一种脐带间充质干细胞无血清培养设备及其培养方法技术

本发明专利技术公开一种脐带间充质干细胞无血清培养设备及其培养方法，涉及细胞培养领域。无菌培养箱的外表面固定安装有玻璃板，玻璃板的侧壁上固定连接有乳胶手套，无菌培养箱的顶部固定安装有显微镜，无菌培养箱的内底部固定安装有离心机，无菌培养箱的内部设有支撑杆，支撑杆的下表面活动卡接有固定盘，固定盘的内部活动插接有培养试管。该脐带间充质干细胞无血清培养设备及其培养方法，方便在无菌环境下完成对脐带间充质干细胞的分离、处理和培养，减少外部污染。少外部污染。少外部污染。

【技术实现步骤摘要】
一种脐带间充质干细胞无血清培养设备及其培养方法


[0001]本专利技术涉及细胞培养
，具体为一种脐带间充质干细胞无血清培养设备及其培养方法。

技术介绍

[0002]脐带间充质干细胞是指存在于新生儿脐带组织中的一种多功能干细胞，它能分化成许多种组织细胞，脐带间充质干细胞具有较高的分化潜能，可向多个方向进行分化，它在骨、软骨、肌肉、肌腱、韧带、神经、肝、内皮和心肌等组织工程方面具有广阔的临床应用前景，有报道从人脐带中分离出干细胞，且细胞含量、增殖能力优于骨髓干细胞，免疫原性比骨髓干细胞低，并且具有取材方便，无伦理学争议等优点，因此越来越受到研究工作者们的关注。
[0003]目前在脐带间充质干细胞培养的过程中，通常是通过胶原酶和胰酶消化法，进行分离培养，在培养的时候，需要将其放在培养基中长达15
‑
30天左右，在这个过程中，不仅需要密切关注细胞的生长情况，同时还要避免培养基受到外部环境影响和细菌感染，因此通常是在超净台中进行操作，然后放入到无菌培养仓内部进行培养，但是在培养的过程中还需要进行离心、分离和更换培养基等众多操作，因此需要进行移动，这使得培养基与外部接触发生污染的风险增大，因此需要提供一种脐带间充质干细胞无血清培养设备及其培养方法以解决上述问题。

技术实现思路

[0004](一)解决的技术问题
[0005]针对现有技术的不足，本专利技术公开了一种脐带间充质干细胞无血清培养设备及其培养方法，以解决上述
技术介绍
中提出的问题。
[0006](二)技术方案<br/>[0007]为实现以上目的，本专利技术通过以下技术方案予以实现：一种脐带间充质干细胞无血清培养设备及其培养方法，包括；
[0008]无菌培养箱，所述无菌培养箱的外表面固定安装有玻璃板，所述玻璃板的侧壁上固定连接有乳胶手套，所述无菌培养箱的侧面活动铰接有侧开箱门，所述侧开箱门的内侧壁上固定安装有储物盒，所述无菌培养箱的顶部固定安装有显微镜，所述无菌培养箱的内底部固定安装有离心机，所述无菌培养箱的内部设有支撑杆，所述支撑杆的下表面活动卡接有固定盘，所述固定盘的内部活动插接有培养试管；
[0009]抽吸泵，所述抽吸泵的一端延伸至无菌培养箱的内部活动安装有抽吸管，所述抽吸泵的另一端设有污水筒，所述无菌培养箱的内侧壁上活动安装有抽拉喷头，所述无菌培养箱的内侧壁上活动卡接有清洗盘。
[0010]优选的，所述抽吸管和抽吸泵之间固定连接有抽拉软管，所述无菌培养箱的背面固定连接有进水管，所述抽拉喷头的末端通过抽拉软管与进水管相连接，所述无菌培养箱
的背面开设有卡槽，所述污水筒的外表面固定连接有卡块，所述卡块活动卡接在卡槽的内部。
[0011]优选的，所述无菌培养箱的内侧壁上开设有第一滑槽，所述清洗盘的顶端侧面固定连接有限位轴，所述限位轴滑动连接在第一滑槽的内部，所述清洗盘的底端内部设有卡接组件，所述卡接组件与无菌培养箱的内侧壁活动卡接。
[0012]优选的，所述卡接组件包括转动头、齿轮、齿条、第一弹簧、固定轴和卡条，所述转动头转动连接在清洗盘的外表面，所述齿轮固定连接在转动头的端部，所述齿条滑动连接在清洗盘的内部，所述齿轮与齿条相啮合，所述第一弹簧活动卡接在齿条的一端内部，所述卡条固定连接在齿条的另一端，所述固定轴的一端固定连接在清洗盘的内部，所述固定轴的另一端与第一弹簧相抵。
[0013]优选的，所述无菌培养箱的侧壁上开设有第二滑槽，所述侧开箱门的两侧均活动铰接有连接条，所述连接条的另一端滑动连接在第二滑槽的内部，所述侧开箱门的内侧壁上固定连接有密封橡胶板，所述储物盒固定连接在密封橡胶板的外表面，所述侧开箱门的顶部转动连接有固定螺栓，所述固定螺栓的端部螺纹连接在无菌培养箱的外表面。
[0014]优选的，所述离心机的顶部活动铰接有转动盖板，所述转动盖板的下表面设有圆形挡片，所述离心机的上表面开设有方形槽，所述固定盘的下表面固定连接有与方形槽相适配的方形条。
[0015]优选的，所述转动盖板的上表面开设有活动槽，所述活动槽的内部滑动连接有插销，所述插销与离心机活动插接，所述转动盖板的下表面固定连接有固定套筒，所述固定套筒的内部活动卡接有第二弹簧，所述圆形挡片的顶端转动连接有插杆，所述插杆的顶端活动插接在固定套筒的内底部。
[0016]优选的，所述无菌培养箱的内侧壁上固定连接有固定座，所述支撑杆的一端活动铰接在固定座的下表面，所述支撑杆的外表面开设有观测孔，所述观测孔正对显微镜的底端，所述支撑杆的另一端转动连接有卡座，所述固定盘的上表面中部开设有固定槽，所述固定盘的外表面四周开设有插槽，所述卡座的底端活动卡接在固定槽的内部，所述培养试管活动插接在插槽的内部。
[0017]优选的，所述卡座的上表面活动插接有活动杆，所述活动杆的外表面活动套接有第三弹簧，所述活动杆的底端固定连接有固定板，所述固定板的底端固定连接有三角推块，所述卡座的底部固定连接有固定块，所述固定块的内部两侧均活动卡接有限位连接块，两组所述限位连接块相对的一侧活动卡接有第四弹簧，所述三角推块的底端与两组限位连接块相背的一侧外表面相抵。
[0018]优选的，首先取新鲜脐带一条将其充分冲洗，去除脐带中残留血，然后将脐带剪碎加入到培养试管中，然后向内部添加千分之一浓度的胶原酶Ⅳ，然后静置三十分钟等待细胞组织消化，然后向其中加入十分之一浓度的FBS终止消化，然后对其进行过滤，将获得的细胞滤液进行离心；
[0019]然后向培养试管中加入含有LG
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DMEM培养液，培养三四天后更换培养液，然后再向培养试管中加入终浓度为千分之一的胰酶，进行搅拌三十分钟，等待组织进一步消化，然后再加入十分之一浓度的PBS终止消化，然后再一次过滤，再次对滤液进行离心，离心后的细胞滤液中加入含有LG
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DMEM培养液，培养三四天后进行过滤，然后更换培养液，并去除其中
未贴壁细胞，之后每隔三天进行一次过滤和换液，直到细胞充分融合传代；
[0020]最后，等到细胞融合生长至七八成后，再次向培养试管内部加入加入浓度为千分之二浓度的的EDTA进行消化，此时轻轻摇动培养试管，使得消化液能够覆盖全部细胞表面，然后过滤掉细胞培养液后，再加上三至五毫升的消化液，此时在光学显微镜下观察脐带间充质干细胞的生长情况。
[0021]本专利技术公开了一种脐带间充质干细胞无血清培养设备及其培养方法，其具备的有益效果如下：
[0022]1、该脐带间充质干细胞无血清培养设备及其培养方法，通过在无菌培养箱的外表面固定安装有玻璃板，玻璃板的侧壁上固定连接有乳胶手套，通过在无菌培养箱的顶部固定安装有显微镜，无菌培养箱的内底部固定安装有离心机，无菌培养箱的内部设有支撑杆，支撑杆的下表面活动卡接有固定盘，固定盘的内部活动插接有培养试管，方便将脐带间充质干细胞处理和培养过程中所有操作步骤均在无菌培养箱内部进行，减少与外部接触污染的情况发生。
[0023]2、该脐带间充质干细胞无血清培养设备及其培养方法，通过本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种脐带间充质干细胞无血清培养设备，其特征在于，包括；无菌培养箱(1)，所述无菌培养箱(1)的外表面固定安装有玻璃板(2)，所述玻璃板(2)的侧壁上固定连接有乳胶手套(10)，所述无菌培养箱(1)的侧面活动铰接有侧开箱门(3)，所述侧开箱门(3)的内侧壁上固定安装有储物盒(21)，所述无菌培养箱(1)的顶部固定安装有显微镜(4)，所述无菌培养箱(1)的内底部固定安装有离心机(16)，所述无菌培养箱(1)的内部设有支撑杆(30)，所述支撑杆(30)的下表面活动卡接有固定盘(31)，所述固定盘(31)的内部活动插接有培养试管(15)；抽吸泵(5)，所述抽吸泵(5)的一端延伸至无菌培养箱(1)的内部活动安装有抽吸管(19)，所述抽吸泵(5)的另一端设有污水筒(6)，所述无菌培养箱(1)的内侧壁上活动安装有抽拉喷头(18)，所述无菌培养箱(1)的内侧壁上活动卡接有清洗盘(11)。2.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞无血清培养设备，其特征在于：所述抽吸管(19)和抽吸泵(5)之间固定连接有抽拉软管，所述无菌培养箱(1)的背面固定连接有进水管(7)，所述抽拉喷头(18)的末端通过抽拉软管与进水管(7)相连接，所述无菌培养箱(1)的背面开设有卡槽(8)，所述污水筒(6)的外表面固定连接有卡块(9)，所述卡块(9)活动卡接在卡槽(8)的内部。3.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞无血清培养设备，其特征在于：所述无菌培养箱(1)的内侧壁上开设有第一滑槽(14)，所述清洗盘(11)的顶端侧面固定连接有限位轴，所述限位轴滑动连接在第一滑槽(14)的内部，所述清洗盘(11)的底端内部设有卡接组件(23)，所述卡接组件(23)与无菌培养箱(1)的内侧壁活动卡接。4.根据权利要求3所述的一种脐带间充质干细胞无血清培养设备，其特征在于：所述卡接组件(23)包括转动头(231)、齿轮(232)、齿条(233)、第一弹簧(234)、固定轴(235)和卡条(236)，所述转动头(231)转动连接在清洗盘(11)的外表面，所述齿轮(232)固定连接在转动头(231)的端部，所述齿条(233)滑动连接在清洗盘(11)的内部，所述齿轮(232)与齿条(233)相啮合，所述第一弹簧(234)活动卡接在齿条(233)的一端内部，所述卡条(236)固定连接在齿条(233)的另一端，所述固定轴(235)的一端固定连接在清洗盘(11)的内部，所述固定轴(235)的另一端与第一弹簧(234)相抵。5.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞无血清培养设备，其特征在于：所述无菌培养箱(1)的侧壁上开设有第二滑槽(12)，所述侧开箱门(3)的两侧均活动铰接有连接条(13)，所述连接条(13)的另一端滑动连接在第二滑槽(12)的内部，所述侧开箱门(3)的内侧壁上固定连接有密封橡胶板(20)，所述储物盒(21)固定连接在密封橡胶板(20)的外表面，所述侧开箱门(3)的顶部转动连接有固定螺栓(22)，所述固定螺栓(22)的端部螺纹连接在无菌培养箱(1)的外表面。6.根据权利要求1所述的一种脐带间充质干细胞无血清培养设备，其特征在于：所述离心机(16)的顶部活动铰接有转动盖板(24)，所述转动盖板(24)的下表面设有圆形挡片(25)，所述离心机(...

【专利技术属性】
技术研发人员：沈健，刘正明，欧阳效晴，杨淑青，
申请(专利权)人：江苏蒙彼利生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：