一种猪BRS3基因CDs序列全长分段克隆的方法技术

本发明专利技术属于生物技术领域，具体涉及一种猪BRS3基因CDs序列全长分段克隆的方法，本发明专利技术将BRS3基因进行分段，通过分段克隆和基因拼接法获得猪BRS3基因序列，弥补了BRS3基因在猪上研究的空白。本发明专利技术又通过以克隆的各片段混合DNA为模板，成功扩增获得猪BRS3全长CDs序列片段，并构建到克隆载体上，为BRS3基因的过表达和干扰序列筛选等以BRS3基因CDs序列为基础的研究与应用提供一种有效的方法。研究与应用提供一种有效的方法。研究与应用提供一种有效的方法。

【技术实现步骤摘要】
一种猪BRS3基因CDs序列全长分段克隆的方法


[0001]本专利技术属于生物
，具体涉及一种猪BRS3基因CDs序列全长分段克隆的方法。

技术介绍

[0002]蛙皮素(Bombesin，Bn)最初是从欧洲青蛙皮肤分离的酰胺化十四肽。随后，在哺乳动物中人们发现了胃泌素释放肽(Gastrin
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releasing peptide，GRP)和神经介素B(Neuromedin B，NMB)两个蛙皮素样肽。哺乳动物蛙皮素受体属于G
‑
蛋白偶联受体，包括NMB受体(NMBR)、GRP受体(GRPR)和蛙皮素受体亚型3(bombesin receptor subtype 3，BRS3)。由于BRS3没有发现其内源性配体，又称为孤儿受体。虽然，还未发现BRS3的内源性配体，但是研究表明BRS3具有重要的生理功能，包括：影响肿瘤生长/分化，调节能量平衡和糖代谢，通过摄食调节饱腹感，调节体重、血压和心率，调节激素分泌等。
[0003]自BRS3发现以来，国内外研究者对BRS3的研究主要集中在人、大小鼠上，发现BR本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种猪BRS3基因，其特征在于，所述基因CDs序列如SEQ ID NO：4所示。2.根据权利要求1所述的猪BRS3基因CDs序列全长分段克隆的方法，其特征在于，将BRS3基因进行分段，通过分段克隆和基因拼接法获得猪BRS3基因序列。3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，将BRS3基因分为三段序列，分别为fragment 1、fragment 2和fragment 3；fragment 1、fragment 2和fragment 3彼此部分重叠，三段序列基因拼接后能够获得包含完整CDs序列的猪BRS3基因；fragment 1序列的5
’
端包括CDs序列的5
’
端，fragment 1序列的3
’
端和fragment 2序列的5
’
端部分序列重合，fragment 2序列的3
’
端和fragment 3序列的5
’
端部分序列重合，fragment 3序列的3
’
端包括CDs序列的3
’
端。4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，fragment 1、fragment 2和fragment 3的序列分别如SEQ ID NO：1、SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3所示。5.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，fragment 1、fragment 2和fragment 3PCR扩增引物如下：fragment 1引物：F1：ATGTCTTGAATTTGCTTGCCAT；R1：TTACAGCCAATTCTTCCGAAC；...

【专利技术属性】
技术研发人员：张莹，马志禹，张金龙，陈风雷，马卓，孙月，王小雨，
申请(专利权)人：扬州大学，
类型：发明
国别省市：