一种快速检测白酒酿造原料或酒曲中氰化物含量的方法技术

本发明专利技术公开了一种快速检测白酒酿造原料或酒曲中氰化物含量的方法，属于白酒分析检测技术领域。本发明专利技术采用QuEChERS技术处理白酒酿造原料或酒曲样品，加入乙腈并进行超声处理，加入陶瓷均质子和MgSO4、NaOAc，混合均匀后离心处理；再在上清液中加入MgSO4、十八烷基硅烷键合硅胶C

【技术实现步骤摘要】
一种快速检测白酒酿造原料或酒曲中氰化物含量的方法


[0001]本专利技术涉及一种快速检测白酒酿造原料或酒曲中氰化物含量的方法，属于白酒分析检测


技术介绍

[0002]氰化物是指带氰基的一类有毒化合物，其常以氰苷的形式广泛地存在于植物中，目前，已在2500多种植物中发现了氰苷形式的氰化物。含氰植物经食入进人体后，氰苷会经人体消化系统发生酶促水解反应生成非葡萄糖苷氰化物(氰醇和游离氰化物)，释放出的氰离子可抑制细胞色素C氧化酶的活性，阻断呼吸链造成组织缺氧，使机体陷入内窒息状态。据报道，人体口服氢氰酸致死量为0.7～3.5mg/kg，人体血液中氢氰离子浓度上限为23～26mmol/L。氰化物中毒会对人体神经、呼吸、心血管、消化系统和皮肤产生严重影响甚至危及生命。
[0003]在白酒里含有微量的对人体健康有威胁性影响的氰化物，主要来源于酿造原料。制曲和制酒常用的高粱、大麦、小麦等原料中的氰苷，在制曲和制酒过程中会发生酶解和热分解；氰化物在发酵结束后经蒸馏进入到酒体，会被进一步氧化成异氰酸盐，之后易与乙醇反应生成氨基甲酸乙酯(EC)，一种白酒致癌因子。进一步影响白酒产品的质量与安全，因此，酿酒原料和酒曲中氰化物的检测对于保障白酒的质量安全十分重要。
[0004]目前应用于氰化物的检测方法主要有化学分析法、原子吸收法、分光光度法、色谱法、色谱结合质谱法。而对于白酒酿造的原料和酒曲，因基质较为复杂，氰化物含量微量，尚无对应可参考的标准分析方法。虽然现行的GB 5009.36—2016《食品安全国家标准食品中氰化物的测定》给出了测定氰化物的方法，但是这些方法却难以适用于原料或酒曲的基质中氰化物的测定。主要原因是原料和酒曲基质的pH、颜色以及浑浊度会对异烟酸
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吡唑啉酮分光光度法检测总氰化物造成严重的干扰，且该分光光度法需要进行蒸馏前处理，所需样品量较大，较难进行批量、简易操作，大大浪费了检测的原料和时间。而采用顶空气相色谱方法，虽然可以不受颜色干扰地应用于白酒酿造的原料和酒曲基质检测，但其检出结果仅是游离氰化物的含量，且该方法对仪器设备要求高，难以普遍推广适用，难以满足实际生产中的简单快速的检测需求。

技术实现思路

[0005][技术问题][0006]原料和酒曲基质的pH、颜色以及浑浊度使得现有检测氰化物的方法难以适用，或检测方法对仪器设备要求高，难以普遍推广适用。
[0007][技术方案][0008]本专利技术采用QuEChERS技术处理白酒酿造原料或酒曲样品，异烟酸
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巴比妥酸分光光度法进行氰化物含量检测，对仪器设备要求低，更易实现广泛推广到实际生产中的快速监测；且可批量前处理样品，操作简单，能高效提高检测效率。具有快速、经济、广适等优点
的检测方法。
[0009]一种快速检测白酒酿造原料或酒曲中氰化物含量的方法，所述方法首先利用QuEChERS前处理技术处理白酒酿造原料或酒曲样品，然后利用异烟酸
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巴比妥酸分光光度法检测白酒酿造原料或酒曲中的氰化物，所述方法具体包括以下步骤：
[0010](1)QuEChERS前处理技术处理原料或酒曲：将酿酒原料或酒曲粉碎后过筛，称取部分加入离心管中，再加入水进行水合旋涡混匀，浸泡15～30min，之后加入乙腈并进行超声处理，再进行冷冻，之后加入陶瓷均质子和MgSO4、NaOAc，混合均匀后离心处理；再在上清液中加入MgSO4、十八烷基硅烷键合硅胶C
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和石墨化炭黑GCB，混合均匀后离心处理；最后，取上清液吹干后加入NaOH溶液，即得到QuEChERS前处理后的白酒酿造原料或酒曲试样；
[0011](2)白酒酿造原料或酒曲的显色反应：取步骤(1)得到的QuEChERS前处理后的白酒酿造原料或酒曲移至比色管中，利用异烟酸
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巴比妥酸分光光度法检测于波长600nm处测吸光度；
[0012](3)绘制标准曲线：使用水中氰成分分析标准物质GBW(E)080115，配制氰离子标准中间液，取不同体积的氰离子标准中间液并加入NaOH溶液配制成一系列相同体积、不同浓度的氰离子标准液；利用异烟酸
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巴比妥酸分光光度法检测不同浓度的氰离子标准液的吸光度值，根据浓度和吸光度的关系绘制得到吸光度
‑
氰化物浓度的标准曲线；
[0013](4)计算白酒酿造原料或酒曲中氰化物的含量：取步骤(2)检测得到的吸光度，对比步骤(3)绘制的标准曲线，得到的白酒酿造原料或酒曲样品中氰化物质量A，带入质量浓度公式：
[0014][0015]ω(CN
‑
)——样品中氰化物含量(以CN
‑
计)，单位为毫克每千克(mg/kg)；
[0016]V0——QuEChERS前处理试样乙腈萃取体积，单位为毫升(mL)；
[0017]V1——QuEChERS前处理净化试样后取用的体积，单位为毫升(mL)；
[0018]A——分光测定试样对比标准曲线得到的氰化物质量(以CN
‑
计)，单位为微克(μg)；
[0019]m0——试样质量，单位为克(g)；
[0020]1000——单位换算系数。
[0021]进一步的，步骤(1)中，所述样品过筛优选过425μm标准筛。
[0022]进一步的，步骤(1)中，酿酒原料或酒曲样品与水的质量体积比为1:(1.5～2)g/mL。
[0023]进一步的，步骤(1)中，酿酒原料或酒曲样品与乙腈的质量体积比为1:(2.5～3)g/mL。
[0024]进一步的，步骤(1)中，所述超声处理的时间为8～15min。
[0025]进一步的，步骤(1)中，所述冷冻优选为
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20℃冷冻8～12min。
[0026]进一步的，步骤(1)中，所述分配盐MgSO4与NaOAc的质量比为4:1，其中MgSO4与酿酒原料或酒曲样品所添加的水的质量体积比为(2.5～3):5g/mL。
[0027]进一步的，步骤(1)中，当样品为酿酒原料时，MgSO4、十八烷基硅烷键合硅胶C
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和石墨化炭黑GCB的质量比为12:5:5，其中MgSO4与上清液的质量体积比为0.3:2g/mL；当样品
为酿酒酒曲时，MgSO4、十八烷基硅烷键合硅胶C
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和石墨化炭黑GCB的质量比为3:1:1，其中MgSO4与上清液的质量体积比为0.3:2g/mL。
[0028]进一步的，步骤(1)中，离心优选为5000r/min离心5min。
[0029]进一步的，步骤(2)中，利用异烟酸
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巴比妥酸分光光度法的操作包括：加入酚酞指示剂后再用乙酸溶液调至红色褪去，再用NaOH溶液调至红色，然后加磷酸盐缓冲溶液和氯胺T溶液，摇匀后放置3～5min，之后加入异烟酸
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巴比妥酸溶液，并加水至比色管刻度，加塞振荡混合均匀，在25
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种快速检测白酒酿造原料或酒曲中氰化物含量的方法，其特征在于，所述方法首先利用QuEChERS前处理技术处理白酒酿造原料或酒曲样品，然后利用异烟酸
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巴比妥酸分光光度法检测白酒酿造原料或酒曲中的氰化物，所述方法具体包括以下步骤：(1)QuEChERS前处理技术处理原料或酒曲：将酿酒原料或酒曲粉碎后过筛，称取部分加入离心管中，再加入水进行水合旋涡混匀，浸泡15～30min，之后加入乙腈并进行超声处理，再进行冷冻，之后加入陶瓷均质子和MgSO4、NaOAc，混合均匀后离心处理；再在上清液中加入MgSO4、十八烷基硅烷键合硅胶C
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和石墨化炭黑GCB，混合均匀后离心处理；最后，取上清液吹干后加入NaOH溶液，即得到QuEChERS前处理后的白酒酿造原料或酒曲试样；(2)白酒酿造原料或酒曲的显色反应：取步骤(1)得到的QuEChERS前处理后的白酒酿造原料或酒曲移至比色管中，利用异烟酸
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巴比妥酸分光光度法检测于波长600nm处测吸光度；(3)绘制标准曲线：使用水中氰成分分析标准物质GBW(E)080115，配制氰离子标准中间液，取不同体积的氰离子标准中间液并加入NaOH溶液配制成一系列相同体积、不同浓度的氰离子标准液；利用异烟酸
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巴比妥酸分光光度法检测不同浓度的氰离子标准液的吸光度值，根据浓度和吸光度的关系绘制得到吸光度
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氰化物浓度的标准曲线；(4)计算白酒酿造原料或酒曲中氰化物的含量：取步骤(2)检测得到的吸光度，对比步骤(3)绘制的标准曲线，得到的白酒酿造原料或酒曲样品中氰化物质量A，带入质量浓度公式：ω(CN
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)——样品中氰化物含量(以CN
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计)，单位为毫克每千克(mg/kg)；V0——QuEChERS前处理试样乙腈萃取体积，单位为毫升(mL)；V1——QuEChERS前处理净化试样后取用的体积，单位为毫升(mL)；A——分光测定试样对比标准曲线得到的氰化物质量(以CN
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计)，单位为微克(μg)；m0——试样质量，单位为克(g)；1000——单位换算系数。2.根据权利要求1所述的一种快速检测白酒酿造原料或酒曲中氰化物含量的方法，其特征在于，步骤(1)中，酿酒原料或酒曲样品与水的质量体积比为1:(1.5～2)g/mL；酿酒原料或酒曲样品与乙腈的质量体积比为1:(2.5～3)g/mL。3.根据权利要求1所述的一种快速检测白酒酿造原料或酒曲中氰化物含量的方法，其特征在于，所述分配盐MgSO4与NaOAc的质量比为4:1，其中MgSO4与酿酒原料或酒曲样品所添加的水的质量体积比为(2.5～3):5g/mL。4.根据权利要求1～3任一项所述的一种快速检测白酒酿造原料或酒曲中氰化物含量的方法，其特征在于，步骤(1)中，当样品为酿酒原料时，...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈双，徐岩，朱晓春，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：