双苄基异喹啉生物碱衍生物及制备和应用与药物组合物制造技术

本发明专利技术涉及一种来自蝙蝠葛根的双苄基异喹啉生物碱衍生物的制备方法及其用途，所述部分化合物经多巴胺和阿片及M3等受体靶点测试表明具有一定的药理活性，可用于制备预防或治疗与神经系统疾病或呼吸系统疾病相关的药物开发中。开发中。开发中。

【技术实现步骤摘要】
双苄基异喹啉生物碱衍生物及制备和应用与药物组合物


[0001]本专利技术属于天然药物化学领域，涉及一种双苄基异喹啉生物碱衍生物的制备方法及其在神经系统疾病预防或治疗中的相关应用。

技术介绍

[0002]双苄基异喹啉类(以下简称BBI)生物碱是一类具有广泛的药理活性的生物碱，一般是由两个苄基异喹啉单位通过氧桥连接而成的生物碱。BBI生物碱主要分布在防己科、小檗科、月桂科以及毛茛科植物中，多数生长在热带和亚热带地区，其所含的一些成分几个世纪前就已经在南非、印度、中国、东南亚和南美等国家用作箭毒或传统的药物。
[0003]北豆根为防己科蝙蝠葛属植物蝙蝠葛Menispermum dauricum DC.的根茎,主要分布于东北、华北、陕西等地。具有清热解毒、祛风止痛的功效，用于治疗咽喉肿痛、热毒泻痢、风湿痹痛等症。蝙蝠葛中含有以BBI为代表的生物碱，其中，蝙蝠葛碱和蝙蝠葛苏林碱作为其标志性的BBI成分，大量研究表明这两种成分及其衍生物具有抗肿瘤、抗炎、抗心律失常、神经保护等重要的药理活性。BBI生物碱结构十分相似且复杂,除以上已经获取的常量生物碱外,还有大量的微量生物碱值得研究和开发。因此，以北豆根为研究对象，有希望发现结构新颖活性强的先导化合物。

技术实现思路

[0004]本专利技术提供了一种双苄基异喹啉生物碱衍生物在制备预防或治疗镇痛等神经疾病和呼吸系统疾病的药物中的用途，其中，所述衍生物的结构式如下：
[0005][0006]进一步地，上述立体化合物的立体构型选自(1R,1
′r/>R),(1R,1
′
S),(1S,1
′
R),(1R,
1
′
S)中的一种。
[0007]进一步地，上述立体化合物的立体构型优选(1R,1
′
R)。
[0008]本专利技术还提供一种制备上述化合物1-16的方法，其特征在于包括以下步骤：
[0009](1)药材提取：北豆根干燥药材1公斤～100公斤，每公斤药材加入6～10L体积分数50％～90％的乙醇浸泡，浸泡1～24h，加热至50℃～90℃，回流提取1～5次，合并提取液，浓缩，即得北豆根提取液；
[0010](2)总碱制备：在上述提取液中加入0.1％～3％的硫酸调pH至1～4后，加入为酸调后的溶液体积1～3倍的乙酸乙酯萃取1～5次，每次萃取后在酸水层中均加入0.1％～3％的硫酸调pH至1～4，最后获得酸水层。然后在酸水层中加入弱碱调pH至8～10，接着加入为碱调后的溶液体积1～3倍体积的正丁醇萃取1～5次，合并1～5次获得的正丁醇层，浓缩，即得北豆根粗碱，然后通过离子交换色谱柱，脱色除杂，即得精制的总碱；
[0011](3)将步骤(2)所得总碱采用反相制备级HPLC制备，色谱柱固定相为C18HCE(5～60um，20
×
250～100
×
250mm)，流速为10mL/min～350mL/min，体积比为0：100～100：0的(0.01％～5％)甲酸-甲醇/(0.01％～5％)甲酸-水溶液洗脱，按时间收集得到馏分F1～F8；
[0012](4)将步骤(3)所得子馏分F2经过反相制备级HPLC制备，色谱柱为C8CE固定相(5～60μm，20
×
250～100
×
250mm)，流速为10mL/min～350mL/min，流动相A为甲醇，B为(体积分数0.01％～10％)氨水-水，洗脱梯度为0～80min，0％A～95％A，按时间收集共得到11个子馏分，分别为F2-1～F2-10；
[0013](5)将步骤(4)所得子馏分F2-8和F2-10经过制备级HPLC制备，色谱柱采用C18CE固定相(5～60μm，4.6
×
250～20
×
250mm)，流速为0.5mL/min～30mL/min，流动相为甲醇(A)和水(B)(各含体积分数0.01～10％的乙酸三乙胺(乙酸：三乙胺的体积比为1:1～1:5))，洗脱梯度为0～60min，0％A～90％A，按峰收集馏分。所得馏分再通过C18HCE固定相(5～60μm，4.6
×
250～20
×
250mm)，流动相为甲醇(A)和水(B)(各含为体积分数0.01～1％甲酸)，洗脱梯度为0～40min，0％A～90％A，得到化合物1～3；
[0014](6)将步骤(3)所得子馏分F4经过阳离子交换柱，洗脱流速为25～30mL/min，洗脱次序为体积分数10％～90％的甲醇水、体积分数为1％～15％的(质量浓度为25％～28％的氨水)/10％～90％甲醇、体积分数0.1～1％的盐酸/10％～90％甲醇依次洗脱，每个溶剂洗脱2～18倍柱体积，结合收集谱图与洗脱柱体积得到13个子馏分F4-S1～F4-S13；
[0015](7)将步骤(6)所得子馏分F4-S4、F4-S8、F4-S10分别经过制备级HPLC制备，色谱柱采用C18CE固定相(5～60μm，4.6
×
250～20
×
250mm)，流速为0.5mL/min～30mL/min，流动相为甲醇(A)和水(B)(各含体积分数0.1％～10％，pH约9～11的乙酸三乙胺)，洗脱梯度为0～60min，0％A～90％A，按峰收集馏分，所得馏分再通过C18HCE固定相(5～60μm，4.6
×
250～20
×
250mm)，流动相A为体积分数(0.01～1％)甲酸-甲醇，B为体积分数(0.01～1％)甲酸-水，洗脱梯度为0～40分钟，0％A～90％A，得到化合物4～11；
[0016](8)将步骤(3)所得子馏分F6经过反相制备级HPLC制备，色谱柱为C18CE固定相(5～60μm，20
×
250～100
×
250mm)，流速为10mL/min～350mL/min，流动相为甲醇(A)和水(B，含体积分数为0.01％～2％的质量浓度为25％～28％的氨水)，洗脱梯度为0～80min，0％A～95％A，按时间收集共得到8个子馏分，分别为F6-1～F6-8；
[0017](9)将步骤(8)所得子馏分F6-6经过制备级HPLC制备，色谱柱采用C18CE固定相(5
～60μm，4.6
×
250～20
×
250mm)，流速为0.5mL/min～30mL/min，流动相为甲醇(A)和水(B)(各含体积分数0.1％～10％，pH约10～11的乙酸三乙胺)，洗脱梯度为0～60min，0％A～90％A，按峰收集4个馏分。所得馏分再通过C18HCE固定相(5～60μm，4.6
×
250～20
×
250mm)，流动相A为体积分数(0.01～1％)甲酸-甲醇，B为体积分数(0.01～1％)甲酸-水，洗脱梯度为0～40min，0％A～90％A，得到化合物12～15；本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种双苄基异喹啉生物碱衍生物，所述双苄基异喹啉生物碱衍生物为下述结构式(I)所示化合物1～16中的一种或二种以上：2.根据权利要求1所述的衍生物，其特征在于，化合物1～16的立体构型分别选自(1R,1
′
R),(1R,1
′
S),(1S,1
′
R),(1R,1
′
S)中的一种或二种以上。3.根据权利要求2所述的衍生物，其特征在于，化合物1～16的立体构型分别优选(1R,1
′
R)。4.一种权利要求1-3任一所述的衍生物的制备方法，包括以下步骤：(1)药材提取：北豆根干燥药材1公斤～100公斤，每公斤药材加入6～10L体积分数50％～90％的乙醇浸泡，浸泡1～24h，加热至50℃～90℃回流提取1～3h，过滤得提取液；共回流提取1～5次，合并提取液，所得的提取液浓缩至按每公斤药材计0.3～0.6L，即得北豆根提取液；(2)总碱制备：在上述北豆根提取液中加入体积浓度0.1％～3％的硫酸调pH至1～4后，加入该酸调后的提取液体积的1～3倍体积的乙酸乙酯萃取，分层，获得乙酸乙酯萃取层和酸水层，共萃取1～5次，再在酸水层中加入弱碱调pH至8～10，接着加入碱调后的样品体积的1～3倍体积的正丁醇萃取，分层，获得正丁醇和碱水层，共萃取1～5次，合并有机层，浓缩，即得北豆根粗碱，然后通过离子交换色谱柱，脱色除杂，即得精制的总碱；(3)将步骤(2)所得总碱采用C18HCE填料(粒径5～60um)的反相柱进行分离纯化，采用体积比为0：100～100：0的(体积浓度0.01％～5％)甲酸-甲醇/(体积浓度0.01％～5％)甲酸-水溶液洗脱，得到馏分F1～F8；(4)将步骤(3)所得子馏分F2经过反相制备级HPLC制备，色谱柱为C8CE固定相(5～60μm，20
×
250～100
×
250mm)，流动相A为(体积分数0.01％～10％)的(质量浓度为25％～28％的氨水)-甲醇，B为(体积分数0.01％～10％)的(质量浓度为25％氨水)-水，洗脱梯度为0～
80分钟，0％A～95％A，共得到11个子馏分，分别为F2-1～F2-10；(5)将步骤(4)所得子馏分F2-8和F2-10经过制备级HPLC制备，色谱柱采用C18CE固定相(5～60μm，4.6
×
250～20
×
250mm)，流动相A为含体积分数0.01～10％的乙酸三乙胺(乙酸与三乙胺的体积比为1：1～1：5)-甲醇，B为含体积分数0.01～10％的乙酸三乙胺(乙酸与三乙胺的体积比为1：1～1：5)-水，洗脱梯度为0～60分钟，0％A～90％A，所得馏分再分别通过C18HCE固定相(5～60μm，4.6
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250～20
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250mm)，流动相A为体积分数(0.01～1％)甲酸-甲醇，B为体积分数(0.01～1％)甲酸-水，洗脱梯度为0～40分钟，0％A～90％A，得到化合物1～3；(6)将步骤(3)所得子馏分F4经过阳离子交换柱，洗脱次序为体积分数10％～90％的甲醇水、体积分数为1％～15％的(质量浓度为25％～28％的氨水)/10％～90％甲醇、体积分数0.1～1％的盐酸/10％～90％甲醇依次洗脱，采用梯度洗脱，共洗脱5～35倍柱体积，得到13个子馏分F4-S1～F4-S13；(7)将步骤(6)所得子馏分F4-S4、F4-S8、F4-S10分别经过制备级HPLC制备，色谱柱采用C18CE固定相(5～60μm，4.6
×
250～20
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250mm)，流动相A为含体积分数0.01～10％的乙酸三乙胺(乙酸与三乙胺的体积比为1:1～1:5)-甲醇，B为含体积分数0.01～10％的乙酸三乙胺(乙酸与三乙胺的体积比为1:1～1:5)-水，洗脱梯度为0～60分钟，0％A～90％A，所得馏分再通过C18HCE固定相(5～60μm，4.6
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250～20
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250mm)，流动相A为体积分数(0.01～1％)甲酸-甲醇，B为体积分数(0.01...

【专利技术属性】
技术研发人员：梁鑫淼，魏红丽，刘艳芳，王纪霞，侯滔，
申请(专利权)人：中国科学院大连化学物理研究所，
类型：发明
国别省市：