CD31竞争剂及其用途制造技术

本发明专利技术涉及分离的抗人CD38抗体或其抗原结合片段；编码其的核酸和表达载体。本发明专利技术进一步涉及与CD31特异性竞争结合CD38的化合物，用于预防和/或治疗有此需要的受试者中的疾病，所述疾病选自神经变性疾病、神经炎性疾病、炎性疾病、自身免疫疾病、代谢性疾病、眼部疾病、年龄相关疾病、癌症和转移。癌症和转移。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】CD31竞争剂及其用途


[0001]本专利技术涉及疾病的预防和/或治疗领域。
[0002]特别地，本专利技术涉及用于预防和/或治疗疾病的化合物，所述化合物是CD31的竞争剂(competitor)。

技术介绍

[0003]CD31，也称为血小板内皮细胞粘附分子
‑
1(Platelet endothelial cell adhesion molecule
‑
1，PECAM
‑
1)，是130kDa的I型跨膜糖蛋白，由6个细胞外免疫球蛋白(Ig)样同源结构域、一个19个残基的跨膜结构域和一个118个残基的细胞质尾组成(Newman和Newman,2003.Arterioscler Thromb Vasc Biol.23:953
‑
964)。因此，CD31属于细胞粘附分子的Ig超家族。CD31能够通过涉及Ig样结构域1的亲同种抗原相互作用(homophilic interaction)与自身结合；以及通过涉及Ig样结构域1
‑
3的亲异种抗原相互作用与两种其他配体αVβ3整联蛋白和CD38结合(Newman,1997.J Clin Invest.99(1):3
‑
8)。
[0004]CD31表达主要在内皮细胞中观察到，其中它被认为是组成型标志物(constitutive marker)(Kalinowska&Losy,2006.Eur J Neurol.13(12):1284
‑<br/>90)，但CD31表达也在造血谱系(hematopoietic lineage)的大多数非红系细胞包括血小板、单核细胞、嗜中性粒细胞、T和B细胞亚群中观察到(Wang等,2003.Am J Physiol Heart Circ Physiol.284(3):H1008
‑
17)。尽管CD31亲同种抗原相互作用是内皮细胞细胞间连接的主要组成，但它也参与白细胞
‑
内皮细胞迁移的过程(血细胞渗出(diapedesis))，使白细胞在炎症期间渗透到组织中(Ilan&amp;Madri,2003.Curr Opin Cell Biol.15(5):515
‑
24)。
[0005]在金属蛋白酶依赖性切割后，发现CD31以膜形式和可溶性形式存在(Ilan等,2001.FASEB J.15(2):362
‑
72)。在一些炎性疾病包括动脉粥样硬化和败血症中观察到可溶性CD31(sCD31)的循环水平增加(Feng等,2016.Eur Rev Med Pharmacol Sci.20(19):4082
‑
4088；Kjaergaard等,2016.APMIS.124(10):846
‑
55)，这可能反映了sCD31参与减少负反馈回路模式中进一步白细胞迁移的事实(Muller等,1993.J Exp Med.178(2):449
‑
60)。有趣的是，在多种神经变性疾病包括多发性硬化(Losy等,1999.J Neuroimmunol.99(2):169
‑
72，Kuenz等,2005.J Neuroimmunol.167(1
‑
2):143
‑
9)、HIV
‑
脑炎(Eugenin等,2006.J Leukoc Biol.79(3):444
‑
52)、副肿瘤性脑
‑
脊髓
‑
多发性神经病(paraneoplastic encephalo
‑
myelo
‑
polyneuropathy)(Dziewulska等,2000.Folia Neuropathol.38(1):29
‑
33)和脑缺血(Zaremba和Losy,2002.Acta Neurol Scand.106(5):292
‑
8)中也观察到脑脊液(CSF)sCD31水平增加。对这些脑sCD31水平增加的通常理解是其表明血脑屏障(BBB)受损，这是任何神经炎症反应的典型特征(Kalinowska和Losy,2006.Eur J Neurol.13(12):1284
‑
90)。
[0006]然而，发现缺血性卒中后的脑sCD31水平与(i)神经性卒中严重程度和(ii)功能失能程度呈正相关(Zaremba和Losy,2002.Central
‑
European J Immunol.27:90
‑
96)。因此，申请人想知道sCD31是否积极参与神经变性过程。事实上，sCD31本身也可对神经元有毒。出
乎意料的是，申请人发现sCD31没有毒性，而是与之相反，它在体外对神经元有很强的保护作用。这个结果尤其令人惊讶，因为脑中的CD31表达仅限于BBB的内皮细胞(Williams等,1996.J Neurosci Res.45(6):747
‑
57)。在中和克隆Moon
‑
1抗CD31抗体存在下以及通过拮抗性抗CD38抗体(克隆OKT10或AT13/5)，sCD31的神经保护作用受到拮抗，表明sCD31的神经保护作用是通过与其配体CD38相互作用来介导的。此外，sCD31的神经保护作用被激动性抗CD38抗体重演(recapitulated)，先前显示该抗体能模拟sCD31和CD38之间的相互作用(Deaglio等,1998.J Immunol.160(1):395
‑
402)。值得注意的是，激动性抗CD38抗体(克隆HB7)的神经保护作用与sCD31的神经保护作用一样，在拮抗性抗CD38抗体(克隆OKT10或AT13/5)存在下受到抑制。
[0007]CD38是45kDa的II型跨膜糖蛋白，具有长的C末端细胞外结构域和短的N末端细胞质结构域。CD38具有多种生物活性，包括受体介导的功能(通过内化)、酪氨酸磷酸化介导的功能和酶介导的功能。此外，如WO2018224683中所公开的，报道了一些特异性抗CD38抗体在癌症治疗中是有意义的。申请人在本文中发现，当酪氨酸磷酸化受到抑制时，sCD31或激动性抗CD38抗体(克隆HB7)的神经保护作用受到拮抗。

技术实现思路

[0008]本专利技术涉及一种分离的抗人CD38抗体或其抗原结合片段，其中所述抗体或其抗原结合片段与CD31竞争，优选与人CD31竞争；并诱导细胞中的溶酶体胞吐，其在vacuolin
‑
1存在下受到抑制。
[0009]在一个实施方案中，所述分离的抗人CD38抗体或其抗原结合片段是单克隆的。
[0010]在一个实施方案中，所述分离的抗人CD38抗体或其抗原结合片段是人源化的。
[0011]在一个实施方案中，
[0012]a)所述分离的抗人CD3本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】ID NO:23的V
L
‑
CDR3；
‑
序列为SEQ ID NO：8的V
H
‑
CDR1，序列为SEQ ID NO：11的V
H
‑
CDR2，序列为SEQ ID NO：16的V
H
‑
CDR3，序列为SEQ ID NO：25的V
L
‑
CDR1，序列为SEQ ID NO：30的V
L
‑
CDR2和序列为SEQ ID NO:23的V
L
‑
CDR3；
‑
序列为SEQ ID NO：9的V
H
‑
CDR1，序列为SEQ ID NO：12的V
H
‑
CDR2，序列为SEQ ID NO：17的V
H
‑
CDR3，序列为SEQ ID NO：25的V
L
‑
CDR1，序列为SEQ ID NO：30的V
L
‑
CDR2和序列为SEQ ID NO:23的V
L
‑
CDR3；
‑
序列为SEQ ID NO：7的V
H
‑
CDR1，序列为SEQ ID NO：13的V
H
‑
CDR2，序列为SEQ ID NO：19的V
H
‑
CDR3，序列为SEQ ID NO：27的V
L
‑
CDR1，序列为SEQ ID NO：32的V
L
‑
CDR2和序列为SEQ ID NO:23的V
L
‑
CDR3；
‑
序列为SEQ ID NO：9的V
H
‑
CDR1，序列为SEQ ID NO：14的V
H
‑
CDR2，序列为SEQ ID NO：20的V
H
‑
CDR3，序列为SEQ ID NO：28的V
L
‑
CDR1，序列为SEQ ID NO：30的V
L
‑
CDR2和序列为SEQ ID NO:23的V
L
‑
CDR3；或
‑
序列为SEQ ID NO：9的V
H
‑
CDR1，序列为SEQ ID NO：14的V
H
‑
CDR2，序列为SEQ ID NO：16的V
H
‑
CDR3，序列为SEQ ID NO：28的V
L
‑
CDR1，序列为SEQ ID NO：30的V
L
...

【专利技术属性】
技术研发人员：L，
申请(专利权)人：ENCEFA公司，
类型：发明
国别省市：