用于治疗用途的GRP78和/或HSP70抑制剂制造技术

本发明专利技术涉及属于Hsp70家族的至少一种蛋白质的活性的抑制剂和GRP78活性的抑制剂的联合用于在治疗胰岛素抵抗和/或源自该临床病症的病状中使用。病状中使用。病状中使用。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】用于治疗用途的GRP78和/或HSP70抑制剂


[0001]本专利技术涉及属于Hsp70家族的至少一种蛋白质的活性的抑制剂和GRP78蛋白活性的抑制剂的联合用于在治疗胰岛素抵抗和/或源自该临床病症的病状中使用。

技术介绍

[0002]已知胰岛素抵抗是当胰岛分泌胰岛素但该激素无法有效触发代谢组织中的葡萄糖代谢摄取时发生的病理学状态。代谢组织不能吸收葡萄糖会导致低血糖和高胰岛素血症，这是胰岛素抵抗的症状。即使血糖峰值检查能够突出该病状，但大多数患有胰岛素抵抗的个体具有通常未被确诊的形式，并且缺乏治疗会导致胰岛素抵抗构成风险因素的多种病状例如肥胖、心血管疾病、高血压、2型糖尿病和其它与这种代谢功能障碍有关的病状的发展。
[0003]例如，肥胖和2型糖尿病(T2D)的患病率在全球范围内迅速增加。OMS数据显示，2014年，在欧洲≥18岁的39％的男性和40％的女性超重，并且10
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30％的成年人肥胖。在美国2011
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2012年国家健康和营养检查调查(2011
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2012National Health and Nutrition Examination Survey)表明，34.9％的≥20岁(年龄调整值)的成年人肥胖。
[0004]接受低热量饮食的肥胖受试者在最初1
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2周内体重迅速减轻。然而，最近的一项荟萃分析(Meta分析)和文献综述表明，在针对饮食和身体活动的生活方式改变开始起的+12个月，平均体重减轻仅为
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1.56kg(95％置信区间为
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2.27至
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0.86kg)。这表明对生活方式改变的依从性很低，人们应该在他们一生中遵循低热量饮食，但这种情况很少发生。
[0005]减肥手术(Bariatric surgery)非常有效，无论是在造成大量体重减轻还是在维持减轻的体重方面。此外，减肥手术会缓解糖尿病，或至少改善血糖控制，甚至是长期的。然而，实际上，适合减肥手术受试者中仅一小部分(约1％)接受了手术。
[0006]利用Endobarrier或甚至是通过绕过十二指肠和部分空肠运输的内窥镜引入的营养探针的营养素急性输注获得的十二指肠旁路，显著改善了胰岛素敏感性并降低了T2D肥胖患者的血糖。
[0007]十二指肠和空肠产生热休克蛋白(HSP)，直到几年前，这些蛋白被认为仅具有细胞内蛋白质运输功能。相反，在过去几年中，在文献中观察到HSP也可以被分泌，并且因此可以在血液流中发现。然而，其功能尚不清楚，并且文献数据存在争议。
[0008]考虑到胰岛素抵抗的影响，能够改善这种病理状况以对与其相关或源自其的病状具有引起的治疗/预防作用的治疗在医学中一直受到关注。

技术实现思路

[0009]本专利技术的作者已经发现患有T2D相关或T2D不相关胰岛素抵抗的肥胖受试者响应于液体高脂肪、高蔗糖饮食表现出Hsp70和GRP78二者的高循环(细胞外)水平。然而，当这种液体饮食通过十二指肠下游的鼻
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空肠管注射时，这种响应几乎完全消失，导致胰岛素敏感性和血糖控制的显著改善。作者随后研究了套筒球囊(Sleeveballoon)(一种由Keyron Ltd
开发的通过内窥镜定位的装置)在胰岛素抵抗T2D大鼠中减少胃容量并将食物旁路运输到十二指肠中的作用，并且发现在高脂肪饮食期间由十二指肠分泌的热休克蛋白(特别是Hsp70和GRP78)是胰岛素抵抗和高血糖的原因，并在大鼠中证实抑制其活性消除了胰岛素抵抗并改善了血糖控制。
[0010]基于所进行的实验和测试，本专利技术的作者发现抑制Hsp70蛋白和GRP78蛋白的活性能够治疗胰岛素抵抗和/或与其相关的或源自其的病状。
[0011]因此，本专利技术的目的是Hsp70蛋白活性或属于HSP70家族的蛋白质的活性的抑制剂与GRP78活性的抑制剂的联合，用于在治疗胰岛素抵抗和/或源自胰岛素抵抗或与胰岛素抵抗相关的病状中使用。
[0012]此外，本专利技术的作者还发现，Hsp70蛋白和GRP38蛋白可作为诊断胰岛素抵抗的生物标志物；因此，本专利技术的目的是一种用于诊断胰岛素抵抗的方法，其中在血液样品中测量两种蛋白质的浓度。
[0013]Hsp70和GRP38的血液浓度高于256pg/ml指示胰岛素抵抗。
[0014]术语
[0015]抑制可以在蛋白质、转录、翻译水平。
[0016]本说明书中的联合，它表示活性成分的联合，其为在单个剂量单位中包含所述活性成分的物理性混合物的形式，以及活性成分(指Hsp70或属于HSP70家族的蛋白质的抑制剂和GRP78的抑制剂)物理性分开的剂量单位的形式，还表示同时或顺序施用，使得每种活性成分基本上伴随另一种活性成分提供期望的治疗效果。
[0017]根据本说明书，抗体片段，它是指包含与目的抗原(在这种情况下，特异性HSP70抗原，或对属于如本文定义的HSP70家族的蛋白质具有特异性的抗原，或GRP78特异性抗原)结合的抗原结合位点的抗体片段，例如Fab片段、Fv片段、dAbs片段。
[0018]本说明书中的术语抗体包括单克隆抗体、重组抗体和融合蛋白，其中效应蛋白与识别HSP70特异性抗原、或识别对属于HSP70家族的一种蛋白质(例如表0中指出的那些)特异性的抗原、或识别GRP78特异性抗原的抗体的片段结合。
附图说明
[0019]图1：NGT受试者在液体膳食后的血浆葡萄糖(上图)和血浆胰岛素(下图)曲线。灰色菱形和灰色实线表示口服施用后的数据。黑色方块和黑线表示膳食施用到空肠中后的数据。
[0020]图2：T2D受试者在液体膳食后的血浆葡萄糖(上图)和血浆胰岛素(下图)曲线。灰色菱形和灰色实线表示口服施用后的数据。黑色方块和黑线表示膳食施用到空肠中后的数据。
[0021]图3：NGT(上图)和T2D(下图)受试者在液体膳食后的血清Hsp70时间曲线。灰色菱形和灰色实线表示口服施用液体膳食。黑色方块和黑色实线表示液体膳食直接注入空肠。
[0022]图4：NGT(上图)和T2D(下图)受试者在液体膳食后的血清GRP78时间曲线。灰色菱形和灰色实线表示口服施用液体膳食。黑色方块和黑色实线表示液体膳食直接注入空肠。
[0023]图5：NGT(上图)和T2D(下图)受试者在液体膳食后的GLP1时间曲线。灰色菱形和灰色实线表示口服施用液体膳食。黑色方块和黑色实线表示液体膳食直接注入空肠。
[0024]图6：研究结束时的大鼠体重(手术前10周HFD和手术后+10周)。
[0025]图7：假手术大鼠、植入有套筒球囊的大鼠、植入有套筒球囊并伴随有输注Hsp70+GRP78的持续输注泵的大鼠(所有大鼠具有HFD)和具有标准饮食并持续输注Hsp70+GRP78的大鼠中的血糖(图A)和血清胰岛素(图B)水平。
[0026]图8苏木精/伊红染色的肝脏切片。
[0027]箭头表示脂滴。
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.属于Hsp70家族的至少一种蛋白质的活性的抑制剂和/或GRP78蛋白活性的抑制剂，用于在治疗胰岛素抵抗和/或源自其或与其相关的病状中使用，其中所述Hsp70活性的抑制剂选自针对Hsp70蛋白或属于HSP70家族的蛋白质的单克隆抗体或其特异性片段、与编码Hsp70或属于HSP70家族的蛋白质的mRNA独特地结合的干扰RNA分子中的一种或多种，并且其中所述GRP78活性的抑制剂选自针对GRP78蛋白的单克隆抗体或其特异性片段、与编码GRP78的mRNA独特地结合的干扰RNA分子中的一种或多种。2.根据权利要求1所述的抑制剂，其中所述属于HSP70家族的蛋白质是HSP70、HSP71、HSP76、HSP74、GRP75。3.根据权利要求1或2所述的抑制剂，其中所述干扰RNA分子是对编码Hsp70或属于HSP70家族的蛋白质的RNA具有特异性的siRNA和/或对编码GRP78的RNA具有特异性的siRNA。4.根据权利要求3使用的所述抑制剂，其中所述siRNA选自SEQ ID 1至11。5.根据权利要求1至4中任一项使用的所述抑制剂，其中所述干扰RNA分子被配制为在肠中释放。6.根据权利要求1至5中任一项使用的所述抑制剂，其中所述源自胰岛素抵抗或与胰岛素抵抗相关的病状是高血糖症、2型糖尿病、代谢综合征、动脉粥样硬化、多囊卵巢综合征、血脂异常、肥胖、心血管疾病、高血压、NASH、NAFLD和肝纤维化。7.根据权利要求1至6中任一项使用的所述抑制剂，其中所述抑制剂同时或顺序施用于有此需要的患者。8.一种组合物，包含属于Hsp70家族的至少一种蛋白质的活性的抑制剂和/或GRP78蛋白活性的抑制剂和一种或多种药理学上可接受的赋形剂或载体，用于在治疗胰岛素抵抗和/或源自胰岛素抵抗或与胰岛素抵抗相关的病状中使用，并且其中所述属于Hsp70家族的至少一种蛋白质的活性的抑制剂选自针对Hsp70蛋白或属于HSP70家族的蛋白质的单克隆抗体或其特异性片段和/或与编码Hsp70的mRNA独特地结合的干扰RNA分子中的一种或多种，并且所述GRP78活性的抑制剂选自针对GRP78蛋白的单克隆抗体或其特异性片段和/或与编码GR...

【专利技术属性】
技术研发人员：格尔特鲁德，
申请(专利权)人：GHP科学有限公司，
类型：发明
国别省市：