一种新型治疗NASH的FGF类似物制造技术

本发明专利技术公开了一种新型治疗NASH的FGF类似物，属于医药技术领域。本发明专利技术在FGF19突变体NGM282基础上进行改造，得到的新型FGF19类似物的与NGM282相比具有更长效、更稳定的效果，能更好的改善肝脏损伤及纠正代谢紊乱、胖症、超重、代谢综合征、糖尿病、血脂异常等病症，且治疗过程中均未出现原始FGF19突变体NGM282治疗过程引起胆固醇升高及饮食下降的副作用。疗过程引起胆固醇升高及饮食下降的副作用。疗过程引起胆固醇升高及饮食下降的副作用。

【技术实现步骤摘要】
一种新型治疗NASH的FGF类似物
[0001]本申请是申请号为CN202110269910.X、申请日为2021年03月12日、专利技术名称为一种新型抗代谢紊乱的FGF类似物及其应用的分案申请。


[0002]本专利技术涉及一种新型治疗NASH的FGF类似物，属于医药


技术介绍

[0003]成纤维细胞生长因子19(FGF19)是新近发现的一种代谢调节因子，由胆汁酸分泌进入肠道后刺激肠道分泌和表达。FGF19经肠道分泌后可随循环进入肝脏并与肝脏中的FGFR4结合起作用，它具有激素样作用，发挥着重要的代谢调节作用，如调节胆汁酸代谢、调节胆囊的充盈、提高能量代谢降低体质量、改善血糖等。由于前期多项研究表明FGF19具有促有丝分裂作用，FGFR4能促进FGF19在肝脏中的增殖并具有促癌作用。2014年有研究发现FGF19N末端结构域是与FGFR相互作用至关重要的区域，因此，选择性地敲除识别FGFR4受体的区域，能消除FGF19促有丝分裂的活性，因此，多篇文章集中在FGF19的N端进行突变。
[0004]NGM282是人FGF19的非致瘤性工程化变体，是属于FGF19 N端改造的一种突变体。NGM282刚刚在美国完成II期临床研究，结果显示，79％的患者达到主要治疗终点，34％的患者在12周时达到正常的肝脏脂肪含量。该突变体改善了患者肝功能、脂质代谢和纤维化的血清生物标志物，显示出治疗代谢类疾病的疗效。但是在上述临床研究中除了观察到一些常见的消化道症状、恶心和注射部位红斑外，还发现FGF19突变体NGM282注射后可以显著提高胆固醇含量，而多项研究表明胆固醇含量升高是代谢类疾病的显著高危因素之一，这对代谢类疾病治疗来说是个巨大的风险。此外，FGF19还会引起厌食，食欲降低等症状，对未来治疗过程存在一定的隐患，因此如何优化FGF19，以降低其副作用是目前推进FGF19应用于多种疾病治疗的关键问题。

技术实现思路

[0005]鉴此，本专利技术通过预测及试验，在原始非致癌序列基础上进行改造，构建出4种突变蛋白，通过优化生产及纯化工艺制备了4种具有生物学活性的FGF19突变蛋白。结果显示4种突变体均可发挥治疗肥胖症、超重、代谢综合征、糖尿病、高血糖症、血脂异常，以及非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、动脉粥样硬化、肝损伤、肝硬化、肝癌、原发性胆汁性胆管炎(PBC)及原发性硬化性胆管炎(PSC)的功效，且4种突变体治疗效果显著优于NGM282蛋白。
[0006]本专利技术提供了FGF19蛋白类似物，所述FGF19蛋白类似物氨基酸序列如SEQ ID NO.1～4任一所示。
[0007]在一种实施方式中，编码所述FGF19蛋白类似物的基因。
[0008]在一种实施方式中，SEQ ID NO.1～4所示氨基酸对应的编码基因核苷酸序列分别如SEQ ID NO.5～8所示。
[0009]本专利技术提供了携带所述基因的载体和/或宿主细胞。
[0010]本专利技术提供了治疗糖尿病或肥胖的药物或药物组合物，含有所述FGF19蛋白类似物。
[0011]在一种实施方式中，所述药物或药物组合物还包括药学上可接受的载剂或辅料。
[0012]在一种实施方式中，所述治疗糖尿病或肥胖包括抑制体重增加、降低血脂和血糖、提高胰岛素敏感性。
[0013]本专利技术提供了治疗肝炎或相关疾病的药物或药物组合物，含有所述FGF19蛋白类似物。
[0014]在一种实施方式中，所述药物或药物组合物还包括药学上可接受的载剂或辅料。
[0015]在一种实施方式中，所述治疗肝炎或相关疾病包括降低肝脏重量和肝脏甘油三酯的含量、修复肝脏损伤、抑制炎症因子的表达，改善非酒精性脂肪性肝炎、动脉粥样硬化、肝损伤、肝硬化及肝癌原发性胆汁性胆管炎和/或原发性硬化性胆管炎。
[0016]本专利技术提供了所述FGF19蛋白类似物在制备治疗糖尿病、肥胖、肝炎或肝炎相关疾病中的一种或多种疾病的药物中的应用。
[0017]在一种实施方式中，所述药物或药物组合物还包括药学上可接受的载剂或辅料。
[0018]在一种实施方式中，所述FGF19蛋白类似物的剂量为1～100mg/kg。
[0019]在一种实施方式中，所述FGF19蛋白类似物的剂量为2～30mg/kg。
[0020]在一种实施方式中，所述药物的给药途径包括口服、腹腔注射、皮下注射、静脉注射或肌肉注射。
[0021]本专利技术的有益效果：
[0022](1)本专利技术的4种新型FGF19类似物与原始FGF19突变体NGM282相比具有更长效、更稳定、更好的治疗胖症，超重，代谢综合征，糖尿病，高血糖症，血脂异常，非酒精性脂肪性肝炎(NASH)、动脉粥样硬化、肝损伤、肝硬化、肝癌、原发性胆汁性胆管炎(PBC)及原发性硬化性胆管炎(PSC)的功效。
[0023](2)本专利技术的4种新型FGF19类似物治疗过程中均未出现原始FGF19突变体NGM282治疗过程引起胆固醇升高及饮食下降的副作用，对机体正常生命活动影响较小。
附图说明
[0024]图1是纯化后的蛋白在大肠杆菌中表达量的SDS
‑
PAGE电泳分析图，分别为FGF19
‑
1、FGF19
‑
2、FGF19
‑
3、FGF19
‑
4和NGM282蛋白；
[0025]图2是5种蛋白的体内半衰期比较图；
[0026]图3是5种蛋白对db/db小鼠体重和饮食的影响图；
[0027]图4是5种蛋白对db/db小鼠血脂的影响图；
[0028]图5是5种蛋白对db/db小鼠糖尿病相关指标的影响图；
[0029]图6是5种蛋白对NASH模型小鼠脂肪性肝炎及肝纤维化等相关指标的影响图；
[0030]图7是5种蛋白对肝癌移植瘤小鼠肿瘤增殖的影响图。
具体实施方式
[0031]实验动物及饲养：裸鼠及db/db小鼠购于上海斯莱克公司。饲养于江南大无锡医学院动物中心，每12小时交替照明，温度20
±
2℃。
[0032]细胞培养：肝癌细胞系HepG2由中国科学院生物化学与细胞生物学研究所提供；DMEM、0.05％Trypsin，购于博士德公司；胎牛血清购于四季青公司。
[0033]其他药品为国产分析纯。
[0034]肝癌细胞系HepG2贴壁生长于含10％胎牛血清的DMEM培养液中，于37℃，5％CO2湿化培养箱中培养，隔天传代一次。
[0035]实施例1：重组蛋白的构建、表达及纯化
[0036](1)FGF19
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1、FGF19
‑
2、FGF19
‑
3和FGF19
‑
4表达载体的构建
[0037]根据计算机模拟替换及大肠杆菌密码子偏好性，设计出4种新型FGF19基因，其核苷酸序列分别如序列表中FGF19
‑
1(核本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.FGF19蛋白类似物，其特征在于，所述FGF19蛋白类似物氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。2.编码权利要求1所述FGF19蛋白类似物的基因。3.携带权利要求2所述基因的载体和/或微生物细胞。4.治疗糖尿病或肥胖的药物或药物组合物，其特征在于，含有权利要求1所述FGF19蛋白类似物。5.根据权利要求4所述的药物或药物组合物，其特征在于，所述治疗糖尿病或肥胖包括抑制体重增加、降低血脂和血糖、提高胰岛素敏感性。6.治疗肝炎或相关疾病的药物或药物组合物，其特征在于，含有权利要求1所述FGF19蛋白类似物。7.根据权利要求6所述的药物或药物组合物，其特征在于，所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：朱升龙，陈永泉，
申请(专利权)人：江南大学，
类型：发明
国别省市：