在抗原特异性免疫细胞中调节CD160功能的方法及其用途技术

本发明专利技术提供了表达外源CD160蛋白质的修饰的抗原特异性免疫细胞。在一些实施方式中，修饰的抗原特异性免疫细胞进一步包括功能性外源受体，比如工程化的TCR或CAR。本发明专利技术还提供了调节抗原特异性免疫细胞中CD160活性的方法。本发明专利技术还提供了使用本文所述的修饰的抗原特异性免疫细胞和CD160活性的调节剂治疗癌症的方法和药物组合物。的方法和药物组合物。的方法和药物组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】在抗原特异性免疫细胞中调节CD160功能的方法及其用途
[0001]相关申请的交叉引用
[0002]本申请要求2019年3月1日提交的美国临时申请号62/812,897的权益，其每篇的整体内容通过引用并入本文。
[0003]以ASCII文本文件提交序列表
[0004]以下提交的ASCII文本文件的内容以其整体通过引用并入本文：序列表的计算机可读形式(CRF)(文件名：756592000240SEQLIST.TXT，记录日期：2020年2月24日，大小：17KB)。


[0005]本专利技术涉及调节抗原特异性免疫细胞中CD160功能的方法及其用途，抗原特异性免疫细胞包括天然和工程化的抗原特异性αβT细胞以及其他免疫细胞，比如具有或不具有工程化的抗原识别的天然杀伤(NK)细胞、天然杀伤T细胞(NK
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T细胞)、iNK
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T细胞、NK
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T
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like细胞、γδT细胞和巨噬细胞。本专利技术还涉及表达外源CD160蛋白质的抗原特异性免疫细胞，及其用于调节抗原特异性免疫细胞在治疗癌症中的功能的方法。

技术介绍

[0006]T细胞是天然的药物，其可保护我们的身体免受感染和癌症。值得注意的是，靶向肿瘤的T细胞可以通过检查点阻断和嵌合抗原受体(CAR)T细胞疗法有效地重新接合(re
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engage)以治疗癌症患者。这些免疫疗法的成功明确地表明T细胞对癌症治疗非常有效，激发了探索多种方法来激活并且使T细胞对抗癌症的。在过去的半个世纪里，开拓性的研究人员和临床医生已经探索靶向肿瘤的T细胞的过继转移来治疗人实体瘤。包括体外激活的T细胞、肿瘤浸润淋巴细胞(TIL)、携带识别肿瘤抗原或肿瘤相关抗原的特异性T细胞受体(TCR)的T细胞(TCR
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T)和源自装载肿瘤抗原的树突状细胞的T细胞(DC
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T)的多种靶向肿瘤的T细胞进行测试并且在临床前模型和人患者中显示出有希望的功效。最近，识别来自突变的癌细胞的新抗原的T细胞被用于肺癌和乳腺癌的过继性T细胞疗法，并且在一些情况下显示出功效。然而，即使借助其他疗法，比如放射、疫苗接种、化学疗法和抗肿瘤细胞因子IL
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2的共同输注，也难于以靶向肿瘤的T细胞的过继转移来可重复地实现实体瘤的持续控制和消除。
[0007]通过输注的靶向肿瘤的T细胞控制的肿瘤的相对低的应答率和最终损失可归因于T细胞的多种内在和外在屏障。这些屏障起源于内衡免疫耐受机制以及肿瘤诱导的免疫抑制机制。值得注意的是，这些耐受力造成了阻止T细胞有效控制肿瘤的屏障。例如，受涉及正负胸腺选择的中枢耐受机制控制的天然存在的抗肿瘤T细胞通常具有针对未突变的肿瘤抗原或肿瘤相关抗原具有低或中等亲和力的T细胞受体(TCR)。此外，发育的肿瘤可降低I类和II类主要组织相容性复合体(MHC)分子的表达，并且实际上限制了肿瘤抗原在肿瘤细胞上的呈递，并且从而限制了以同源TCR通过T细胞的识别。该领域的许多努力都致力于克服这些屏障，并且具有不同程度的成功。CAR可以有效地使T细胞接合肿瘤细胞，并且有助于克服T细胞对肿瘤识别的不足或损失。惊人地，靶向CD19或BCMA抗原的CAR
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T细胞可分别消除B细
胞白血病/淋巴瘤或多发性骨髓瘤。其他方法聚焦于经由体外进化通过提高肿瘤特异性TCR的亲和力或通过选择识别新抗原的TCR来克服识别屏障，从而适度提高功效。
[0008]虽然这些策略显示出前景，但为了使靶向肿瘤的T细胞能够消除或持续控制已建立的肿瘤，必须克服除抗原识别之外的另外屏障。值得注意的是，冷肿瘤—肿瘤内缺乏激活的T细胞—与预后不良和对免疫疗法的低反应性相关。据推测，除了肿瘤微环境中的许多其他未知因素外，检查点抑制、T细胞特异性化学引诱物的关闭、不利的营养和缺氧导致的T细胞耗竭也可有助于冷肿瘤现象。探索了多种基因工程化策略以增强肿瘤中的T细胞运输(trafficking)和激活。肿瘤特异性T细胞中趋化因子受体或识别VEGFR的CAR的异位表达显示出通过转移的T细胞增加肿瘤控制。此外，肿瘤特异性T细胞中的负向T细胞调节剂，比如PD
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1或CBLB或腺苷2A受体的失活导致T细胞的抗肿瘤功能的增强。有趣地，增强线粒体生物发生和氧化磷酸化的信号，比如PGC1α或OPA1或携带CD278信号传导结构域的CAR的异位表达，也可以增加转移的T细胞的抗肿瘤功能。虽然肿瘤控制中的T细胞功能可通过不同的分子和细胞过程加强，但这些策略通常不足以通过T细胞能够进行持续的肿瘤控制或消除已建立的肿瘤，因此寻找可用于改编靶向肿瘤的T细胞的分子，以持续控制和消除实体瘤是重要的。
[0009]CD160是27kDa糖蛋白，它最初是用单克隆抗体BY55在人天然杀伤细胞上鉴定的(等，1993，J Exp Med..178(3):1121
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6)。后来，CD160的主要形式是糖基
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磷脂酰肌醇(GPI)锚定的免疫球蛋白(Ig)样细胞膜受体，其在主要CD16+NK细胞子集、NK
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T细胞、γδ
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T细胞、CD4 T细胞的一些子集和CD8+溶细胞T细胞上以及激活的内皮细胞中发现(Le Bouteiller等，2011，Immunol Lett.,138(2):93
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6)。人CD160的cDNA序列编码具有单个Ig样结构域的181个氨基酸的富含半胱氨酸的、糖基磷脂酰肌醇锚定的蛋白质。随后，已鉴定出具有跨膜结构域和/或缺乏细胞外Ig样结构域的其他同种型。CD160在细胞表面表达为紧密地二硫键连接的多聚体。CD160是HVEM的配体，并且CD160与HVEM的结合导致T细胞抑制和无反应性(Cai等，2009，Nat Immunol.，9(2):176
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185)。CD160通常与抗PD
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1抗体一起被认为是具有抗癌症活性的免疫检查点抑制剂(Stecher等，2017，Front Immunol.，8:572)。已经建议CD160与BTLA(CD272)竞争结合至HVEM(Kojima等，2011，J Mol Biol.，413(4):762
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72)。NK细胞和一些人T细胞子集上的鼠和人CD160对MHC Ia类和Ib类具有低的亲和力，并且可在NK和T细胞激活中起作用(Maeda等，2005，J Immunol.，175(7):4426
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32；Agrawal等，1999，J Immunol.,162(3):1223
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6)。CD160也由内皮细胞表达，并且已被提议作为人类病理性眼部和肿瘤新血管生成的情况下潜在新靶标，所述人类病理性眼部和肿瘤新血管生成对现有的抗血管生成药物没有应答或变得抗性(Chabot等，2011，J Exp Med.，208(5):973
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86)。小鼠中CD160功能丧失分析显示出CD160对本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种在其表面上包括外源CD160蛋白质的修饰的抗原特异性免疫细胞，其中与不包括外源CD160蛋白质的前体抗原特异性免疫细胞相比，外源CD160蛋白质导致修饰的抗原特异性免疫细胞的上调，其中免疫细胞是T细胞。2.根据权利要求1所述的修饰的抗原特异性免疫细胞，其中修饰的抗原特异性免疫细胞选自由以下组成的组：细胞毒素αβT细胞、γδT细胞、辅助T细胞、肿瘤浸润T细胞、抗原呈递细胞(APC)激活的抗肿瘤T细胞和天然杀伤T细胞(NK
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T细胞)。3.根据权利要求1所述的修饰的抗原特异性免疫细胞，其中修饰的抗原特异性免疫细胞是细胞毒素T细胞。4.根据权利要求2所述的修饰的抗原特异性免疫细胞，其中修饰的抗原特异性免疫细胞是肿瘤浸润T细胞或APC激活的抗肿瘤T细胞。5.根据权利要求1所述的修饰的抗原特异性免疫细胞，其中修饰的抗原特异性免疫细胞选自由以下组成的组：天然杀伤(NK)细胞、天然杀伤T细胞(NK
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T细胞)、iNK
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T细胞、NK
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T样细胞、γδT细胞和巨噬细胞。6.根据权利要求1
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5的任一项所述的修饰的抗原特异性免疫细胞，其中外源CD160蛋白质包括SEQ ID NO:1
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4的任何一个的氨基酸序列，或与SEQ ID NO:1
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4的任何一个具有至少约90％同一性的其变体。7.根据权利要求1
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5的任一项所述的修饰的抗原特异性免疫细胞，其中外源CD160蛋白质是膜结合的。8.根据权利要求7所述的修饰的抗原特异性免疫细胞，其中所述外源CD160蛋白质：(a)经GPI连接体结合至膜；或(b)包括跨膜结构域。9.根据权利要求8所述的修饰的抗原特异性免疫细胞，其中外源CD160蛋白质进一步包括细胞内结构域。10.根据权利要求9所述的修饰的抗原特异性免疫细胞，其中细胞内结构域包括源自TCR复合物的信号传导亚单位的细胞内信号传导结构域。11.根据权利要求7所述的修饰的抗原特异性免疫细胞，其中外源CD160蛋白质经免疫细胞结合部分结合至修饰的抗原特异性免疫细胞。12.根据权利要求11所述的修饰的抗原特异性免疫细胞，其中免疫细胞结合部分结合至免疫细胞的表面分子。13.根据权利要求1
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12的任一项所述的修饰的抗原特异性免疫细胞，其中修饰的抗原特异性免疫细胞进一步包括功能性外源受体。14.根据权利要求13所述的修饰的抗原特异性免疫细胞，其中功能性外源受体是工程化的T细胞受体(TCR)或嵌合抗原受体(CAR)。15.一种产生其表面上包括外源CD160蛋白质的修饰的抗原特异性免疫细胞的方法，其包括：使前体抗原特异性免疫细胞与外源CD160蛋白质或编码外源CD160蛋白质的第一核酸接触从而产生修饰的抗原特异性免疫细胞，其中与前体抗原特异性免疫细胞相比，外源CD160蛋白质导致修饰的抗原特异性免疫细胞的上调，其中免疫细胞是T细胞。16.根据权利要求15所述的方法，其中修饰的抗原特异性免疫细胞选自由以下组成的
组：细胞毒素αβT细胞、γδT细胞、辅助T细胞、肿瘤浸润T细胞、APC激活的抗肿瘤T细胞和天然杀伤T细胞(NK
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T细胞)。17.根据权利要求15所述的方法，其中修饰的抗原特异性免疫细胞是细胞毒素T细胞。18.根据权利要求16所述的方法，其中修饰的抗原特异性免疫细胞是肿瘤浸润T细胞或APC激活的抗肿瘤T细胞。19.根据权利要求16所述的方法，其中免疫细胞选自由以下组成的组：天然杀伤(NK)细胞、天然杀伤T细胞(NK
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T细胞)、iNK
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T细胞、NK
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T样细胞、γδT细胞和巨噬细胞。20.根据权利要求15
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19的任一项所述的方法，其中方法包括将前体抗原特异性免疫细胞与外源CD160蛋白质接触。21.根据权利要求20所述的方法，其中外源CD160蛋白质包括结合至免疫细胞的表面分子的免疫细胞结合部分。22.根据权利要求15
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19的任一项所述的方法，其中方法包括将编码外源CD160蛋...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈长征，周华，孙天强，罗易灵，董国强，
申请(专利权)人：阿奇洛伊斯生物制药公司，
类型：发明
国别省市：