因,其特征在于,所述FaAps2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。3.一种FaAps2基因过表达框,其特征在于,包括:FaAps2基因和插入在FaAps2基因起始密码子ATG前的强启动子gpdA和筛选标记基因NEO的串联序列,所述FaAps2基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。4.根据权利要求3所述的FaAps2基因过表达框,其特征在于,所述强启动子gpdA的核苷酸序列如SEQ ID NO:17所示;所述筛选标记基因NEO的核苷酸序列如SEQ ID NO:18所示。5.根据权利要求3所述的FaAps2基因过表达框,其特征在于,构建方法为:通过Double

joint PCR方法在FaAps2基因的起始密码子ATG前插入强启动子gpdA和筛选标记基因NEO的串联序列。6.一种高产Apicidin突变株,其特征在于,包括:如权利要求1所述高产Apicidin野生菌株和转化至所述高产Apicidin野生菌株的原生质体中的FaAps2基因过表达框;所述FaAps2基因过表达框为如权利要求3~5任一项权利要求所述的FaAps2基因过表达框。7.根据权利要求6所述的突变株,其特征在于,所述FaAps2基因过表达框通过PEG介导的原生质体转化方法转化至所述高产Apicidin野生菌株的原生质体中。8.一种高产A...

【专利技术属性】
技术研发人员:刘馨武德亮徐剑宏史建荣高弢李仁远方欣汪爽
申请(专利权)人:江苏省农业科学院
类型:发明
国别省市:

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