一种川芎道地药材指纹图谱鉴别方法技术

本发明专利技术涉及医药检测技术领域，具体涉及一种川芎道地药材指纹图谱鉴别方法，步骤：包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：取适量川芎，提取纯化其中的多糖类化合物，将得到的川芎多糖类化合物用超纯水定容，用微孔滤膜过滤，取滤液作为供试品溶液；(2)混合对照品溶液制备：精密称取葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、鼠李糖5种对照品，加入超纯水配置成混合对照品溶液；(3)测定：分别精密量取步骤(1)制备得到的供试品溶液和步骤(2)制备得到的对照品溶液，注入高效液相色谱仪测定，流动相为乙腈

【技术实现步骤摘要】
一种川芎道地药材指纹图谱鉴别方法


[0001]本专利技术涉及医药检测
，具体涉及一种川芎道地药材指纹图谱鉴别方法。

技术介绍

[0002]公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。
[0003]中药现行的定量评价方法利用光谱或色谱手段鉴别和测定某一种或几种有效成分、活性成分或指标成分，而大多数品种仅有一般的检查项目。中药因其组分复杂，化学成分具有多样性和复杂性，一直是质量评价的重点与难点。
[0004]在现阶段中药的有效成分绝大多数没有明确的情况下，中药指纹图谱对于有效控制中药材或中成药的质量具有重要的意义。近年来，由于色谱技术的迅速发展和检测能力的大大提高，为指纹图谱的研究和应用提供了良好的技术保证，中药指纹图谱对促进中药材的现代化发展和提高中药材及中药制剂的质量具有重要意义。
[0005]川芎是伞形科藁本属植物，是伞形科藁本属多年草本植物的干燥根茎，其性温，味辛，归肝、心、胆经。具有祛风止痛，活血行气的功效。临床上主要用于治疗心血管、妇科等疾病。川芎道地产区主要集中在四川都江堰地区，目前是以四川都江堰、彭州、崇州、什邡、新都等地为中心形成了主产区，为著名的川产道地药材。
[0006]川芎的活性成分主要包括挥发油类、酚酸类和生物碱类，目前确定化学结构的有11个化合物，川芎嗪类包括四甲基吡嗪、3
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异丙基
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6仲丁基
‑/>2,5
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哌嗪二酮、胆碱、三甲胺、腺嘌呤和腺苷等；内酯类化合物包括洋川芎内酯、藁本内酯、丹酸内酯、蛇床内酯、新蛇床内酯、川芎内酯等；酚酸类化合物包括阿魏酸、香兰素、丹酸、咖啡酸、棕榈酸、亚油酸和大黄酚等化合物；川芎中其他成分还包括多糖类化合物和少量的有机酸酯及一些挥发性不饱和烃类化合物。
[0007]现有技术一种川芎指纹图谱的测定方法中公开的川芎指纹图谱的测定方法选取了盐酸川芎嗪、阿魏酸、洋川芎内酯、藁本内酯、蛇床子素和欧当归内酯作为对照品，建立川芎指纹图谱，但是藁本内酯不稳定，含量变化较大，不能客观反应药材质量，且蛇床子素和欧当归内酯在川芎中的含量较低，用于评定川芎的质量意义不大；现有技术川芎药材的检测方法、鉴定方法公开了的川芎药材的检测方法、鉴定方法使用荧光分光光度法进行检测，鉴定方法为使用藁本内酯为对照品，采用荧光分光光度法测定川芎药材中总荧光物质的含量，该成分含量高低对区分是否出自道地产区有一定意义，但是藁本内酯不稳定，含量变化较大，不能客观反应药材质量；现有技术一种利用HPLC
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UV鉴别川芎药材贮存年限的方法中公开的鉴别川芎药材贮存年限的方法可以根据HPLC
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UV图谱中的特征峰峰形差异来分辨川芎药材的贮存年限，但是对不同产地的川芎药材能否鉴别开来没有提及。

技术实现思路

[0008]现有技术中川芎产地的鉴别方法通常使用阿魏酸、川芎内酯、藁本内酯、川芎嗪等作为对照品进行指纹图谱的鉴定，但是藁本内酯不稳定，含量变化较大，不能客观反应药材质量，生物碱含量较低，使用川芎嗪作为对照品评价川芎的意义不是很大。
[0009]已知川芎中含有多种多糖类化合物，如葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、半乳糖醛酸、以及鼠李糖等，本专利技术通过前期研究发现，不同产地的川芎中所含具体多糖类化合物的含量有较为明显的差别，以四川都江堰产的川芎和江西产的川芎为例，产地为四川都江堰的川芎中的多糖类化合物主要以葡萄糖、半乳糖为主，江西产的川芎中多糖类化合物主要以葡萄糖、阿拉伯糖为主，且江西产的川芎中阿拉伯糖和半乳糖的比例为3～5:1。现有技术中未见有针对川芎中多糖进行指纹图谱鉴定的研究报道。
[0010]基于此，本专利技术提供一种川芎道地药材指纹图谱鉴别方法，该鉴别方法能够将不同产地的川芎进行鉴别，特别是将四川都江堰产地和江西产地的川芎进行鉴别，并且可以采用此方法将四川产地的道地川芎与其他产地的川芎进行鉴别。
[0011]具体地，本专利技术的技术方案如下所述：
[0012]在本专利技术的第一方面，提供一种川芎道地药材指纹图谱鉴别方法，包括以下步骤：
[0013](1)供试品溶液的制备：取适量川芎，提取纯化其中的多糖类化合物，将得到的川芎多糖类化合物用超纯水定容，用微孔滤膜过滤，取滤液作为供试品溶液；
[0014](2)混合对照品溶液制备：精密称取葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、鼠李糖5种对照品，加入超纯水配置成混合对照品溶液；
[0015](3)测定：分别精密量取步骤(1)制备得到的供试品溶液和步骤(2)制备得到的对照品溶液，注入高效液相色谱仪测定，采用梯度洗脱，记录色谱图；用指纹图谱软件对所得图谱进行处理，即得川芎的指纹图谱。
[0016]在本专利技术的第二方面，提供一种第一方面所述川芎道地药材指纹图谱鉴别方法和/或所述川芎道地药材指纹图谱鉴别方法得到的指纹图谱在川芎产地分析和质量控制中的应用。
[0017]在本专利技术的第三方面，提供一种川芎产地分析和质量控制方法，其特征在于，包括以下步骤：
[0018](1)取多个批次的川芎按第一方面所述方法得到川芎样品的指纹图谱，将该多个批次川芎样品指纹图谱按照均值法生成得到对照指纹图谱；
[0019]取待测样品制备供试品溶液，按照上述构建方法的步骤进行操作，获得待检测样品指纹图谱；
[0020](2)将待测样品指纹图谱与川芎对照指纹图谱进行相似性比较，以分析待测川芎的产地分析和质量，计算方法为相关系数法。
[0021]本专利技术的具体实施方式具有以下有益效果：
[0022]本专利技术基于前期的研究发现，以四川都江堰产的川芎和江西产的川芎为例，产地为四川都江堰的川芎中的多糖类化合物主要以葡萄糖、半乳糖为主，江西产的川芎中多糖类化合物主要以葡萄糖、阿拉伯糖为主，可见不同产地川芎的多糖类化合物种类和数量不同，基于此提出以多糖类化合物为对照品的指纹图谱鉴定方法，现有技术中之前未见有针对川芎中多糖进行指纹图谱鉴定的研究报道。
[0023]克服了现有技术中川芎产地的鉴别方法通常使用阿魏酸、川芎内酯、藁本内酯、川芎嗪等作为对照品进行指纹图谱的鉴定时，藁本内酯不稳定，含量变化较大，不能客观反应药材质量带来的问题，以及生物碱含量较低，使用川芎嗪作为对照品评价川芎质量意义不大的问题。
[0024]本专利技术中以葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、鼠李糖5种多糖类化合物为对照品，覆盖面广，代表性强，所构建的指纹图谱能够更加全面反应川芎的质量信息，具有快捷、稳定、精密度高、重现性强等优点，能够用于该类制剂的质量控制；
[0025]本专利技术具体实施方式中对多糖类化合物的提取纯化方法能够使得其中的有效成分更好得溶出，使得检测结果更加精确。
附图说明
[0026]构成本专利技术的一部分的说明书附图用来提供对本专利技术的进一步理解，本专利技术的示意性实施例及其说明用于解释本专利技术本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种川芎道地药材指纹图谱鉴别方法，其特征在于，包括以下步骤：(1)供试品溶液的制备：取适量川芎，提取纯化其中的多糖类化合物，将得到的川芎多糖类化合物用超纯水定容，用微孔滤膜过滤，取滤液作为供试品溶液；(2)混合对照品溶液制备：精密称取葡萄糖、半乳糖、阿拉伯糖、甘露糖、鼠李糖5种对照品，加入超纯水配置成混合对照品溶液；(3)测定：分别精密量取步骤(1)制备得到的供试品溶液和步骤(2)制备得到的对照品溶液，注入高效液相色谱仪测定，流动相为乙腈
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水溶液，采用梯度洗脱，记录色谱图；用指纹图谱软件对所得图谱进行处理，即得川芎的指纹图谱。2.如权利要求1所述的川芎道地药材指纹图谱鉴别方法，其特征在于，提取纯化方法为：取川芎适量，研成细粉，取细粉精密称定，加入石油醚回流去除脂质；将滤渣干燥后加入超纯水使用水蒸气进行蒸馏，将滤液凝缩后加入氯仿和正丁醇的混合溶液去除其中的蛋白质，浓缩后加入无水乙醇进行醇沉，洗涤后得到川芎多糖。3.如权利要求2所述的川芎道地药材指纹图谱鉴别方法，其特征在于，石油醚回流的条件为：70
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90℃回流2
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3h，回流次数为2
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3次。4.如权利要求2所述的川芎道地药材指纹图谱鉴别方法，其特征在于，水蒸气蒸馏的条件为：蒸馏3
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4次，每次4
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5小时。5.如权利要求2所述的川芎道地药材指纹图...

【专利技术属性】
技术研发人员：赵晓辉，刘杰，陈俊亮，江玉娟，王莉，谭倩，刘大勇，孙桂雪，
申请(专利权)人：山东明仁福瑞达制药股份有限公司，
类型：发明
国别省市：