桃核承气汤特征图谱的构建方法技术

本发明专利技术公开了一种桃核承气汤特征图谱的构建方法，其包括：制备没食子酸对照品、儿茶素对照品、苦杏仁苷对照品、表儿茶素没食子酸酯对照品、甘草苷对照品、芹糖甘草苷对照品、桂皮醛对照品、肉桂酸对照品、大黄酚

【技术实现步骤摘要】
桃核承气汤特征图谱的构建方法


[0001]本专利技术涉及中药质量分析检测
，尤其涉及一种桃核承气汤特征图谱的构建方法。

技术介绍

[0002]桃核承气汤出自汉代张仲景的《伤寒论》：“太阳病不解，热结膀胱，其人如狂，血自下，下者愈。其外不解者，尚未可攻，当先解其外；外解已，但少腹急结者，乃可攻之，宜桃核承气汤。桃仁五十个(去皮尖)，大黄四两，桂枝二两(去皮)，甘草二两(炙)，芒硝二两。上五味，以水七升，煮取二升半，去滓，内芒硝，更上火，微沸下火，先食温服五合，日三服。”桃核承气汤在临床上的应用十分广泛，不仅局限于太阳蓄血证的少腹胀满疼痛，大便色黑，小便自利，谵语发狂等症状，也广泛运用于脑外伤后遗症，妇科的痛经、闭经，以及肾系病证的癃闭，前列腺炎或者前列腺增生导致的癃闭等。桃核承气汤目前在国内尚未开发成为中成药，但在日本已被开发为汉方制剂供临床广泛使用，作为汉方药在药店销售排名前列，该方在我国具有很强的开发价值。
[0003]目前，对桃核承气汤的研究主要集中在药理学的研究方面，对其汤剂的物质基础、提取工艺、多指标成分含量测定及特征图谱研究较少，缺少系统性。且对于如何衡量大生产制剂与传统汤剂质量的一致性也研究较少。

技术实现思路

[0004]本专利技术所要解决的技术问题在于，提供一种桃核承气汤特征图谱的构建方法，该方法重现性良好，准确可靠，可为桃核承气汤大生产质量控制提供数据基础，保证桃核承气汤产品质量的稳定性和可控性。
[0005]为了解决上述技术问题，本专利技术提供了一种桃核承气汤特征图谱的构建方法，其包括：
[0006](1)分别取没食子酸对照品、儿茶素对照品、苦杏仁苷对照品、表儿茶素没食子酸酯对照品、甘草苷对照品、芹糖甘草苷对照品、桂皮醛对照品、肉桂酸对照品、大黄酚
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葡萄糖苷对照品、大黄酚
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葡萄糖苷对照品、大黄素
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葡萄糖苷对照品、大黄酸对照品、甘草酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对照品适量，加入溶剂溶解或提取，制得对照品溶液；
[0007](2)取桃核承气汤，加提取溶剂提取，制得供试品溶液；
[0008](3)取预设量的对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇为流动相A，磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱，建立桃核承气汤的特征图谱。
[0009]作为上述技术方案的改进，所述梯度洗脱按下述程序进行：
[0010]0～5min，流动相A从1％
→
8％，流动相B从99％
→
92％；
[0011]5～21min，流动相A从8％
→
23％，流动相B从92％
→
77％；
[0012]21～35min，流动相A从23％
→
31％，流动相B从77％
→
69％；
[0013]35～45min，流动相A从31％
→
55％，流动相B从69％
→
45％；
[0014]45～51min，流动相A从55％
→
65％，流动相B从45％
→
35％；
[0015]51～56min，流动相A从65％
→
83％，流动相B从35％
→
17％；
[0016]56～65min，流动相A从83％
→
100％，流动相B从17％
→
0％。
[0017]作为上述技术方案的改进，步骤(3)中，分别吸取对照品溶液和供试品溶液各1～3μL，注入液相色谱仪进行检测，其中，所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，其柱长为150mm，内径为2.1mm，粒径为1.6μm，柱温为30～38℃；所述液相色谱仪以甲醇为流动相A，以0.15％～0.25％的磷酸水溶液为流动相B，流速为0.25～0.36mL/min，检测波长为220～290nm。
[0018]作为上述技术方案的改进，步骤(3)中，分别吸取对照品溶液和供试品溶液各1μL，注入液相色谱仪进行检测，其中，所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，其柱长为150mm，内径为2.1mm，粒径为1.6μm，柱温为38℃；所述液相色谱仪以甲醇为流动相A，以0.2％的磷酸水溶液为流动相B，流速为0.3mL/min。
[0019]作为上述技术方案的改进，步骤(3)中，检测时间为0～30分钟时，检测波长为220nm；检测时间为30～45分钟时，检测波长为290nm，检测时间为45～65分钟时，检测波长为260nm。
[0020]作为上述技术方案的改进，步骤(1)中，分别取没食子酸对照品、儿茶素对照品、苦杏仁苷对照品、表儿茶素没食子酸酯对照品、甘草苷对照品、芹糖甘草苷对照品、桂皮醛对照品、肉桂酸对照品、大黄酚
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葡萄糖苷对照品、大黄酚
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葡萄糖苷对照品、大黄素
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葡萄糖苷对照品、大黄酸对照品、甘草酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对照品适量，分别加甲醇制成每1ml含没食子酸15μg、儿茶素100μg、苦杏仁苷30μg、表儿茶素没食子酸酯50μg、甘草苷30μg、芹糖甘草苷70μg、桂皮醛10μg、肉桂酸10μg、大黄酚
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葡萄糖苷30μg、大黄酚
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葡萄糖苷40μg、大黄素
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葡萄糖苷50μg、大黄酸20μg、甘草酸100μg、大黄素10μg、大黄酚10μg的溶液，即得对照品溶液。
[0021]作为上述技术方案的改进，步骤(2)中，所述提取溶剂为20～100％甲醇，提取时间为10～30min，提取方式为超声提取。
[0022]作为上述技术方案的改进，步骤(2)包括：
[0023]取桃核承气汤冻干粉0.15～0.25g，精密称定，置具塞锥形瓶中，加入70％甲醇10mL，称定重量，分别取出，采用功率为200～300W，频率为40～50kHz的超声波处理20min，取出，放冷，再称定重量，用70％甲醇补足减失的重量，滤过，取续滤液，即得供试品溶液。
[0024]作为上述技术方案的改进，所述桃核承气汤的特征图谱包括15个特征峰；其中，峰1为没食子酸峰，峰2为儿茶素峰，峰3为苦杏仁苷峰，峰4为表儿茶素没食子酸酯峰，峰5为甘草苷峰，峰6为芹糖甘草苷峰，峰7为桂皮醛峰，峰8为肉桂酸峰，峰9为大黄酚
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葡萄糖苷峰，峰10为大黄酚
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葡萄糖苷峰，峰11为大黄素
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种桃核承气汤特征图谱的构建方法，其特征在于，包括：(1)分别取没食子酸对照品、儿茶素对照品、苦杏仁苷对照品、表儿茶素没食子酸酯对照品、甘草苷对照品、芹糖甘草苷对照品、桂皮醛对照品、肉桂酸对照品、大黄酚
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葡萄糖苷对照品、大黄酚
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葡萄糖苷对照品、大黄素
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葡萄糖苷对照品、大黄酸对照品、甘草酸对照品、大黄素对照品、大黄酚对照品适量，加入溶剂溶解或提取，制得对照品溶液；(2)取桃核承气汤，加提取溶剂提取，制得供试品溶液；(3)取预设量的对照品溶液和供试品溶液，注入液相色谱仪，所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以甲醇为流动相A，磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱，建立桃核承气汤的特征图谱。2.如权利要求1所述的桃核承气汤特征图谱的构建方法，其特征在于，所述梯度洗脱按下述程序进行：0～5min，流动相A从1％
→
8％，流动相B从99％
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92％；5～21min，流动相A从8％
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23％，流动相B从92％
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77％；21～35min，流动相A从23％
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31％，流动相B从77％
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69％；35～45min，流动相A从31％
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55％，流动相B从69％
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45％；45～51min，流动相A从55％
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65％，流动相B从45％
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35％；51～56min，流动相A从65％
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83％，流动相B从35％
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17％；56～65min，流动相A从83％
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100％，流动相B从17％
→
0％。3.如权利要求1或2所述的桃核承气汤特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤(3)中，分别吸取对照品溶液和供试品溶液各1～3μL，注入液相色谱仪进行检测，其中，所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，其柱长为150mm，内径为2.1mm，粒径为1.6μm，柱温为30～38℃；所述液相色谱仪以甲醇为流动相A，以0.15％～0.25％的磷酸水溶液为流动相B，流速为0.25～0.36mL/min，检测波长为220～290nm。4.如权利要求1或2所述的桃核承气汤特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤(3)中，分别吸取对照品溶液和供试品溶液各1μL，注入液相色谱仪进行检测，其中，所述液相色谱仪以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，其柱长为150mm，内径为2.1mm，粒径为1.6μm，柱温为38℃；所述液相色谱仪以甲醇为流动相A，以0.2％的磷酸水溶液为流动相B，流速为0.3mL/min。5.如权利要求1所述的桃核承气汤特征图谱的构建方法，其特征在于，步骤(3)中，检测时间为0～30分钟时，检测波长为220nm；检测时间为30～45分钟时，检测波长为290nm，检测时间为45～65分钟时，检测波长为260nm。6.如权利要求1所述的桃核承气汤特...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏梅，孙冬梅，程学仁，陈向东，朱德全，蔡盛康，李素梅，毕晓黎，张紫菱，
申请(专利权)人：广东一方制药有限公司，
类型：发明
国别省市：