通过靶向新Tau物种治疗Tau蛋白病的方法技术

本发明专利技术涉及使用特异性结合新Tau物种，尤其是从第11位甲硫氨酸残基开始的Tau物种的抗体治疗tau蛋白病的方法，所述甲硫氨酸被N

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】通过靶向新Tau物种治疗Tau蛋白病的方法


[0001]本专利技术涉及使用特异性结合新Tau物种，尤其是从第11位甲硫氨酸残基开始的Tau物种的抗体治疗tau蛋白病的方法，所述甲硫氨酸被N
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α乙酰化(AcMet11
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Tau)。本专利技术进一步涉及特异性单克隆抗体2H2D11及其衍生物。这些特异性抗体可用于治疗Tau蛋白病，例如阿尔茨海默病。

技术介绍

[0002]Tau蛋白属于微管相关蛋白家族并且主要存在于神经元中，其中它们主要参与微管稳定性和动力学以及轴突运输的调节。成人脑中存在六种Tau异构体，具有不同的N端，并且在其C端部分包含4个微管结合域(4R同种型)或3个微管结合域(3R同种型)。通过外显子2、3和10的选择性剪接，Tau蛋白衍生自单个基因(Caillet
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Boudin et al.,2015)。在称为Tau蛋白病的一大类神经退行性疾病中，Tau蛋白聚集成细丝。阿尔茨海默病(AD)是最常见的Tau蛋白病和痴呆症形式。其神经病理学标志之一是由携带异常翻译后修饰的聚集的Tau蛋白组成的神经原纤维变性(NFD)。皮质脑区NFD的进展与AD的认知障碍密切相关(Braak and Braak,1995；Duyckaerts et al,1998；Delacourte et al.,1999)，因此表明Tau是AD病理和有价值的治疗靶点的核心参与者(Novak et al.,2018)。免疫疗法目前是考虑治疗AD的创新且有前途的治疗方法(Wisniewski et al.,2014)。Tau蛋白病啮齿动物模型中的被动免疫疗法表明，通过全身途径注射的单克隆抗体可以穿过血脑屏障并结合Tau靶向蛋白(Pedersen et al.,2015；Ittner et al.,2015)。基于Tau的免疫疗法在小鼠模型中的有益作用的机制仍有待确定。治疗性抗体可以阻止Tau接种，从而避免病理性寡聚体和聚集的Tau物种的形成，或阻止细胞间Tau扩散，或通过内体/溶酶体途径促进Tau降解(Sigurdsson et al.,2016)。但是，Tau免疫疗法的挑战依赖于在不影响正常Tau蛋白的情况下鉴别待靶向的Tau物种，从而避免有害的副作用。
[0003]最后，存在开发用于tau疾病的新免疫疗法的持续需要。
[0004]在AD脑中发现的Tau物种中，截短形式可能是有毒物种，但它们在病理过程中的作用尚未得到充分研究(Zilka et al.,2012)。专利技术人最近从人脑中鉴别了新的N端截短的Tau物种(Derisbourg et al.,2015)。在这些新物种中，从残基Met11(Met11
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Tau)开始的Tau蛋白特别令人感兴趣，因为Met11位于由所有Tau蛋白同种型共享的外显子1编码的区域。尽管对外显子1的功能知之甚少，但其修饰可能影响Tau功能并导致Tau病理(Hayashi et al.,2002；Poorkaj et al.,2002；Magnani et al.,2007；Derisbourg et al.,2015)。Tau的N端的作用至少与其参与特定Tau结构的形成有关。事实上，由于N端和C端结构域之间的分子内相互作用，作为天然未折叠蛋白的Tau可能采用“回形针”构象(Carmel et al.,1996；Jeganathan et al.,2006；Jeganathan et al.,2008)。因此，如在Met11
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Tau蛋白中遇到的那样，Tau最外层N端的丧失将具有重要的功能和病理后果。更有趣的是，我们对蛋白质组学数据的进一步分析表明，在N
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α
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末端乙酰化形式(AcMet11
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Tau)中也检测到Met11
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Tau。重要的是，这些Tau物种之前从未被描述。专利技术人首先开发了一种单克隆抗体，允许特
异性检测AcMet11
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Tau物种。然后，抗体用于使用逐渐发展为神经原纤维变性(NFD)和记忆缺陷的Thy
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Tau22转基因小鼠模型建立AcMet11
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Tau物种与Tau病理之间的关联(Schindowski et al.,2006；Van der Jeugd at al.,2013)。在Thy
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Tau22小鼠海马脑切片上显示NFD的神经元中清楚检测到AcMet11
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Tau物种。有趣的是，在记忆缺陷之前的病理过程的早期阶段检测到AcMet11
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Tau表位。此外，人脑海马切片的免疫组织化学分析表明，所述抗体标记AD脑中的神经原纤维缠结，而它在来自老年对照的海马体中不具有反应性(WO 2018/178078)。总体而言，我们的数据表明，AcMet11
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Tau表位在显示NFD的神经元中被清楚检测到，并代表具有病理生理学和治疗价值的新的和早期病理性Tau物种。
[0005]专利技术概述
[0006]本专利技术提供用于治疗用途的抗Tau抗体，其中所述抗体结合包含以下氨基酸序列(N
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α
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乙酰基)MEDHAGTYGLG(SEQ ID NO：8)的表位。
[0007]在具体实施方案中，本专利技术的抗Tau抗体用于治疗tau蛋白病。
[0008]本专利技术进一步涉及特异性抗AcMet11
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Tau抗体和衍生物。
[0009]专利技术详述
[0010]专利技术人之前的数据表明AcMet11
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Tau是AD相关
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Tau病理的生物标志物标志性特征(参见WO 2018/178078)。
[0011]专利技术人目前进行了进一步的分析，并且数据表明AcMet11
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Tau是参与Tau病理发展的病理性Tau物种。
[0012]首先，专利技术人已经对AD脑蛋白进行了生化分离。ELISA分析表明，与病理性过度磷酸化Tau蛋白一样，AcMet11
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Tau物种存在于不溶性部分(含有Tau蛋白聚集体)中(图1)。
[0013]其次，在从3
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10个月逐渐发展为海马Tau病理并从6个月逐渐发展为记忆缺陷的THY
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Tau22小鼠中(Schindowski et al.,2006；Van der Jeugd at al.,2013)，AcMet11
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Tau物种在记忆缺陷之前的病理过程的早期阶段检测到(图2)。
[0014]第三，专利技术人通过显示AcMet11
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Tau物种的脑表达增强Thy
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Tau转基因小鼠中Tau病理的发展(图3和4)，并且至少通过加速Tau病理参与了病理过程，证实了AcMet11
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Tau物种与Tau病理之间的因果关系。
[0015]第四，专利技术人使用了基本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.用于治疗用途的抗Tau抗体，其中所述抗体结合包含以下氨基酸序列(N
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α
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乙酰基)MEDHAGTYGLG(SEQ ID NO：8)的表位。2.根据权利要求1所述的用于其用途的抗Tau抗体，其特异性结合从第11位甲硫氨酸残基开始的Tau多肽，其中所述第11位甲硫氨酸被N
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α乙酰化(AcMet11
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Tau)。3.根据权利要求2所述的用于其用途的抗Tau抗体，其特异性结合Tau多肽，其中所述多肽选自下组：(i)由Tau N
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α乙酰基
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Met11
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352组成的氨基酸序列(SEQ ID NO:1)；(ii)由Tau N
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α乙酰基
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Met11
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381组成的氨基酸序列(SEQ ID NO:2)；(iii)由Tau N
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α乙酰基
‑
Met11
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383组成的氨基酸序列(SEQ ID NO:3)；(iv)由Tau N
‑
α乙酰基
‑
Met11
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410组成的氨基酸序列(SEQ ID NO:4)；(v)由Tau N
‑
α乙酰基
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Met11
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412组成的氨基酸序列(SEQ ID NO:5)；(vi)由Tau N
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α乙酰基
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Met11
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441组成的氨基酸序列(SEQ ID NO:6)；(vii)由Tau N
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α乙酰基
‑
Met11
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776组成的氨基酸序列(SEQ ID N0:7)；(viii)从(i)
‑
(vii)的序列的第11位的N
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α乙酰基甲硫氨酸残基开始的至少9个连续氨基酸的片段。4.根据权利要求1
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3任一项所述的用于其用途的抗Tau抗体，其中所述抗体不结合非N
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α
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乙酰化形式的甲硫氨酸11Tau多肽(SEQ ID N
°
9)和/或N
‑
α
‑
乙酰基
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Met1
‑
Tau多肽(SEQ ID N
°
10)。5.根据权利要求1
‑
4所述的用于其用途的抗体，其用于治疗tau蛋白病。6.根据权利要求5所述的用于其用途的抗体，其中tau蛋白病是阿尔茨海默病。7.抗Tau抗体，其中所述抗体包含：(a)重链，其中可变结构域包含：
‑
H
‑
CDR1，其与SEQ ID NO:11所示的序列具有90、91、92、93、94、95、96、97、98或99％同一性，和
‑
H
‑
CDR2，其与SEQ ID NO:12所示的序列具有90、91、92、93、94、95、96、97...

【专利技术属性】
技术研发人员：‑，
申请(专利权)人：里尔大学里尔大学地区医院中心，
类型：发明
国别省市：