一种沙门氏菌噬菌体vB_SalP_TR2及其应用制造技术

本发明专利技术提供了一种沙门氏菌噬菌体，所述噬菌体为沙门氏菌噬菌体vB_SalP_TR2，其保藏编号为：GDMCC No:61403

【技术实现步骤摘要】
一种沙门氏菌噬菌体vB_SalP_TR2及其应用


[0001]本专利技术属于微生物
，尤其涉及一种沙门氏菌噬菌体vB_SalP_TR2及 其应用。

技术介绍

[0002]沙门氏菌(Salmonella)属于肠杆菌科，革兰氏阴性肠道杆菌，是一种人畜 共患的致病菌，能够在人类、动物及环境间传播。沙门氏菌感染人类，主要是 食用了被污染的食品(特别是动物性食品，如鸡肉、猪肉和牛肉等)引起的。 近几十年来，由沙门氏菌引发的食物中毒占世界食物中毒病例的第一或第二位。 人体在感染沙门氏菌之后，一般会出现肠胃炎、腹泻、发热以及败血性等临床 症状，且免疫力下的人群(如老人、孕妇、婴幼儿等)，若不及时救治，可能因 衰竭而死亡。加强对食源性沙门氏菌的防控在食品安全领域具体极其重要的意 义。
[0003]目前，在食品加工过程中依旧使用干热、蒸汽、紫外、微波等物理灭菌， 但往往会带来营养价值的流失和产品感官特性的恶化。另一方面，在动物源产 品上过度使用抗生素，导致细菌耐药性上升及传播，同时还产生药物残留和环 境污染等一系列问题，因此针对沙门氏菌防控的新策略和产品亟待研究。噬菌 体是一种能够特异性吸附感染细菌的病毒，相比抗生素而言，具有特异性强、 来源广泛、增殖力强、不易产生抗性等特点，有望成为新的抗菌剂。市场上已 经有一些商业化的噬菌体产品，如荷兰EBI食品安全公司(EBI Food Safety)将 噬菌体产品ListexTM P100用于肉类和奶酪产品中单增李斯特氏菌的防控。美国 食品药品监督管理局(U.S.Food and Drug Administration，FDA)先后批准了 EcoShieldTM和Salmonelex等产品，可以添加到食品中以防控大肠杆菌O157:H7 和沙门氏菌等污染。
[0004]毫无疑问，噬菌体作为抗菌剂的前景是非常可观的，但依然有许多因素限 制其发展，主要以下几方面：
[0005]首先，噬菌体存在严格的宿主特异性，造成其宿主谱狭窄，单独使用显然 缺乏力度且使用范围受到限制。目前大部分的沙门氏菌噬菌体的裂解对象是 Salmonella Enteritis和Salmonella Typhimurium，而针对其它血清型的噬菌体比较 少。
[0006]其次，一些噬菌体属于温和噬菌体，其DNA主要是以整合到细菌染色体上 的方式，与细菌共同繁殖，只有在遇到逆境胁迫的情况下，才会进入裂解期， 所以裂解时间较长。且细菌的致病基因嵌入到噬菌体的基因组上，极易导致致 病基因扩散等问题。
[0007]最后，噬菌体同样存在突变或失活，噬菌体制剂难以保存等特点。因此， 在运输和销售过程中，必须保持噬菌体的效价在有效的范围内，且确保在投放 应用的环境中，噬菌体能够稳定存活，发挥其作用。
[0008]目前缺乏能够同时解决以上问题而且遗传信息和理化性质清晰的沙门氏菌 噬菌体。

技术实现思路

[0009]为解决上述技术问题，本专利技术提供了一种新型沙门氏菌的噬菌体 vB_SalP_TR2，该噬菌体具有一定范围的裂解宿主谱，可以裂解Albany， Corvallis，Newport，Kottbus和Istanbul血清型沙门氏菌；该噬菌体可以单独或 与其他物质复配使用，为食品消毒净化提供一种安全、无毒的噬菌体产品。本 专利技术采用以下技术方案实现本专利技术的目的：
[0010]一种沙门氏菌噬菌体，申请人将其命名为：vB_SalP_TR2，所述噬菌体保藏 编号为：GDMCC No:61403
‑
B1，分类名为：Salmonella enterica bacteriophage； 保藏时间：2021年02月26日；保藏单位：广东省微生物菌种保藏中心；保藏 地址：中国广州市先烈中路100号59号楼五楼广东省微生物研究所。该噬菌体 具有呈正二十面体的头部和可伸缩的尾部；噬菌体在固体培养基上可以形成透 亮空斑，周围无晕环，边缘清晰规则，直径为1～2mm；基因组核酸的酶切图谱 显示该噬菌体核酸是双链DNA(dsDNA)；根据国际病毒分类委员会(ICTV)2005 年发表的《病毒分类国际病毒分类委员会第八次报告》，vB_SalP_TR2属于短尾 病毒科(Podoviridae)。该噬菌体在4～60℃中放置1h，活性稳定；处于pH4和 pH11时，其效价与初始效价无显著性差异。
[0011]进一步地，所述噬菌体属于短尾噬菌体，呈多面体的头部和短尾结构，头 部长61.5～62.5nm，宽59～61nm，尾部长34～36nm。申请人通过在透射电镜下 进行观察，发现该噬菌体具有二十面体头部(长62
±
0.5nm和宽60
±
1nm)和短 的尾巴(长35
±
1nm)，符合Caudoviricetes Podoviridae的典型特征。因此，该 沙门氏菌噬菌体vB_SalP_TR2属于有尾病毒目，短尾噬菌体科。
[0012]进一步地，所述噬菌体vB_SalP_TR2的基因组序列如SEQ IDNO：1所示。 申请人通过对噬菌体vB_SalP_TR2全基因组测序及全基因组特征分析发现该噬 菌体的基因组序列如SEQ IDNO：1所示。
[0013]进一步地，所述噬菌体vB_SalP_TR2不包含细菌耐药或/和毒力基因。由于 本专利技术的噬菌体不含有耐药或/和毒力基因，在食品应用上具有安全性。申请人 通过对噬菌体vB_SalP_TR2全基因组特征分析发现在噬菌体vB_SalP_TR2的基 因组中，并未发现编码于目前己知毒力或耐药性相关的基因，因此噬菌体 vB_SalP_TR2可以安全应用于食品领域噬菌体防控。
[0014]进一步地，所述噬菌体vB_SalP_TR2在pH值2～11、在4～80℃条件下具有 耐性。专利技术人通过大量试验研究发现，噬菌体vB_SalP_TR2在pH值2～11、在 4～80℃条件下仍保持一定的裂解作用。
[0015]本专利技术还提供了所述噬菌体vB_SalP_TR2在制备抑制或杀灭沙门氏菌菌株 制剂中的应用。
[0016]进一步地，所述制剂为喷雾剂或洗剂。由于所述噬菌体vB_SalP_TR2具有 较好的亲水相，容易配制成液体型的喷雾或洗剂，对食品中的沙门氏菌的污染 可进行有效的杀灭。申请人将所述噬菌体vB_SalP_TR2的浓缩液用于在牛奶和 鸡肉中对Salmonella Albany的杀灭，发现能实现对一定数量沙门氏菌的防控， 抑制Salmonella Albany的增殖。
[0017]进一步地，所述应用为在食品杀菌中的应用。
[0018]本专利技术还提供了一种含有本专利技术噬菌体vB_SalP_TR2的组合物，所述组合 物至少含有本专利技术的噬菌体vB_SalP_TR2。
[0019]与现有技术相比，本专利技术的有益效果为：
[0020](1)本专利技术噬菌体vB_SalP_TR2具有较强的杀灭活性和一定范围的裂解 谱，可针对性地杀灭Salmonella Corvallis，Salmonella本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种沙门氏菌噬菌体，其特征在于，所述噬菌体为沙门氏菌噬菌体vB_SalP_TR2，其保藏编号为：GDMCC No:61403
‑
B1。2.如权利要求1所述的沙门氏菌噬菌体，其特征在于，所述噬菌体属于短尾噬菌体，呈多面体的头部和短尾结构，头部长61.5～62.5nm，宽59～61nm，尾部长34～36nm。3.如权利要求1所述的沙门氏菌噬菌体，其特征在于，所述噬菌体vB_SalP_TR2的基因组序列如SEQ ID NO：1所示。4.如权利要求1所述的沙门氏菌噬菌体，其特征在于，所述噬菌体...

【专利技术属性】
技术研发人员：张菊梅，尚玉婷，叶青华，孙奇凡，吴清平，陈谋通，陈韩芳，相欣然，
申请(专利权)人：广东省科学院微生物研究所广东省微生物分析检测中心，
类型：发明
国别省市：