血管内皮生长因子C在制备治疗青光眼的制品中的应用制造技术

本发明专利技术提供血管内皮生长因子

【技术实现步骤摘要】
血管内皮生长因子C在制备治疗青光眼的制品中的应用


[0001]本专利技术属于眼病治疗药物
，具体涉及血管内皮生长因子C(Vascular Endothelial Growth Factor
‑
C，VEGF
‑
C)在制备治疗青光眼的制品中的应用。

技术介绍

[0002]青光眼是全球首位致盲眼病，据统计，2013年全世界40
‑
80岁的人群中，青光眼患病率为3.54％约6426万人，预计到2020年及2040年分别达到7602万人及11182万人，其中约有60％为亚洲青光眼患者。我国的流行病学研究表明，在我国非选择人群中，原发性青光眼的发病率最高为0.52％，继发性青光眼和先天性青光眼的发病率相对较低，分别为0.06％和0.02％。随着年龄增长，原发性青光眼的发病率也增加，在年龄超过40岁的人群中，原发性青光眼的发病率可达1.37％。不同类型的青光眼在性别上也存在差异，原发性闭角型青光眼(PACG)的发病率女性高于男性；原发性开角型青光眼(POAG)的发病率男性高于女性。为降低病理性升高的眼内压(IOP)，青光眼的治疗手段包括药物、激光及手术。其中，青光眼手术需将房水引流至结膜下以达到降眼压的作用；因此，手术后恢复结膜滤过功能就成为青光眼治疗手术的术后治疗的关键。

技术实现思路

[0003]本专利技术的目的是提供血管内皮生长因子
‑
C(VEGF
‑
C)在制备治疗青光眼的制品中的应用，通过结膜下注射VEGF/>‑
C生长因子来增加结膜淋巴管生成，从而弥补现有技术的不足。
[0004]本专利技术首先提供VEGF
‑
C生长因子的一种用途，是在制备用于改善青光眼滤过手术后结膜淋巴引流功能的制品中的应用；
[0005]所述的制品，为注射用液体蛋白制剂；
[0006]所述的注射用液体蛋白制剂，是将VEGF
‑
C溶解于中性缓冲液中制备的；
[0007]所述的液体蛋白制剂中VEGF
‑
C的浓度为10
‑
50μg/μl；
[0008]本专利技术另一个方面还提供一种改善滤过手术后结膜淋巴引流功能的制品，所述的制品中包含有药理有效浓度的VEGF
‑
C。
[0009]本专利技术将VEGF
‑
C生长因子注射入正常新西兰大白兔结膜下，显示VEGF
‑
C生长因子在改善滤过手术后结膜淋巴引流功能中具有重要作用。通过滤过手术后注射药物中添加VEGF
‑
C生长因子，从而达到改善滤过手术后结膜淋巴引流功能的目的。
附图说明
[0010]图1：正常新西兰大白兔结膜免疫荧光结果图，其中A
‑
H为淋巴管相关标记位点Podoplanin、LYVE
‑
1染色结果，可见Podoplanin染色结果与LYVE
‑
1染色结果基本重合；I
‑
L为淋巴管相关标记位点LYVE
‑
1与血管相关标记位点CD31染色结果，可见淋巴管相关标记位点LYVE
‑
1与血管相关标记位点CD31染色结果基本不重合。
[0011]图2：VEGF
‑
C生长因子注射入正常新西兰大白兔结膜淋巴管标记位点(Podoplanin、LYVE
‑
1)蛋白质水平变化图：VEGF
‑
C生长因子处理组的淋巴管标记位点Podoplanin、LYVE
‑
1蛋白质表达水平较对照组上调，右侧为灰度分析的结果，n＝2，P值由独立样本t检验计算得出，*：P<0.05，**：P<0.01，误差线为标准差。
[0012]图3为VEGF
‑
C生长因子注射入正常新西兰大白兔结膜淋巴管标记位点(Podoplanin、LYVE
‑
1)mRNA水平变化图，VEGF
‑
C生长因子处理组的淋巴管标记位点Podoplanin、LYVE
‑
1基因mRNA表达水平较对照组上调，P值由独立样本t检验计算得出，*：P<0.05，**：P<0.01，误差线为标准差。
具体实施方式
[0013]本专利技术所使用血管内皮生长因子
‑
C(Vascular Endothelial Growth Factor
‑
C，VEGF
‑
C)是淋巴管生成的关键调节因子，属于血管内皮生长因子家族。
[0014]本专利技术实施例中所使用的试剂材料、设备及实验动物信息如下：
[0015]1.试剂与材料：
[0016]VEGF
‑
C生长因子(Bivision，4633)；1ml注射器(KDL)；无菌磷酸盐缓冲液(PBS)(Solarbio，P1020)；TritonX100(Solarbio，T8200)，抗荧光衰减封片剂(含DAPI)(Solarbio，S2110)，Tween80(Aladdin，T104865)；RIPA细胞组织裂解液(Solarbio，R0010)；SDS
‑
PAGE Loading Buffer(non
‑
Reducing，5x)(Cwbio,cw0028)，BCA蛋白浓度测定试剂盒(碧云天，P0010)；RNA提取试剂盒(艾德莱，RN28)；反转录试剂盒(诺唯赞，R323
‑
01)；定量试剂盒(诺唯赞，Q711
‑
02)；免疫荧光及蛋白抗体与实时荧光定量PCR引物。
[0017]2.仪器：
[0018]荧光显微镜(NIKON，NI
‑
U)，凝胶成像系统(Bio
‑
rad，ChemiDoc Touch)，PCR仪(艾本德，Mastercycler X50s)，荧光定量PCR仪(ABI，7500)，组织匀浆仪(Qiagen，TissueLyserⅡ)，离心机(CT15KE)。
[0019]3.实验动物：
[0020]6‑
8周的正常新西兰大白兔，体重6
‑
8KG，购自山东第一医科大学附属青岛眼科医院实验动物中心。
[0021]下面结合实施例和附图对本专利技术进行详细的描述。下述实施例中所使用的实验方法无特殊说明，均为常规方法；所使用的材料、试剂等，如无特殊说明，均可从商业途径得到的试剂与材料。
[0022]实施例1：验证正常新西兰大白兔结膜中存在淋巴管
[0023]1.实验方法
[0024](1)冰冻切片免疫荧光染色验证正常新西兰大白兔结膜具有可被淋巴管标记物及血管标记物识别的管道结构，具体操作如下
[0025]正常新西兰大白兔空气栓塞处死，取下的眼球去除晶状体及玻璃体本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种VEGF
‑
C生长因子的应用，其特征在于，所述的用途是在制备用于改善青光眼滤过手术后结膜淋巴引流功能的制品中的应用。2.如权利要求1所述的应用，其特征在于，所述的制品为注射用液体蛋白制剂。3.如权利要求2所述的应用，其特征在于，所述的液体蛋白制剂，是将VEGF
‑
C溶...

【专利技术属性】
技术研发人员：潘晓晶，武静怡，陈鹏，刘雅萌，
申请(专利权)人：山东第一医科大学附属青岛眼科医院山东省眼科研究所，青岛眼科医院，
类型：发明
国别省市：