【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】基于CLEC9A的嵌合蛋白复合物
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2019年9月26日提交的美国临时专利申请号62/906,442和2019年3月28日提交的美国临时专利申请号62/825,584的权益和优先权，所述申请的内容特此以引用方式整体并入。
[0003]本专利技术部分地涉及嵌合蛋白复合物，所述嵌合蛋白复合物包括片段可结晶结构域(Fc)、作为靶向部分的Clec9A VHH和作为信号传导剂的经修饰的干扰素α2(IFNα2)。还公开了这些嵌合蛋白复合物作为治疗剂的用途。
[0004]序列表
[0005]本申请包含已通过EFS
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Web以ASCII格式提交的序列表，所述序列表特此以引用方式整体并入。所述ASCII副本创建于2020年3月26日，名称为ORN
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063PC_ST25.txt且大小为139,264字节。
技术介绍
[0006]具有效应功能的生物制剂是一类具有许多潜在治疗应用的生物制剂。在一些情况下，这些生物制剂，例如细胞因子，在施用至人体时编码一种效应功能，这种效应功能可能会产生全身毒性。因此，使这些生物制剂在人体中的耐受性和治疗指数最大化至关重要，以便可降低人体或受试者的全身毒性。
[0007]通常，需要将这些生物制剂以高精度且以调控方式递送至受试者体内的其一个或多个靶标处以便使这些生物制剂有效。因此，需要具有高固有安全特性、能够以高精度到达受试者体内靶标并能够以调控方式发挥功能的工程化生物分子。>[0008]此类生物制剂的一个实例是具有连接至靶向元件(能够以高精度寻找其靶标)的信号传导剂(具有效应功能，例如细胞因子)的嵌合蛋白。在这些生物制剂中，信号传导剂可以是野生型信号传导剂或经修饰的信号传导剂(例如通过突变)。经修饰的信号传导剂一般经过修饰以引起信号传导剂的活性的减弱(例如，基本上降低其与其受体相互作用/接合的能力)，以这样的方式使得信号传导剂的效应功能可以在靶向元件与其靶标(例如靶细胞上的抗原)结合后得以恢复。
[0009]然而，此类嵌合蛋白仅在某些条件得到满足时才适合治疗用途，例如能够大规模生产，体内半衰期确保有足够的时间暴露于药物以引发治疗有益效果，大小适当以避免快速清除或有限的组织穿透性和生物分布，以及有确保足够的溶解性、稳定性和储存特性的其他特性而不显著丧失功能。重要的是，上述特性中的全部或基本上大部分应当在不丧失效应功能的条件性靶向并保持经修饰的信号传导剂与其受体的条件性接合的情况下实现。通常，用由单一连续多肽链编码或表现的嵌合蛋白很难实现所有这些目标。在本领域中需要在维持生物制剂的耐受性和治疗指数的同时实现生物制剂的此类期望特性。
技术实现思路
[0010]本专利技术技术提供了嵌合蛋白复合物，所述嵌合蛋白复合物包括生物治疗剂，所述生物治疗剂的效应功能可以高度精确的方式递送至所选择的靶标，交叉反应性有限或无，且系统性不良事件有限或无，同时还提供了赋予药物特性的功能，使得能够生产具有所期望的体内暴露时间(例如半衰期)、尺寸(例如，用于生物分布和清除特征)，以及供商业生产的大生产和/或纯化规模的治疗剂(例如，具有足够的溶解性、稳定性和储存特性)。
[0011]在一方面，本专利技术涉及一种异源二聚体蛋白复合物及其个别多肽链亚基(组分)，并且其中所述蛋白复合物包括特异性地结合至C型凝集素结构域家族9成员A(Clec9A)的靶向部分、经修饰的人IFNα2和经修饰的Fc结构域。
[0012]在一方面，本专利技术涉及一种嵌合蛋白复合物，所述嵌合蛋白复合物包含：(i)特异性地结合至C型凝集素结构域家族9成员A(Clec9A)的靶向部分，(ii)经修饰的人IFNα2，和(iii)经修饰的Fc结构域。
[0013]在一方面，本专利技术涉及一种嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物包括特异性地结合至C型凝集素结构域家族9成员A(Clec9A)的靶向部分、经修饰的人IFNα2和经修饰的Fc结构域。
[0014]在一些实施方案中，所述嵌合蛋白复合物包含与SEQ ID NO:1
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4和43中的任一者具有至少95％同一性或与SEQ ID NO:1
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4和43中的任一者具有至少98％同一性或与SEQ ID No:1
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4和43中的任一者具有至少99％同一性的多肽。在一些实施方案中，所述嵌合蛋白复合物包含SEQ ID NO:1
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4和43中的任一者的多肽，任选地具有0个、或1个、或2个、或3个、或4个、或5个突变。在一些实施方案中，所述嵌合蛋白复合物包含SEQ ID NO:1
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4和43中的任一者的多肽。
[0015]在一些实施方案中，所述嵌合蛋白复合物包含并入与SEQ ID NO:1
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4和43中的任一者具有至少95％同一性或与SEQ ID NO:1
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4和43中的任一者具有至少98％同一性的连续氨基酸序列的多肽。
[0016]在另一方面，本专利技术涉及一种治疗或预防癌症的方法，所述方法包括向有需要的患者施用有效量的如本文所公开的嵌合蛋白复合物。
[0017]本专利技术的另一方面涉及一种包含如本文所公开的嵌合蛋白复合物和药学上可接受的载体的药物组合物。在另一方面，本专利技术涉及一种用于治疗或预防癌症的方法，所述方法包括向有需要的患者施用有效量的如本文所公开的药物组合物。在另一方面，本专利技术涉及一种重组核酸组合物，所述重组核酸组合物编码本文所公开的嵌合蛋白复合物的一个或多个多肽链亚基。在另一方面，本专利技术涉及一种宿主细胞，所述宿主细胞包含编码本文所公开的一种或多种嵌合蛋白复合物的核酸组合物。
附图说明
[0018]图1示出了本专利技术的嵌合蛋白复合物的各个非限制性说明性示意图。在多个实施方案中，每个示意图是本专利技术的组合物。此处“IFN”是指如本文所描述的IFNα2；“VHH”是指如本文所描述的抗Clec9AVHH；是如本文所描述的任选的“接头”；并且两个长平行矩形(其中一个具有突出部，另一个具有低凹部)是来自IgG1的人Fc结构域，具有如本文所描述的旋钮入孔洞突变，并且任选地具有同样如本文所描述的效应子敲除和/或稳定化突变。
尽管示出了SEQ ID No，但这些仅是说明性的，例如如果使用如本文所描述的除R149A之外的替代突变，它们将改变。
[0019]图2示出了在小鼠中静脉内施用后的Fc
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AFN的血浆浓度。绘制每个时间点时间的3个单独样品的平均值(+SEM)。
[0020]图3示出了在小鼠中静脉内施用后的CLEC9A AFN(缺乏Fc的构建体)的血浆浓度。绘制每个时间点时间的3个单独样品的平均值(+SEM)。
[0021]图4A至图4D示出了与对照细胞(HL116和HEK293T)相比，CLEC9A
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AFN Fc构建体与表达人CLEC9A(HL116
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hCLEC9a)的细胞本文档来自技高网...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种嵌合蛋白复合物，所述嵌合蛋白复合物包含：(i)特异性地结合至C型凝集素结构域家族9成员A(Clec9A)的靶向部分，(ii)经修饰的人IFNα2，和(iii)经修饰的Fc结构域。2.如权利要求1所述的嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物是异源二聚体。3.如权利要求2所述的嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物包含具有与SEQ ID NO:1
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4和43中的任一者具有至少95％、或至少98％、或至少99％同一性的氨基酸序列的多肽。4.如权利要求1所述的嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物包含具有选自SEQ ID NO:1
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4和43的氨基酸序列且相对于所述氨基酸序列具有少于10个突变的多肽。5.如权利要求4所述的嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物包含具有选自SEQ ID NO:1
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4和43的氨基酸序列且相对于所述氨基酸序列具有少于5个突变的多肽。6.如权利要求1所述的嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物包含具有选自SEQ ID NO:1
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4和43的氨基酸序列的多肽。7.如权利要求1至6中任一项所述的嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物还包含具有与SEQ ID NO:5
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8、29
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36或41
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42中的任一者具有至少95％同一性的氨基酸序列的多肽。8.如权利要求7所述的嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物还包含具有与SEQ ID NO:5
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8、29
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36或41
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42中的任一者具有至少98％同一性的氨基酸序列的多肽。9.如权利要求8所述的嵌合蛋白复合物，其中嵌合蛋白复合物还包含具有与SEQ ID NO:5
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8、29
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36或41
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42中的任一者具有至少99％同一性的氨基酸序列的多肽。10.如权利要求7至9中任一项所述的嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物包含：(i)具有与SEQ ID NO:1或3中的任一者具有至少95％同一性的氨基酸序列的多肽，和(ii)具有与SEQ ID NO:5或6中的任一者具有至少95％同一性的氨基酸序列的多肽。11.如权利要求10所述的嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物包含：(i)具有与SEQ ID NO:1或3中的任一者具有至少98％同一性的氨基酸序列的多肽，和(ii)具有与SEQ ID NO:5或6中的任一者具有至少98％同一性的氨基酸序列的多肽。12.如权利要求11所述的嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物包含：(i)具有与SEQ ID NO:1或3中的任一者具有至少99％同一性的氨基酸序列的多肽，和(ii)具有与SEQ ID NO:5或6中的任一者具有至少99％同一性的氨基酸序列的多肽。13.如权利要求7至9中任一项所述的嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物包含：(i)具有与SEQ ID NO:2或4中的任一者具有至少95％同一性的氨基酸序列的多肽，和(ii)有与SEQ ID NO:7或8中的任一者具有至少95％同一性的氨基酸序列的多肽。14.如权利要求13所述的嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物包含：(i)具有与SEQ ID NO:2或4中的任一者具有至少98％同一性的氨基酸序列的多肽，和(ii)具有与SEQ ID NO:7或8中的任一者具有至少98％同一性的氨基酸序列的多肽。15.如权利要求14所述的嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物包含：(i)具有与SEQ ID NO:2或4中的任一者具有至少99％同一性的氨基酸序列的多肽，和(ii)具有与SEQ ID NO:7或8中的任一者具有至少99％同一性的氨基酸序列的多肽。
16.如权利要求7至9中任一项所述的嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物包含：(i)具有与SEQ ID NO:2具有至少95％同一性的氨基酸序列的多肽，和(ii)具有与SEQ ID NO:31或32中的任一者具有至少95％同一性的氨基酸序列的多肽。17.如权利要求16所述的嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物包含：(i)具有与SEQ ID NO:2具有至少98％同一性的氨基酸序列的多肽，和(ii)具有与SEQ ID NO:31或32中的任一者具有至少98％同一性的氨基酸序列的多肽。18.如权利要求17所述的嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物包含：(i)具有与SEQ ID NO:2具有至少99％同一性的氨基酸序列的多肽，和(ii)具有与SEQ ID NO:31或32中的任一者具有至少99％同一性的氨基酸序列的多肽。19.如权利要求7至9中任一项所述的嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物包含：(i)具有与SEQ ID NO:43具有至少95％同一性的氨基酸序列的多肽，和(ii)具有与SEQ ID NO:41或42中的任一者具有至少95％同一性的氨基酸序列的多肽。20.如权利要求16所述的嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物包含：(i)具有与SEQ ID NO:43具有至少98％同一性的氨基酸序列的多肽，和(ii)具有与SEQ ID NO:41或42中的任一者具有至少98％同一性的氨基酸序列的多肽。21.如权利要求17所述的嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物包含：(i)具有与SEQ ID NO:43具有至少99％同一性的氨基酸序列的多肽，和(ii)具有与SEQ ID NO:41或42中的任一者具有至少99％同一性的氨基酸序列的多肽。22.如权利要求1至21中任一项所述的嵌合蛋白复合物，其中所述经修饰的人IFNα2具有与SEQ ID NO:9或10具有至少95％同一性的氨基酸序列。23.如权利要求22所述的嵌合蛋白复合物，其中所述经修饰的人IFNα2具有与SEQ ID NO:9或10具有至少98％同一性的氨基酸序列。24.如权利要求23所述的嵌合蛋白复合物，其中所述经修饰的人IFNα2具有与SEQ ID NO:9或10具有至少99％同一性的氨基酸序列。25.如权利要求1至24中任一项所述的嵌合蛋白复合物，其中所述经修饰的人IFNα2相对于氨基酸序列SEQ ID NO:9或10具有1
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3个突变。26.如权利要求25所述的嵌合蛋白复合物，其中所述经修饰的人IFNα2相对于SEQ ID NO:9或10包含R149A突变，或相对于SEQ ID NO:9或10包含R33A、R144A、R144I、R144L、R144S、R144T、R144Y、A145D、A145G、A145H、A145K、A145Y、M148A和L153A突变中的一者，任选地是A145G。27.如权利要求1至26中任一项所述的嵌合蛋白复合物，其中所述嵌合蛋白复合物包含重组的只有重链的抗体(VHH)。28.如权利要求27所述的嵌合蛋白复合物，其中VHH具有与SEQ ID NO:11或12中的一者具有至少95％同一性的氨基酸序列。29.如权利要求28所述的嵌合蛋白复合物，其中VHH具有与SEQ ID...
【专利技术属性】
技术研发人员：N，
申请(专利权)人：奥里尼斯生物科学私人有限公司，
类型：发明
国别省市：
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