用于促进干细胞来源外泌体产生和增加干性的组合物制造技术

本发明专利技术涉及一种用于促进干细胞来源外泌体(Exosomes)产生或增加干细胞的干性的组合物。在细胞培养基中培养本发明专利技术的组合物时，干细胞的干性和干细胞来源外泌体的生产量会增加，因而，可更有效地生产优质干细胞和干细胞来源外泌体，故可将其有效应用于相关的研发和产品化中。产品化中。产品化中。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于促进干细胞来源外泌体产生和增加干性的组合物


[0001]本专利技术涉及一种用于促进干细胞来源外泌体产生和增加干性的组合物。

技术介绍

[0002]细胞外囊泡(Extracellular Vesicles)是由大小为30～1000nm的球形脂质双层(lipid
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bilayer)组成的囊泡(vesicle)，其包括微囊泡(Microvesicles)、外泌体(Exosome)等。
[0003]外泌体的脂质双层具有类似于起源细胞(供体细胞)的磷脂质双层结构，已知其作为细胞分泌到细胞外部的物质的构成体，发挥细胞间通讯和细胞免疫介导等功能性作用。
[0004]外泌体含有反映起源细胞(供体细胞)特有生物学功能的细胞特异性组成成分，除磷脂质、mRNA、miRNA外，还包含各种水溶性新蛋白、外源蛋白和跨膜蛋白成分等。
[0005]这种外泌体从肥大细胞、淋巴细胞、星形胶质细胞、血小板、神经细胞、内皮细胞、上皮细胞等所有动物细胞中排出，且存在于血液、尿液、粘液、唾液、胆汁液、腹水液、脑脊液等各种体液中。外泌体可通过血脑屏障(Blood
‑
Brain Barrier；BBB)，选择透过性较高，可达到透过表皮细胞和内皮细胞的细胞膜的程度，因此，其还被用于开发特定药物的纳米载体(nanocarrier)，即药物递送系统(DDS，drug delivery system)。
[0006]已知间充质干细胞中分泌的外泌体和微囊泡(microvesicles)参与细胞间通讯，表现出干细胞所具备的再生医学治疗功效。
[0007]已知干细胞被移植到体内后不会长期存活，可对细胞分泌的旁分泌因子(paracrine factors)产生营养效应(trophic effect)。这种因子中的生长因子(growth factor)、趋化因子(chemokine)、细胞因子(cytokine)等低分子借由细胞外囊泡(extracellular vesicle)(如：外泌体)分泌，这种外泌体来源于干细胞。因此，外泌体被用于证明干细胞的特性，并用于评估其治疗功效。
[0008]最近，在研究间充质干细胞对各种疾病的治疗功效方面，选择使用间充质干细胞分泌的外泌体，而非间充质干细胞本身。学术界、产业界预测其有望成为克服现有干细胞治疗法局限性的全新替代方案。
[0009]为实现这种外泌体的商业应用性，就需要大量优质的外泌体。但目前可从干细胞中获取的外泌体数量极少，且在可增加干细胞来源外泌体产量方面的开发工作仍存在不足。
[0010]一方面，已知间充质干细胞培养期变长，且经过数次继代培养后，其增殖能力和分化能力也会降低。另外，相较于早期继代(passage)的间充质干细胞，晚期继代的间充质干细胞的集落形成能力明显降低。而与间充质干细胞的老化相关的正是长期培养期内弱化的增殖能力，而非骨髓供体的年龄，其与端粒酶活性(telomerase activity)降低也存在关联。
[0011]因此，目前可从人体中获得的间充质干细胞量有限，且为了诱导以此方式获得细胞分化成特定谱系，又不可避免地面临继代培养所致的分化能力降低问题。而这些缺点对
于诱导分化为准确的靶细胞及需为此确保大量合适的干细胞的临床应用而言，是不现实的。因此，就需要一种既能长时间保持增殖率，又能保持分化成多个谱系的能力的方法。
[0012]为此，需要开发一种新的方法和物质，其要既能促进干细胞来源外泌体的生产，又能长时间保持干细胞的增殖率和分化能力。

技术实现思路

[0013]技术问题
[0014]本专利技术人致力于开发一种可促进干细胞来源外泌体的生产，且可长时间保持干细胞的增殖率和分化能力的方法和物质。其结果证实，如果在干细胞中，预处理选自Exendin
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4、豆蔻酰佛波醇乙酯(PMA)、干扰素
‑
γ(Interferon
‑
γ)、粉防己碱(Tetrandrine)、透明质酸(Hyaluronic acid)、物质
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P(Substance P)、白藜芦醇(Resveratrol)和Lanifibranor组成的组中的一种以上时，干细胞的干性(Stemness)和增殖性(Proliferation)会增加，且干细胞来源外泌体数量、外泌体中的蛋白和RNA含量也会明显增加，借以完成了本专利技术。
[0015]因此，本专利技术的目的在于，提供一种用于促进干细胞来源外泌体产生的组合物，其包含Exendin
‑
4。
[0016]本专利技术的另一个目的在于，提供一种用于增加干细胞的干性(Stemness)的组合物，其包含Exendin
‑
4。
[0017]本专利技术的另一个目的在于，提供一种干细胞治疗剂，其包含用于促进上述干细胞来源外泌体产生或增加干细胞(Stemness)的干性的组合物。
[0018]本专利技术的另一个目的在于，提供一种经Exendin
‑
4预处理的干细胞来源外泌体。
[0019]本专利技术的另一个目的在于，提供一种干细胞治疗剂，其包含上述干细胞来源外泌体。
[0020]本专利技术的另一个目的在于，提供一种干细胞来源外泌体的生产方法，其包括：在包含Exendin
‑
4的细胞培养基中培养干细胞的预处理步骤。
[0021]本专利技术的另一个目的在于，提供一种增加干细胞的干性(Stemness)的方法，其包括：在包含Exendin
‑
4的细胞培养基中培养干细胞的预处理步骤。
[0022]本专利技术的另一个目的在于，提供一种组合物的促进干细胞来源外泌体产生的用途，该组合物包含Exendin
‑
4。
[0023]本专利技术的另一个目的在于，提供一种组合物的增加干细胞的干性(Stemness)的用途，该组合物包含Exendin
‑
4。
[0024]本专利技术的另一个目的在于，提供一种用于促进干细胞来源外泌体产生的组合物，其包含豆蔻酰佛波醇乙酯(PMA)。
[0025]本专利技术的另一个目的在于，提供一种用于增加干细胞的干性(Stemness)的组合物，其包含豆蔻酰佛波醇乙酯(PMA)。
[0026]本专利技术的另一个目的在于，提供一种干细胞治疗剂，其包含用于促进上述干细胞来源外泌体产生或增加干细胞的干性的组合物。
[0027]本专利技术的另一个目的在于，提供一种经豆蔻酰佛波醇乙酯(PMA)预处理的干细胞来源外泌体。
[0028]本专利技术的另一个目的在于，提供一种干细胞治疗剂，其包含上述干细胞来源外泌
体。
[0029]本专利技术的另一个目的在于，提供一种干细胞来源外泌体的生产方法，其包括：在包含豆蔻酰佛波醇乙酯(PMA)的细胞培养基中培养干细胞的预处理步骤。
[0030]本专利技术的另一个目的在于，提供一种增加干细胞的干性(Stemness)的方法，其包括本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种用于促进干细胞来源外泌体产生的组合物，其包含选自Exendin
‑
4、豆蔻酰佛波醇乙酯(PMA)、干扰素
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γ(Interferon
‑
γ)、粉防己碱(Tetrandrine)、透明质酸(Hyaluronic acid)、物质
‑
P(Substance P)、白藜芦醇(Resveratrol)和Lanifibranor组成的组中的一种以上。2.如权利要求1所述的组合物，所述干细胞是胚胎干细胞、成体干细胞或诱导多能干细胞(induced pluripotent stem cell；iPSC)。3.如权利要求2所述的组合物，所述成体干细胞是人类或动物组织起源的成体干细胞，人类或动物组织起源的间充质干细胞(mesenchymal stromal cell)，或人或动物组织起源的诱导多能干细胞来源间充质干细胞。4.如权利要求3所述的组合物，所述人类或动物组织，选自脐带、脐带血、骨髓、脂肪、肌肉、神经、皮肤、羊膜和胎盘组成的组。5.如权利要求3所述的组合物，所述人类或动物组织起源的成体干细胞，选自造血干细胞、乳腺干细胞、肠干细胞、血管内皮干细胞、神经干细胞、嗅觉神经干细胞和睾丸干细胞组成的组。6.一种用于增加干细胞的干性(Stemness)的组合物，其包含选自Exendin
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4、豆蔻酰佛波醇乙酯(PMA)、干扰素
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γ(Interferon
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γ)、粉防己碱(Tetrandrine)、透明质酸(Hyaluronic acid)、物质
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P(Substance P)、白藜芦醇(Resveratrol)和Lanifibranor组成的组中的一种以上。7.一种干细胞治疗剂，其包含如权利要求1至6的任一项所述的组合物。8.一种干细胞来源外泌体，其经选自Exendi...

【专利技术属性】
技术研发人员：金秀，S，
申请(专利权)人：布瑞克斯奥根株式会社，
类型：发明
国别省市：