一种抑制肝癌细胞生长的活性多肽及其制备方法和应用技术

本发明专利技术公开了一种抑制肝癌细胞生长的活性多肽及其制备方法和应用，所述活性多肽的氨基酸序列为VNNSSLIGLGYTQTLKPGIK，本发明专利技术的活性多肽可以靶向肿瘤细胞，抑制肝癌细胞的DNA合成，抑制肝癌细胞的增殖生长，加速肝脏组织的修复，恢复肝功能。本发明专利技术合成的活性多肽，可用于制备预防或治疗肝炎、肝硬化和肝纤维化药物的研发。物的研发。物的研发。

【技术实现步骤摘要】
一种抑制肝癌细胞生长的活性多肽及其制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及生物医药
，具体涉及一种抑制肝癌细胞生长的活性多肽及其制备方法和应用。

技术介绍

[0002]近年来，肝炎一直是全球性重要公共卫生问题之一，世卫组织最新数据显示，全球共有20亿人感染肝炎病毒，其中约有5亿人感染了慢性肝炎，每年约有100万人因此而死亡。肝脏相关的疾病，包括各种肝炎以及肝硬化、肝纤维化，是困扰人类健康的重大疾病，肝炎、肝硬化及肝纤维化均会有大量的肝细胞坏死，致肝衰竭甚至危及生命。
[0003]活性多肽作为一种新型的蛋白药物引发了学者的强烈兴趣。活性多肽其独特的氨基酸组成及结构中的两亲性，使多肽可以和细胞核内大分子如核酸、蛋白质等，以及病毒或细菌表面带负电荷的成分相结合，进而破坏细胞膜结构或胞内大分子而扰乱细胞的正常功能并导致细胞死亡。近年来，多肽类药物治疗肝脏疾病已经取得了不少进步，但是，到目前为止，治疗肝脏疾病仍旧缺乏有效的治疗策略和有效药物。
[0004]因此，提供一种活性多肽，能抑制癌细胞的DNA合成，尤其是抑制肝癌细胞再生是本领域技术人员亟需解决的问题。

技术实现思路

[0005]本专利技术目的在于为克服现有的技术缺陷，提供了一种抑制肝癌细胞生长的活性多肽及其制备方法和应用，本专利技术的活性多肽可以靶向肝脏器官，抑制肝癌细的增殖生长，加速肝脏组织的修复，恢复肝功能。
[0006]为了解决上述技术问题，本专利技术提供了以下技术方案：
[0007]第一方面，提供了一种抑制肝癌细胞生长的活性多肽，所述活性多肽的氨基酸序列为VNNSSLIGLGYTQTLKPGIK。
[0008]第二方面，提供了一种如第一方面所述的活性多肽的制备方法，包括以下步骤：
[0009](1)以氯三苯甲基氯树脂为起始原料，由9
‑
芴甲氧羰基保护的氨基酸为单体进行合成反应，将氯三苯甲基氯树脂接上氨基酸以合成多肽溶液；
[0010](2)合成反应完毕后，加入切割液，将多肽溶液从氯三苯甲基氯树脂上切割下来；
[0011](3)使用乙醚沉淀多肽溶液和/或用氮气吹干多肽溶液，并采用制备型HPLC进行纯化，得到所述活性多肽。
[0012]进一步地，所述合成反应的合成方向为：从C端向N端按照所述活性多肽的氨基酸序列依次缩合。
[0013]进一步地，按质量百分比计，所述切割液包括以下组分：TFA95％，水1％，EDT 2％和TIS 2％。
[0014]第三方面，提供了一种如第一方面所述的活性多肽在制备预防或治疗肝炎、肝硬化和肝纤维化药物中的应用。
[0015]如上所述，本专利技术的药物能预防或治疗肝炎、肝硬化和肝纤维化，通常，可将本专利技术的活性多肽作为活性成分配制于无毒的、惰性的和药学上可接受的载体介质。配制好的药物可以通过常规途径进行给药，包括但并不限口服、肌内、腹膜内、静脉内、皮下、皮内、或局部给药。
[0016]当药物的剂型为用于口服施用的药物时，其含有安全有效量的本专利技术的活性多肽以及药学上可接受的载体和/或辅剂，口服施用的药物可制成片剂、散剂、颗粒剂、胶囊剂等常用剂型，所用的赋型剂可以为淀粉、乳糖、蔗糖、甘露糖、羟甲基纤维素中的至少一种；崩解剂可以为交联聚乙烯比咯烷酮、羧甲基淀粉钠中的至少一种；粘合剂可以为明胶、聚乙二醇中的至少一种。用于口服施用的药物除上述剂型外，还可以制成乳剂、糖浆剂等。
[0017]本专利技术的药物还可以被制成注射剂，可以与注射用水、生理盐水、葡萄糖水制成注射剂，上述注射剂可通过常规方法进行制备。
[0018]此外，本专利技术的活性多肽还可以与其他治疗肝炎、肝硬化和肝纤维化的药物联用。
[0019]与现有技术相比，本专利技术具有以下有益效果：
[0020]本专利技术提供的的活性多肽，可以靶向肝脏器官，明显抑制肿瘤细胞的DNA合成，抑制肝癌细胞的增殖生长，加速肝脏组织的修复，恢复肝功能。
[0021]本专利技术附加的方面和优点将在下面的描述中部分给出，这些将从下面的描述中变得明显，或通过本专利技术的实践了解到。
附图说明
[0022]此处所说明的附图用来提供对本专利技术的进一步理解，构成本申请的一部分，并不构成对本专利技术的不当限定，在附图中：
[0023]图1为本专利技术提供的活性多肽的高效液相色谱图；
[0024]图2为本专利技术提供的活性多肽的质谱图；
[0025]图3为本专利技术提供的活性多肽对SMMC
‑
7721、LO
‑
2、Chang liver、HepG
‑
2和Huh
‑
7细胞生长的抑制作用图。
具体实施方式
[0026]为为了更充分的理解本专利技术的
技术实现思路
，下面将结合附图以及具体实施例对本专利技术作进一步介绍和说明；显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例；基于本专利技术中的实施例，本领域技术人员在没有作出创造性劳动前提下所获得的所有其它实施例，都属于本专利技术保护的范围。
[0027]对于本领域的技术人员来说，通过阅读本说明书公开的内容，本专利技术的特征、有益效果和优点将变得显而易见。
[0028]除非另外指明，所有百分比、分数和比率都是按本专利技术组合物的总重量计算的。本文术语“重量含量”可用符号“％”表示。
[0029]本文中“包括”、“包含”、“含”、“含有”、“具有”或其它变体意在涵盖非封闭式包括，这些术语之间不作区分。术语“包含”是指可加入不影响最终结果的其它步骤和成分。术语“包含”还包括术语“由...组成”和“基本上由...组成”。本专利技术的组合物和方法/工艺可包含、由其组成和基本上由本文描述的必要元素和限制项以及本文描述的任一的附加的或任
选的成分、组分、步骤或限制项组成。
[0030]在本专利技术的方案中，DCM为二氯甲烷；HBTU为苯并三氮唑
‑
N,N,N',N'
‑
四甲基脲六氟磷酸盐；DIEA为N,N
‑
二异丙基乙胺；DMF为N,N
‑
二甲基甲酰胺；TFA为三氟乙酸；EDT为1,2
‑
乙二硫醇；Fmoc为9
‑
芴甲氧羰基；TIS为三异丙基硅烷。
[0031]实施例1
[0032]本实施例提供一种活性多肽的制备方法，包括以下步骤：
[0033](1)将3g氯三苯甲基氯树脂(取代度为1.03mmol/g)放入反应管中，加入45mL DCM，震荡30min；
[0034](2)接第一个氨基酸
[0035]通过砂芯抽滤掉溶剂，加入10mmol的Fmoc
‑
Gly氨基酸，加入DMF溶解，再加入30mmol的DIEA，震荡60min；
[0036](3)脱保护
[0037]去掉DMF，加20％哌啶DMF溶液45mL，反应5min；去掉再加20％哌啶DMF溶液，15min；
[0038]本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抑制肝癌细胞生长的活性多肽，其特征在于，所述活性多肽的氨基酸序列为VNNSSLIGLGYTQTLKPGIK。2.一种如权利要求1所述的活性多肽的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)以氯三苯甲基氯树脂为起始原料，由9
‑
芴甲氧羰基保护的氨基酸为单体进行合成反应，将氯三苯甲基氯树脂接上氨基酸以合成多肽溶液；(2)合成反应完毕后，加入切割液，将多肽溶液从氯三苯甲基氯树脂上切割下来；(3)使用乙醚沉淀多肽溶液和/或用氮气吹干多肽溶液，并采用制备型HPLC进行纯化，得到所述活性多肽。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：王小明，李杉，张雷，
申请(专利权)人：中山市华南理工大学现代产业技术研究院，
类型：发明
国别省市：