冠状病毒的抗体及其衍生物用途制造技术

本发明专利技术涉及一种抗SARS-CoV2 Spike 1的抗体和用途。具体地，本发明专利技术提供了一种抗SARS-CoV2 Spike1的全人源单克隆抗体。该抗体来源于康复病人外周血淋巴细胞，可以和SARS-CoV2 Spike 1特异性结合。并且，本发明专利技术提供了该抗体的表达载体和能够表达该抗体的宿主细胞，以及本发明专利技术抗体的生产方法。本发明专利技术抗体的生产方法。

【技术实现步骤摘要】
冠状病毒的抗体及其衍生物用途


[0001]本专利技术属于生物技术或医药领域，具体涉及一种冠状病毒的抗体及其衍生物 用途。

技术介绍

[0002]在急性传染病中，绝大部分都是病毒性传染病，病毒性传染病的发病率高， 死亡率也很高。由于检测和诊断手段有限，导致新病毒引发的新疫情爆发往往 具有突发性、随机性和不可预测性等特点，一旦爆发，如无有效的防治手段， 极易造成大规模流行，严重威胁人民健康生命安全。
[0003]2019-nCoV冠状病毒属于冠状病毒科冠状病毒属，为具有包膜的单链正义 RNA病毒。和其他已知冠状病毒类似，2019-nCoV冠状病毒也经过吸附、穿入、 脱壳、生物合成、子代病毒的组装与释放等几个过程完成子代病毒的增殖。 2019-nCoV冠状病毒感染宿主细胞起始于病毒包膜表面的刺突糖蛋白与宿主细 胞表面的受体结合，随后发生膜融合，病毒进入宿主细胞，在细胞溶酶体等细 胞器作用下，释放出病毒的遗传物质单链正义RNA，在宿主细胞的线粒体、核 糖体等蛋白质合成元件以及必须的原料等作用下，翻译产生多聚蛋白，之后， 2019-nCoV冠状病毒的两大必需半胱氨酸蛋白酶：木瓜样蛋白酶(papain-likeprotease,PL
pro
)和3C样蛋白酶(3C-like protease,3CL
pro
)在特定位点切割加 工多聚蛋白前体，产生多个对病毒生命周期非常重要的非结构蛋白。在这些非 结构蛋白的作用下，病毒RNA复制出子代病毒核酸物质，并大量翻译出所需的 结构蛋白，完成子代病毒的组装和释放。2019-nCoV冠状病毒感染细胞的生命 周期的任何环节或关键酶均可以作为抗病毒药物的研究靶点，如水解切割多聚 蛋白前体的半胱氨酸蛋白酶PL
pro
和3CL
pro
，负责完成子代病毒遗传物质复制的 RNA聚合酶等。
[0004]迄今为止，2019-nCoV病毒的传播途径未完全掌握，已知能通过飞沫和接 触传播，且存在人传人、医务人员感染，一定社区传播风险，且病毒存在变异 的可能。目前对于新型冠状病毒所致疾病没有特异的预防和治疗方法。
[0005]目前，针对SARS-CoV-2(同2019-nCoV)冠状病毒导致的严重肺炎疾病尚 无特效的疫苗和抗病毒药物。这些感染性疾病严重影响了人类的生命健康，研 发效果好的抗病毒药物迫在眉睫。针对SARS-CoV-2冠状病毒开发出低毒高效 的抗病毒药物，以满足国内外SARS-CoV-2冠状病毒感染患者的临床需求，具 有重大的社会意义。
[0006]综上所述，本领域迫切需要开发针对SARS-CoV-2冠状病毒有效诊断和治 疗方法，以用于诊断和治疗新型冠状病毒感染引起的肺炎。

技术实现思路

[0007]本专利技术的目的就是提供一种能够特异性结合SARS-CoV-2Spike 1蛋白， 并可以和细胞表面表达的SARS-Cov-2结合的抗体。
[0008]在本专利技术的第一方面，提供了一种抗体的重链可变区，所述的重链可变区具 有选
自下组的互补决定区CDR：
[0009]SEQ ID NO:26、32、37、48、55、59或66所示的VH-CDR1、SEQ ID NO:27、 33、38、49、60或67所示的VH-CDR2，和SEQ ID NO:28、34、39、56或68所 示的VH-CDR3；
[0010]其中，上述氨基酸序列中任意一种氨基酸序列还包括任选地经过添加、缺失、 修饰和/或取代至少一个氨基酸的，并能够保留SARS-CoV-2Spike 1蛋白结合亲和 力的衍生序列。
[0011]在另一优选例中，所述重链可变区具有如SEQ ID NO:1、2、3、4、5、6、7、 8、9、10或11所示的氨基酸序列。
[0012]在本专利技术的第二方面，提供了一种抗体的重链，所述的重链具有如本专利技术第 一方面所述的重链可变区。
[0013]在另一优选例中，所述重链还包括重链恒定区。
[0014]在另一优选例中，所述重链恒定区为人源或鼠源的。
[0015]在另一优选例中，所述重链恒定区为人源抗体重链IgG1恒定区。
[0016]在另一优选例中，所述重链恒定区包括CH1区和Fc区，优选地，所述Fc是LALA 突变型Fc。
[0017]在另一优选例中，所述的CH1区的氨基酸序列如SEQ ID NO:25所示。
[0018]在另一优选例中，所述的LALA突变型Fc的氨基酸序列如SEQ ID NO:23所示。
[0019]在本专利技术的第三方面，提供了一种抗体的轻链可变区，所述的轻链可变区具 有选自下组的互补决定区CDR：
[0020]SEQ ID NO:29、35、40、43、45、50、53、57、61或63所示的VL-CDR1、 SEQ ID NO:30、41、46、51或64所示的VL-CDR2，和SEQ ID NO:31、36、42、 44、47、52、54、58、62、65或69所示的VL-CDR3；
[0021]其中，上述氨基酸序列中任意一种氨基酸序列还包括任选地经过添加、缺失、 修饰和/或取代至少一个氨基酸的，并能够保留SARS-CoV-2Spike 1蛋白结合亲和 力的衍生序列。
[0022]在另一优选例中，所述轻链可变区具有如SEQ ID NO:12、13、14、15、16、 17、18、19、20、21或22所示的氨基酸序列。
[0023]在本专利技术的第四方面，提供了一种抗体的轻链，所述的重链具有如本专利技术第 一方面所述的轻链可变区。
[0024]在另一优选例中，所述轻链还包括轻链恒定区。
[0025]在另一优选例中，所述轻链恒定区为人源或鼠源的。
[0026]在另一优选例中，所述轻链恒定区为人源抗体轻链恒定区。
[0027]在另一优选例中，所述轻链恒定区的氨基酸序列如SEQ ID NO:24所示。
[0028]在本专利技术的第五方面，提供了一种抗体，所述抗体具有如本专利技术第一方面所 述的重链可变区，和/或如本专利技术第二方面所述的轻链可变区；
[0029]或者，所述抗体具有如本专利技术第二方面所述的重链，和/或如本专利技术第四方面 所述的轻链；
[0030]其中，上述氨基酸序列中任意一种氨基酸序列还包括任选地经过添加、缺失、 修饰和/或取代至少一个氨基酸的，并能够保留SARS-CoV-2Spike 1蛋白结合亲和 力的衍生
NO:39所示的VH-CDR3、如SEQ ID NO:40所示的VL-CDR1、如SEQ ID NO:41所示的VL-CDR2，和如SEQ ID NO:42所示的VL-CDR3；
[0054](4)如SEQ ID NO:26所示的VH-CDR1、如SEQ ID NO:27所示的VH-CDR2、 如SEQ ID NO:28所示的VH-CDR3、如SEQ ID NO:43所示的VL-CDR1、如SEQ ID NO:30所示的VL-C本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种抗体的重链可变区，其特征在于，所述的重链可变区具有选自下组的互补决定区CDR：SEQ ID NO:26、32、37、48、55、59或66所示的VH-CDR1、SEQ ID NO:27、33、38、49、60或67所示的VH-CDR2，和SEQ ID NO:28、34、39、56或68所示的VH-CDR3；其中，上述氨基酸序列中任意一种氨基酸序列还包括任选地经过添加、缺失、修饰和/或取代至少一个氨基酸的，并能够保留SARS-CoV-2Spike 1蛋白结合亲和力的衍生序列。2.一种抗体的重链，其特征在于，所述的重链具有如权利要求1所述的重链可变区。3.一种抗体的轻链可变区，其特征在于，所述的轻链可变区具有选自下组的互补决定区CDR：SEQ ID NO:29、35、40、43、45、50、53、57、61或63所示的VL-CDR1、SEQ ID NO:30、41、46、51或64所示的VL-CDR2，和SEQ ID NO:31、36、42、44、47、52、54、58、62、65或69所示的VL-CDR3；其中，上述氨基酸序列中任意一种氨基酸序列还包括任选地经过添加、缺失、修饰和/或取代至少一个氨基酸的，并能够保留SARS-CoV-2Spike 1蛋白结合亲和力的衍生序列。4.一种抗体的轻链，其特征在于，所述的重链具有如权利要求1所述的轻链可变区。5.一种抗体，其特征在于，所述抗体具有如权利要求1所述的重链可变区，和/或如权利要求2所述的轻链可变区；或者，所述抗体具...

【专利技术属性】
技术研发人员：缪小牛，黄曦，许英达，罗羿，袁志军，陈连娣，
申请(专利权)人：中山大学附属第五医院，
类型：发明
国别省市：