一种产吲哚-3-乙酸的恶臭假单胞菌工程菌株及其构建方法与应用技术

本发明专利技术公开了一种产吲哚‑3‑乙酸的恶臭假单胞菌工程菌株及其构建方法与应用。本发明专利技术恶臭假单胞菌工程菌株包含经过密码子优化的色氨酸单加氧酶基因iaaM和吲哚乙酰胺水解酶基因iaaH，所述iaaM和iaaH由tac启动子控制表达，并通过同源交换以替换基因PP_2552的方式整合到基因组中，能够在所述恶臭假单胞菌中稳定遗传并表达有活性的色氨酸单加氧酶和吲哚乙酰胺水解酶。本发明专利技术所述恶臭假单胞菌工程菌株能够高效将色氨酸转化为吲哚‑3‑乙酸，具有良好的应用前景。

【技术实现步骤摘要】

本专利技术涉及基因工程领域，具体涉及一种产吲哚-3-乙酸的恶臭假单胞菌工程菌株及其构建方法与应用。

技术介绍

1、吲哚-3-乙酸(indole-3-acetic acid，iaa)是最早发现的植物激素类化学物质之一，又被称为生长素，具有调节茎芽生长速率、顶端优势、向光性以及促进生根等作用，但是浓度过高时对生长则具有抑制作用。在适当的浓度范围内，吲哚-3-乙酸能够有效促进插枝生根、果树开花和果实发育等，由于吲哚-3-乙酸稳定性较低，见光易分解，在农业生产中常使用人工合成的萘乙酸、2,4-二氯苯氧基乙酸和吲哚-3-丁酸等类似物替代。

2、吲哚-3-乙酸不仅是植物用于调节生长的重要激素，还是微生物与植物之间发生相互作用的重要信号分子。除植物外，许多微生物也能够合成吲哚-3-乙酸，一些根际促生菌如多粘类芽孢杆菌能够合成吲哚-3-乙酸并诱导根系伸长，增加根系生物量，在帮助植物生长的同时也有利于种群的生存。在细菌中已鉴定的吲哚-3-乙酸合成途径主要有吲哚丙酮酸(ipa)途径、色胺(tam)途径和吲哚乙酰胺(iam)途径，均是通过2～3个步骤将色氨酸转化为吲本文档来自技高网...

【技术保护点】

1.一种产吲哚-3-乙酸的恶臭假单胞菌工程菌株，其特征在于，所述工程菌株以恶臭假单胞菌KT2440为出发菌，其基因组上整合了经过密码子优化的色氨酸单加氧酶基因iaaM和吲哚乙酰胺水解酶基因iaaH，密码子优化后的iaaM和iaaH基因簇的碱基序列如SEQ IDNO.2所示，该基因簇由tac启动子控制表达，tac启动子的碱基序列如SEQ ID NO.3所示，同时，工程菌株基因组中的基因PP_2552被敲除。

2.根据权利要求1所述的恶臭假单胞菌工程菌株，其特征在于，所述的tac启动子与密码子优化后的iaaM和iaaH相连，组成Ptac-iaaMHopt表达模块。

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【技术特征摘要】

1.一种产吲哚-3-乙酸的恶臭假单胞菌工程菌株，其特征在于，所述工程菌株以恶臭假单胞菌kt2440为出发菌，其基因组上整合了经过密码子优化的色氨酸单加氧酶基因iaam和吲哚乙酰胺水解酶基因iaah，密码子优化后的iaam和iaah基因簇的碱基序列如seq idno.2所示，该基因簇由tac启动子控制表达，tac启动子的碱基序列如seq id no.3所示，同时，工程菌株基因组中的基因pp_2552被敲除。

2.根据权利要求1所述的恶臭假单胞菌工程菌株，其特征在于，所述的tac启动子与密码子优化后的iaam和iaah相连，组成ptac-iaamhopt表达模块。

3.一种权利要求1或2所述的恶臭假单胞菌工程菌株的构建方法，其特征在于，包括以下步...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘惠忠，谢小保，宋亚凤，施庆珊，
申请(专利权)人：广东省科学院微生物研究所广东省微生物分析检测中心，
类型：发明
国别省市：