【技术实现步骤摘要】
基于DSN酶检测Hg
2+
的DNA生物传感器
[0001]本专利技术属于生物领域,具体涉及一种基于DSN酶检测Hg
2+
的DNA生物传感器。
技术介绍
[0002]双链特异性核酸酶(duplex-specificnuclease,DSN)是一种新型的核酸酶,已从虾、蟹等生物的消化腺或肝胰腺中成功分离出
[1]。DSN酶对于双链DNA(dsDNA)以及DNA和RNA杂交体中的DNA具有特异性的剪切效果,并且对于单链DNA(sDNA)以及RNA形成的双链结构几乎没有生物活性。在对DNA-RNA杂交体中的DNA进行水解时,还可以保持RNA链的完整性。由于DSN酶的这一特性,DSN酶被广泛的应用于miRNA的检测中
[2-6]。其次,DSN酶剪切dsDNA和DNA-RNA杂交体中的DNA链时,对双链的碱基对数有要求。只有当DNA双链的碱基对数大于10bp时,DSN酶才能水解DNA,而在DNA-RNA杂交体中,只有碱基对数大于15bp时,DSN酶才能对杂交体中的DNA链进行剪切。此外 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种用于Hg
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浓度检测的核苷酸序列组,其特征在于,包括:核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示的T-探针、核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示的序列M和核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示的序列M4;优选的,所述T-探针的5
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端修饰有荧光基团,3
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端修饰有荧光淬灭基团。2.一种DNA生物传感器,其特征在于,包括权利要求1所述的核苷酸序列组;优选的,所述DNA生物传感器还包括DSN酶。3.根据权利要求2所述的DNA生物传感器在检测Hg
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浓度中的应用。4.一种制备权利要求2所述的DNA生物传感器的方法,其特征在于,包括:S1:合成权利要求1所述的核苷酸序列组;S2:配制反应体系液,所述反应体系包括0.025-0.3U的DSN酶和核苷酸序列组;S3:将反应体系液避光孵育0.5-2h,然后加入EDTA-2Na溶液终止反应,即得到DNA生物传感器。5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,在S2中,所述反应体系包括0.1U的DSN酶。6.根...
【专利技术属性】
技术研发人员:曾冬冬,朱长锋,沈锡中,徐晓慧,李晖,
申请(专利权)人:上海健康医学院,
类型:发明
国别省市:
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