一种含有去蛋白骨的注射填充剂及其制备方法技术

本发明专利技术公开了一种含有去蛋白骨的注射填充剂及其制备方法。该填充剂是由重组胶原蛋白

【技术实现步骤摘要】
一种含有去蛋白骨的注射填充剂及其制备方法


[0001]本专利技术属于医学美容、整形
，具体涉及一种含有去蛋白骨的注射填充剂及其制备方法。

技术介绍

[0002]为达到面部年轻化、美观化的效果，软组织填充剂的使用受到了越来越多的关注，并且对于软组织填充剂的性能和使用提出了更高的要求：良好的生物相容性、较高的安全性和更为持久的填充作用。目前最常用的软组织填充剂为透明质酸钠填充剂，经过交联工艺处理可以显著延长其在体内的存留时间，但仍不能实现长期的填充效果，同时其本身及降解产物多糖不具有促进植入部位内源性胶原蛋白再生的作用；另外一种较为常用的软组织填充剂为胶原蛋白，作为最早获得FDA批准使用的注射用填充剂活性成分，存在填充效果持续时间短的问题，同时因胶原蛋白主要来源于牛、猪等异种动物，免疫和病毒风险也阻碍了胶原蛋白的应用和发展。为了延长软组织填充剂在体内留存的时间，逐渐发展了以可吸收或不可吸收材料制成的微球，例如聚左旋乳酸(PLLA)、聚己内酯(PCL)、羟磷灰石钙、硅胶、聚甲基丙烯酸甲酯(PMMA)等类的微球，与凝胶基质混合而形成的填充剂产品。
[0003]目前羟磷灰石钙类填充剂产品已获批上市。这类产品一般含有羟磷灰石钙微球、基质成分以及选择性添加的麻醉剂成分，随着基质成分的降解，羟磷灰石钙微球可刺激内源性胶原蛋白的生成。luminera公司的产品HArmonyCA含有羟磷灰石钙、交联透明质酸钠凝胶、磷酸缓冲液和利多卡因；MerZ公司的产品Radiesse含有30％的粒径在25
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45μm羟磷灰石钙以及70％的羧甲基纤维素钠凝胶成分；中国专利201611075350.X、202010039494.X、202010545986.6分别公开了羟磷灰石钙与含有胶原蛋白的凝胶基质相混合而形成的注射填充剂；中国专利201110363121.9公开了一种羟基磷灰石与透明质酸钠、重组胶原蛋白相混合而形成的软组织填充材料。
[0004]以上这些专利技术和已上市的产品中，均采用合成羟磷灰石钙作为微球成分来源，而合成羟磷灰石钙常采用酸碱中和方法，即以特定比例加入反应试剂，在高温作用下搅拌反应生成羟磷灰石钙。这种方法依赖于反应体系，容易出现产品成分不均一的问题，同时形成的实心微球具有一定疏水性，引发填充剂的体内异物反应风险。同时，在凝胶基质的选择上，或单纯选择多糖成分，从而不能与微球成分共同实现促进自体胶原蛋白再生的协同作用；或选择多糖与胶原蛋白的复合成分，但在体内存留时间过短；从而影响填充剂的有效性。
[0005]目前亟待开发可发挥长效、安全的支撑作用的软组织填充材料。

技术实现思路

[0006]针对现有技术存在的问题，本专利技术提供一种含有去蛋白骨的注射填充剂及其制备方法。
[0007]为达到上述目的，本专利技术采用了以下技术方案：
[0008]一种含有去蛋白骨的注射填充剂，该填充剂包括重组胶原蛋白
‑
去蛋白骨复合微球(去蛋白骨微粒上修饰交联重组胶原蛋白)以及含有交联透明质酸钠和重组胶原蛋白的凝胶，所述复合微球分散在所述凝胶中。
[0009]优选的，所述复合微球:凝胶的质量比为1:6
‑
1:1(例如1:4
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1:2)，凝胶中透明质酸钠的浓度为5
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25mg/mL(例如15
‑
20mg/mL)。
[0010]优选的，所述凝胶中重组胶原蛋白的浓度为5
‑
25mg/mL(例如5
‑
15mg/mL)。
[0011]优选的，所述重组胶原蛋白选自通过微生物基因重组或植物基因重组表达系统得到的I型胶原蛋白、III型胶原蛋白、Ⅳ型胶原蛋白、
Ⅶ
型胶原蛋白、弹性蛋白、粘连蛋白或者纤连蛋白中的一种或多种，或者重组胶原蛋白选自含有所述I型胶原蛋白、III型胶原蛋白、Ⅳ型胶原蛋白、
Ⅶ
型胶原蛋白、弹性蛋白、粘连蛋白或者纤连蛋白的融合蛋白，以上重组胶原蛋白可以基于天然人胶原蛋白的特征和主要功能序列重新优化设计基因序列，并通过表达系统获得，具有良好的生物学相容性、可加工性以及无病毒传染风险等优点。
[0012]优选的，所述凝胶还含有麻醉剂，麻醉剂为利多卡因或苯佐卡因，凝胶中麻醉剂的浓度为1
‑
5mg/mL。
[0013]优选的，所述凝胶是通过在碱性条件下将分子量为20万
‑
300万的透明质酸钠和分子量为40K
‑
120K的重组胶原蛋白进行化学交联后分散至生理缓冲溶液(例如pH6
‑
8的磷酸盐缓冲液)而制成的。
[0014]优选的，所述复合微球是将去蛋白骨微粒通过乳化交联包覆重组胶原蛋白而形成的外形规则圆整的微粒，其中去蛋白骨微粒是动物源性骨组织颗粒经灭病毒、脱脂和脱细胞以及去蛋白处理后进行粉粹、钝化而形成的粒径10
‑
80μm、外形不规则但无棱角的骨组织微粒。
[0015]一种含有去蛋白骨的注射填充剂的制备方法，包括以下步骤：
[0016]将透明质酸钠和重组胶原蛋白进行交联后与生理缓冲溶液混匀得凝胶，或者将透明质酸钠和重组胶原蛋白进行交联后与麻醉剂以及生理缓冲溶液混匀得凝胶；在上述去蛋白骨微粒上修饰交联重组胶原蛋白得复合微球；将所得凝胶与复合微球混合后依次进行脱气、灭菌，得含有去蛋白骨的注射填充剂。
[0017]优选的，所述注射填充剂的制备方法具体包括以下步骤：凝胶的制备、骨颗粒的制备、去蛋白骨微粒的制备、复合微球的制备、复合微球与凝胶混合及后处理；
[0018]1)凝胶的制备
[0019]在0.02
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2M碱性溶液中加入终浓度(质量分数)分别为0.02％
‑
5％、5％
‑
25％及2％
‑
20％的交联剂、透明质酸钠及重组胶原蛋白，然后于30
‑
60℃反应1
‑
16小时得凝胶I，将凝胶I水洗后用不含有或含有麻醉剂的pH6
‑
8的磷酸盐缓冲液稀释至透明质酸钠的浓度为5
‑
25mg/mL(或在将透明质酸钠的浓度稀释为5
‑
25mg/mL同时将麻醉剂的浓度稀释为1
‑
5mg/mL)，得凝胶II；
[0020]2)骨颗粒的制备
[0021]将切割成块状的动物骨组织用水清洗后粉碎为颗粒，然后用所含SDS、NaOH和有机溶剂的质量分数分别为0.2％
‑
2％、0.3％
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4％和20％
‑
80％的混合水溶液，按照20
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60分钟/次超声处理3
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6次；然后用水清洗、干燥(低于60℃)，得到灭病毒、脱脂和脱细胞的骨组织颗粒；
[0022]3)去蛋白骨微粒的制备
[0023]将灭病毒、脱脂和脱细胞的骨组织颗粒再次粉粹后于60本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种含有去蛋白骨的注射填充剂，其特征在于：该填充剂包括重组胶原蛋白
‑
去蛋白骨复合微球以及含有交联透明质酸钠和重组胶原蛋白的凝胶，所述复合微球分散在所述凝胶中。2.根据权利要求1所述一种含有去蛋白骨的注射填充剂，其特征在于：所述复合微球:凝胶的质量比为1:6
‑
1:1，凝胶中透明质酸钠的浓度为5
‑
25mg/mL。3.根据权利要求1所述一种含有去蛋白骨的注射填充剂，其特征在于：所述凝胶中重组胶原蛋白的浓度为5
‑
25mg/mL。4.根据权利要求1所述一种含有去蛋白骨的注射填充剂，其特征在于：所述凝胶还含有麻醉剂，麻醉剂为利多卡因或苯佐卡因，凝胶中麻醉剂的浓度为1
‑
5mg/mL。5.根据权利要求1所述一种含有去蛋白骨的注射填充剂，其特征在于：所述凝胶是通过在碱性条件下将分子量为20万
‑
300万的透明质酸钠和分子量为40K
‑
120K的重组胶原蛋白进行化学交联后分散至生理缓冲溶液而制成的。6.根据权利要求1所述一种含有去蛋白骨的注射填充剂，其特征在于：所述复合微球是将去蛋白骨微粒通过乳化交联包覆重组胶原蛋白而形成的外形规则圆整的微粒,其中去蛋白骨微粒是动物源性骨组织颗粒经灭病毒、脱脂和脱细胞以及去蛋白处理后进行粉粹、钝化而形成的粒径10
‑
80μm、外形不规则但无棱角的骨组织微粒。7.一种含有去蛋白骨的注射填充剂的制备方法，其特征在于：包括以下步骤：将透明质酸钠和重组胶原蛋白进行交联后与生理缓冲溶液混匀得凝胶，或者将透明质酸钠和重组胶原蛋白进行交联后与麻醉剂以及生理缓冲溶液混匀得凝胶；在去蛋白骨微粒上修饰交联重组胶原蛋白得复合微球；将所得凝胶与复合微球混合。8.根据权利要求7所述一种含有去蛋白骨的注射填充剂的制备方法，其特征在于：所述注射填充剂的制备方法具体包括以下步骤：1)在0.02
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2M碱性溶液中加入终浓度分别为0.02％
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5％、5％
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25％及2％
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20％的交联剂、透明质酸钠及重组胶原蛋白，然后于30
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60℃反应1
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16小时得凝胶I，将凝胶I水洗后用含或不含麻醉剂的pH6
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8的磷酸盐缓冲液稀释至透明质酸钠的浓度为5
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25mg/mL，得凝胶II；2)将切割成块状的动物骨组织用水清洗后粉碎为颗粒，然后用所含SDS、NaOH和有机溶剂...

【专利技术属性】
技术研发人员：张立娟，
申请(专利权)人：西安德诺海思医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：