具有抗肿瘤活性的肽制造技术

本发明专利技术涉及分离的肽和其变体及其治疗用途。特别地，这种肽具有高选择性、高功效和低毒性的抗肿瘤活性。还描述了包含本发明专利技术所述肽的药物组合物。药物组合物。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】具有抗肿瘤活性的肽
[0001]描述
专利

[0002]本专利技术涉及分离的肽和其变体及其治疗用途。特别地，这种肽具有高选择性、高功效和低毒性的抗肿瘤活性。还描述了包含本专利技术所述肽的药物组合物。
[0003]技术状态
[0004]开发有效的抗肿瘤治疗(antineoplastic treatment)需要鉴定选择性地对于肿瘤生长为必需的分子特征。事实上，这些特征将构成理想的药理学靶，允许消除恶性细胞，同时使健康细胞免遭消除。结果将是在没有任何副作用的情况下根除肿瘤。
[0005]不幸的是，目前常规化疗以非常非特异性的方式发挥作用，往往引起严重的组织和器官损伤，并且即使是最具创新性的靶向疗法，迄今为止也显示出不完全和不足的疗效范围。因此，肿瘤仍然是世界上仅次于心血管问题的第二大死亡原因。
[0006]用于开发抗肿瘤治疗的一个潜在靶是蛋白己糖激酶2(HK2)。事实上，虽然HK2仅在有限的一组非肿瘤组织中存在，但HK2在大多数实体肿瘤和血液肿瘤中或者从头表达或者高表达。HK2与肿瘤细胞的线粒体缔合，促进其细胞内的复制代谢，并且使其对细胞死亡刺激(诸如化疗和放疗)的敏感性大幅降低。这种蛋白的存在与在各种肿瘤形式的耐药性和对放疗的抗性有关，并且对于肿瘤的发展是必不可少的。
[0007]攻击(hit)HK2可能是一种优秀的抗肿瘤方法。然而，由于HK2在重要器官(心脏、骨骼肌、肾)中表达的事实，以及HK2酶抑制剂也阻断在所有人体组织中发挥重要功能的己糖激酶家族中其他酶的活性的事实，因此迄今为止，严重副作用的发生使得抑制HK2功能(酶活性)的分子的开发变得不可能。因此，迄今为止作为潜在的抗肿瘤药物治疗研究的HK2抑制剂(例如化合物3
‑
溴丙酮酸盐(3
‑
bromopyruvate))缺乏足够的选择性，引起阻碍其使用或足够功效的副作用，并且因此被证明是无功能的。
[0008]因此，本专利技术的目的是提供一种适用于治疗肿瘤的抗肿瘤治疗，该抗肿瘤治疗选择性地和有效地作用于蛋白HK2，而不抑制其酶活性。
[0009]专利技术概述
[0010]本专利技术涉及一种分离的肽，其作为被创新性地构思并且具有SEQ ID NO:1的序列的抗肿瘤分子发挥作用。
[0011]它是一种命名为ACPP
‑
HK2(靶向己糖激酶2的可活化细胞穿透肽(Activatable Cell Penetrating Peptide targeting HexoKinase 2))的肽，该肽选择性地靶向己糖激酶2或II(或HK2)，HK2是一种在肿瘤细胞中强烈表达的蛋白。与目前的药理学方法相比，创新特性如下：1.ACPP
‑
HK2被设计成仅在肿瘤细胞附近活化；2.活化后，ACPP
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HK2穿透肿瘤细胞，在若干分钟内引起其死亡；3.ACPP
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HK2发挥作用而不阻断靶蛋白生物功能，同时引起其细胞内再分配。
[0012]根据另一方面，本专利技术涉及具有SEQ ID NO:1的序列或其序列变体的分离的肽作为药物的用途。
[0013]根据又另一方面，本专利技术涉及具有SEQ ID NO:1的序列或其序列变体的分离的肽在肿瘤治疗中的用途。
[0014]其整体特性使得ACPP
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HK2成为潜在的广谱、高选择性、无副作用的抗肿瘤药物。在体外、在动物模型中和在原代肿瘤细胞上进行的实验证实了ACPP
‑
HK2的这些特性。
[0015]在另外的方面，本专利技术涉及一种药物组合物，该药物组合物包含具有SEQ ID NO:1的序列或其序列变体的分离的肽以及药学上可接受的媒介物。
[0016]附图描述
[0017]现在将详细地并参考附图描述本专利技术，在附图中：
[0018]图1报告了示出如在实施例2中所述的肿瘤治疗后肿瘤体积评价结果的图。
[0019]图2报告了在用具有SEQ ID NO:1的序列的分离的肽进行全身治疗后通过监测肿瘤生长获得的图。
[0020]图3报告了在用具有SEQ ID NO:1的序列的分离的肽进行全身治疗后通过监测肿瘤生长获得的图。
[0021]图4示出了在用具有SEQ ID NO:1的序列的分离的肽进行全身治疗后通过监测肿瘤生长获得的图。
[0022]图5报告了来自用对照肽ACPP
‑
SCR或用具有SEQ ID NO:1的序列的分离的肽处理的小鼠的组织样品的实例。
[0023]图6报告了如在实施例4中所述的离体测试数据。
[0024]图6A示出了用ACPP
‑
HK2(SEQ ID NO:1)的活性部分(命名为pepHK2)和用pepSCR(实验对照)处理从患者活检新鲜分离的B
‑
CLL细胞。
[0025]图6B示出了由不同浓度的pepHK2诱导的B
‑
CLL细胞死亡(剂量/响应分析)。
[0026]图7报告了用pepHK2处理后患者来源的细胞(B
‑
CLL)和来自健康供体的B淋巴细胞(CD19
+
)之间的比较。
[0027]图7A报告了在较长时间段内的实验数据，
[0028]图7B报告了在较高pepHK2浓度在较短时间段内的实验数据。
[0029]图8示出了实施例6中的实验数据，其中展示了来源于不同人类肿瘤的各种细胞模型在用pepSCR和pepHK2处理后的存活力。
[0030]图9报告了在各种时间段和浓度用肽ACPP
‑
HK2(SEQ ID NO:1)处理的肿瘤细胞和那些用肽ACPP
‑
HK2 II(SEQ ID NO:8)、ACPP
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HK2 III(SEQ ID NO:9)和ACPP
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HK2 IV(SEQ ID NO:10)处理的肿瘤细胞之间的细胞存活力比较，如实施例6所述。
[0031]图9A报告了用不同的分离的肽处理后18小时的细胞存活力。
[0032]图9B报告了用不同的分离的肽处理后36小时的细胞存活力。
[0033]图10示出了如实施例7中所述的酶活性测试。
[0034]图10A报告了在存在或不存在肽ACPP
‑
HK2的活性形式(pepHK2)的情况下测量的人类HK2的酶活性。
[0035]图10B示出了在细胞提取物中，在存在或不存在pepHK2两种情况下，HK2、HK1(体内普遍存在的同功酶)的酶活性。
[0036]图11报告了通过皮下注射CT26细胞诱导的肿瘤样品的免疫组化分析的实例，如实施例2所述。
NO:1)的序列具有90％的序列同一性，4/40氨基酸不同。
[0055]SEQ ID NO:9对应于肽ACPP
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HK2的变体ACPP
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HK2 III，具有氨基酸序列：S本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种分离的肽，所述分离的肽具有与SEQ ID NO:1的序列具有至少80％同一性的序列。2.根据权利要求1所述的分离的肽，所述分离的肽具有与SEQ ID NO:1的序列具有至少90％同一性的序列。3.根据权利要求1所述的分离的肽，所述分离的肽具有与SEQ ID NO:1的序列具有至少95％同一性的序列。4.根据权利要求1至3中任一项所述的分离的肽，所述分离的肽具有选自由SEQ ID NO:1、SEQ ID NO:3、SEQ ID NO:4、SEQ ID NO:5、SEQ ID NO:6、SEQ ID NO:7、SEQ ID NO:8、SEQ ID NO:9或SEQ ID NO:10组成的组的序列。5.根据权利要求1至4中任一项所述的分离的肽，所述分离的肽具有SEQ ID NO:1的序列。6.根据权利要求1至5中任一项所述的肽，所述肽用于作为药物使用。7.根...

【专利技术属性】
技术研发人员：安德烈，
申请(专利权)人：帕多瓦大学，
类型：发明
国别省市：