一种喹啉衍生物在制备治疗脓毒症药物中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种喹啉衍生物在制备治疗脓毒症药物中的应用，所述喹啉衍生物的结构如下所示：该喹啉衍生物对脓毒症和内毒素血症具有一定的治疗作用，能够有效提高脓毒症和内毒素血症小鼠的生存率，为临床治疗脓毒症提供了新的治疗方法和药物。物。物。

【技术实现步骤摘要】
一种喹啉衍生物在制备治疗脓毒症药物中的应用


[0001]本专利技术涉及生物医药领域，具体涉及一种喹啉衍生物在制备治疗脓毒症药物中的应用。

技术介绍

[0002]脓毒症(又称为败血症，拉丁语：Sepsis)是感染诱发的以多脏器衰竭为特征的危急重症，具有起病急和病情重的特点，死亡率高达40％。其常见的临床症状包括发烧、呼吸频率和心跳加速，以及意识不清，严重的脓毒症会导致供应组织的血流不足甚至引起器官衰竭以及感染性休克，严重威胁患者的生命安全。目前，早期液体复苏、早期使用抗生素及器官功能支持等治疗在一定程度上降低了脓毒症的死亡率，但脓毒症仍然是重症病监护室(ICU)患者死亡的首要原因。
[0003]脓毒症的发病机制十分复杂，病原微生物侵入机体后其主要致病因子脂多糖(LPS)在内毒素结合蛋白(LPS binding protein，LBP)及CD14分子的协助下，与膜结合蛋白MD
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2及TLR
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4特异性结合，从而介导促炎细胞因子TNF
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α、IL
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1β和IL
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6等的大量产生和释放。在脓毒症病变过程中，机体始终处于免疫紊乱状态。早期因严重感染、创伤、烧伤等打击，机体处于免疫激活状态，表现为大量促炎因子释放；随着病情发展，机体可能经历一个免疫抑制阶段，淋巴细胞大量凋亡，出现代偿性抗炎反应综合症，进一步发展则出现脏器功能障碍。
[0004]异喹啉类化合物具有异喹啉母核结构，异喹啉类化合物具有多种药理活性。异喹啉及衍生物具有多种生物活性，在医药、化工、染料等领域都有广泛的应用。
[0005]目前治疗脓毒症的药物主要以糖皮质激素等非特异性治疗以防治器官功能衰竭和休克等对症治疗为主。虽然控制感染的治疗方法能缓解脓毒症症状，延长患者生命，但治标不治本。因此，开发新的脓毒症治疗的药物以应用于临床治疗具有重要的意义。目前也没有关于喹啉衍生物应用于脓毒症治疗的报道。

技术实现思路

[0006]本专利技术旨在至少解决现有技术中存在的技术问题之一。为此，本专利技术提出一种喹啉衍生物在制备治疗脓毒症药物中的应用，所述药物对脓毒症有良好治疗作用。
[0007]本专利技术还提出上述喹啉衍生物的在制备脓毒症相关药理途径中抑制剂的应用。
[0008]根据本专利技术的第一方面实施例的喹啉衍生物在制备治疗脓毒症药物中的应用，所述喹啉衍生物的结构式如下所示：
[0009]α的含量测试图，(b)为IL
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1β的含量测试图；(c)为TNF
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α的含量测试图，(d)为IL
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6的含量测试图；
[0029]图3为本专利技术实施例2中化合物影响内毒血症小鼠生存率的统计结果图；
[0030]图4为本专利技术实施例3中化合物影响脓毒症小鼠生存率的统计结果图。
[0031]图中，将本专利技术的喹啉衍生物标记为“396”，n代表小鼠数目。
具体实施方式
[0032]为详细说明本专利技术的
技术实现思路
、所实现目的及效果，以下结合实施方式并配合附图予以说明。
[0033]若无特殊说明，以下实施例中的实验试剂和材料均为商业购得。以下实施例中使用的化合物为喹啉衍生物，购买自selleck公司，结构式为：
[0034][0035]实施例1：化合物抑制LH(LPS+HMGB1)活化Caspase11诱导的原代巨噬细胞焦亡
[0036]高迁移率族蛋白B1((high
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mobility group box 1protein，HMGB1)是一类在哺乳动物中高度保守且广泛表达的蛋白质，正常情况下主要存在于细胞核内，感染等应激状态下作为炎症介质被释放至细胞外，在疾病或组织损伤中起重要的致病作用(Regulation of post
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translational modifications of HMGB1 during immune responses.Antioxid Redox Signal.2016Apr 20；24(12):620
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34.)。专利技术人发现：在脓毒症中肝细胞释放的HMGB1能将循环中的LPS转运至血管内皮细胞和巨噬细胞的胞浆内，并启动Caspase
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11介导的细胞焦亡(The Endotoxin Delivery Protein HMGB1 Mediates Caspase
‑
11
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Dependent Lethality in Sepsis.Immunity.2018 Oct 16；49(4):740
‑
753.)。在上述过程中，肝脏细胞通过其自身表达的TLR4受体识别循环中的LPS，释放大量HMGB1入血；这些被释放的HMGB1又结合血循环中的LPS，HMGB1
‑
LPS复合体通过RAGE受体介导的内吞作用，进入血管内皮细胞或巨噬细胞的溶酶体中；在溶酶体的酸性环境下，HMGB1能直接作用于溶酶体膜导致溶酶体的破裂，使得溶酶体中的LPS泄漏至细胞浆，最终活化Caspase
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11并启动细胞焦亡。上述发现不仅揭示了脓毒症致病的新机制，而且提示HMGB1
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Caspase
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11途径可能是脓毒症中潜在的药物干预靶点，因此，专利技术人构建了LPS+HMGB1活化Caspase11诱导的原代巨噬细胞焦亡的体外筛选平台，本专利技术中通过研究化合物对HMGB1
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Caspase11途径细胞焦亡的抑制，证明化合物对于脓毒症的抑制活性。
[0037]1、实验步骤：提取野生型(WT)小鼠和Casp11 KO小鼠原代腹腔巨噬细胞，RPMI
‑
1640完全培养基重悬细胞调整浓度至1
×
10^6个/ml，500μl/well种24孔板，贴壁过夜后DPBS洗涤细胞2次，换成1640无血清培养基。使用实施例1的化合物分别以5μM、10μM终浓度加入细胞预孵育1h，再加入脂多糖(LPS)1μg/ml+高迁移率族蛋白(HMGB1)400ng/ml混合物(提前室温预孵育20min)刺激细胞过夜，16
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18h收上清做乳酸脱氢酶(LDH)细胞毒性实验和ELISA实验对促炎细胞因子IL
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1α、IL
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1β、TNF
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α和IL
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6含量检测。
[0038]具体实验操作如下：
[0039]1)提取小鼠原代腹腔巨噬细胞：腹腔注射3％巯基乙酸盐培养基(3ml/只)，3
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4天后，小鼠腹腔注射10ml RPMI1640培养基，轻揉小鼠腹部后用注射器回抽腹腔灌洗液，重复1次，收集于离心管中，800rpm离心5分钟弃上清。以5～10ml RPMI1640完全培养基重悬细胞，显微镜下细胞计数后调整细胞浓度至1
×
10^6个/ml，100μ本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种喹啉衍生物在制备治疗脓毒症药物中的应用，所述喹啉衍生物的结构如下所示：2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述治疗脓毒症药物为能够提高感染脓毒症动物生存率的药物。3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述治疗脓毒症药物为能够抑制感染脓毒症动物体内细胞焦亡的药物。4.根据权利要求1所述的应用，其特征在于，所述治疗脓毒症药物为能够抑制感染脓毒症动物体内促炎细胞因子分泌的药物。5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于，所述促炎细胞因子包括IL
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1α、IL
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1β、TNF
‑
α和IL
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6中的至少一种。6.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：吕奔，唐怡庭，
申请(专利权)人：吕奔，
类型：发明
国别省市：