一种快速测定大米中4种农药残留量的方法技术

本发明专利技术公开了一种快速测定大米中4种农药残留量的方法，将大米样品采用有机溶剂进行前处理后，加入萃取盐包，使用QuEChERS方法净化样液，取制备样液应用超高效液相色谱

【技术实现步骤摘要】
一种快速测定大米中4种农药残留量的方法


[0001]本专利技术涉及一种快速测定大米中4种农药残留量的方法，属于农药残留检测


技术介绍

[0002]中国大米产量居全球首位，是人们生活的基本食品，其安全性与人们的生活息息相关。为提高水稻的产量，化学农药被大量用于农作物中，这些农药具有广谱、高效、使用方便、半衰期短等优点，被广泛应用于水稻种植中，过量使用农药不仅造成环境污染，同时对人类的生命产生危害。长期食用农残超标的大米会在人体内大量堆积，引发各种慢性疾病，尤其对神经元会造成严重损害，导致机体各功能下降，残留农药中的化学物质可能促使组织细胞癌变。因此，农药残留的问题，已引起人们的高度重视，建立一种快速、简便、高效测定大米中多种农药残留量的方法，对该行业的安全监管意义十分重大。
[0003]目前，其他国家及国际组织对大米中有机磷、有机氯、拟除虫菊酯类、除草剂类等农药的残留都有严格限量。国内已有GB/T 5009.20—2003《食品中有机磷农药残留量的测定》、GB 23200.9—2016《粮谷中475种农药及相关化学品残留量的测定气相色谱
‑
质谱法》等标准。由于大米中含有大量蛋白质、淀粉等成分，分析时需要多步骤的净化过程，处理不干净会对仪器产生影响。而现行有效的国标方法前处理步骤较为烦琐，提取试剂为剧毒试剂，会对检测人员造成伤害，同时净化效果不太理想，且氮吹时间长，对精密仪器的色谱柱、检测器等均会造成一定程度的损害，增加了仪器的使用成本及维护成本。
[0004]QuEChERS(Quick，Easy，Cheap，Effective，Rugged，Safe)，是由美国农业部Anastassiads教授等于2003年开发的一种样品快速前处理技术，近年来被广泛应用于农产品的质量检测中，是一种创新型多农药残留分析前处理产品。相比于传统方法，该方法具有适用广、操作简便、溶剂使用量小、回收率高等优势。
[0005]氧乐果、多菌灵、噻虫嗪、氯吡脲这4种农药是水稻种植中常用的农药且残留时间较长。现在的方法可以同时测定4种农药，但前处理方法会用到甲苯，甲苯是一种剧毒试剂，会对检测人员产生严重危害，同时前处理步骤复杂，回收率低，造成检测效率较低。采用QuEChERS技术测定大米中4种农药的超高效液相色谱
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串联质谱(UPLC
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MS/MS)法还尚未见报道。因此建立一种准确、快捷、简便的方法成为测定大米中农残的一个迫切要求。

技术实现思路

[0006]本专利技术的目的在于提供一种能够利用超高效液相色谱
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串联质谱法(UPLC
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MS/MS)测定4种农药残留的方法，以快速、简便、准确地测定大米中4种农药的残留量。
[0007]本专利技术的目的可通过以下技术方案实现：
[0008]一种快速测定大米中4种农药残留量的方法，包括如下步骤：
[0009](1)100.0μg/mL标准储备溶液配制：分别准确称取一定量的农药标准物质，用甲醇配制成浓度为10.0μg/mL的标准储备溶液，
‑
18℃保存；
[0010](2)10.0μg/mL标准中间液配制：分别准确吸取适量的各类农药标准储备溶液，用甲醇配制成浓度为1.0μg/mL的混合标准中间溶液，
‑
18℃保存；
[0011](3)标准工作液配制：吸取适量的混合标准中间溶液，用空白大米样品基质溶液配制成浓度为5、10、20、50、100、200ng/mL的混合标准工作液，0～4℃冰箱中保存，临用现配；
[0012](4)样品处理：
[0013]提取：称取试样10.0g于50mL离心管中，加入20mL乙腈，浸泡30min后，均质提取5min，振荡提取15min，静置30min，于8000r/min离心5min，吸取上清液，残渣再用10mL乙腈重复提取1次，合并上清液，混匀；将试剂盐包加入萃取管中涡旋混匀，8000r/min离心5min，上清液待净化。
[0014]QuEChERS净化：取5mL上述混合提取液加入1.5g无水硫酸镁、0.4g乙二胺
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N
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丙基硅烷(PSA)、0.4g十八烷基硅胶(C
18
)、0.20g石墨化炭黑(GCB)净化，涡旋混匀后8000r/min离心5min，取2mL上清液40℃旋转蒸发至1mL，用小流速氮气吹至近干，加入2mL初始流动相，涡旋混匀，过0.22μm微孔滤膜，待测；
[0015](5)取制备样液进行超高效液相色谱
‑
串联质谱仪检测，按照外标曲线法计算样液中4种农药残留的含量，即得大米中4种农药，残留量按以下公式计算：
[0016][0017]式中R
‑
样本中4种农药含量(mg/kg)；
[0018]C
–
测定溶液浓度(ng/mL)；
[0019]C0–
空白基质溶液浓度(ng/mL)；
[0020]V
‑
样本溶液提取溶液体积(mL)；
[0021]m
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称样量(g)。
[0022]所述四种农药是氧乐果、多菌灵、噻虫嗪和氯吡脲。
[0023]色谱条件为：色谱柱：ZORBAX Eclipse C18(100mm
×
2.1mm，3.5μm)；流速：0.30mL/min；柱温：40℃；进样量：5μL；流动相：A：0.1％甲酸水，B：乙腈；梯度洗脱，具体参数见表1过0.22μm滤膜，超声脱气；
[0024]表1洗脱梯度
[0025]时间/minA：0.1甲酸水/％B：乙腈/％流速/(mL/min)0.009640.303.009640.305.0030700.308.0010900.309.001990.3010.001990.3010.109640.3013.009640.30
[0026]质谱条件为：离子源：电喷雾离子源；扫描方式：正离子扫描；检测方式：多反应监测；离子源温度：325℃；气体流速：5L/min；喷嘴电压：45psi；鞘气温度：375℃；鞘气流速：11L/min；4种农药定性离子对、定量离子对、碎裂电压及碰撞能量等参数参见表2；
[0027]表2质谱参数
[0028][0029][0030]定性定量方法为：以4种农药的相对保留时间和各农药的监测离子对的丰度比为定性依据，各农药的保留时间见表2；用外标法定量，为减少基质对定量测定的影响，需用空白样品提取液来配制所使用的系列基质标准工作液，用基质标准工作液分别进样绘制标准曲线，保证所测样品中农药及相关化学品的响应值均在仪器的线性范围内，以各农药的峰面积或峰高计算其在样品中的残留量，带“*”的离子为定量离子。
[0031]优选的，所述试剂盐包由2g硫酸镁、0.5g氯化钠、0.5g二水合柠檬酸三钠、0.25g半水柠檬酸氢二钠组成。
[0032]本本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种快速测定大米中4种农药残留量的方法，其特征在于，包括如下步骤：(1)100.0μg/mL标准储备溶液配制：分别准确称取一定量的农药标准物质，用甲醇配制成浓度为10.0μg/mL的标准储备溶液，
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18℃保存；(2)10.0μg/mL标准中间液配制：分别准确吸取适量的各类农药标准储备溶液，用甲醇配制成浓度为1.0μg/mL的混合标准中间溶液，
‑
18℃保存；(3)标准工作液配制：吸取适量的混合标准中间溶液，用空白大米样品基质溶液配制成浓度为5、10、20、50、100、200ng/mL的混合标准工作液，0～4℃冰箱中保存，临用现配；(4)样品处理：提取：称取试样10.0g于50mL离心管中，加入20mL乙腈，均质提取2min，振荡提取，于8000r/min离心5min，吸取上清液，残渣再用10mL乙腈重复提取1次，合并上清液，混匀；将试剂盐包加入萃取管中涡旋混匀，8000r/min离心5min，上清液待净化；QuEChERS净化：取5mL上述上清液加入1.5g无水硫酸镁、0.4g乙二胺
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N
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丙基硅烷、0.4g十八烷基硅胶、0.20g石墨化炭黑净化，涡旋混匀后8000r/min离心5min，取2mL上清液40℃旋转蒸发至1mL，用小流速氮气吹至近干，加入2mL初始流动相，涡旋混匀，过0.22μm微孔滤膜，得样液待测；(5)取制备样液进行超高效液相色谱
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串联质谱仪检测，按照外标曲线法计算样液中4种农药残留的含量，即得大米中4种农药，残留量按以下公式计算：式中R
‑
样本中4种农药含量(mg/kg)；C
–
测定溶液浓度(ng/mL)；C0–
空白基质溶液浓度(ng/mL)；V
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样本溶液提取溶液体积(mL)；m
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称样量(g)。2.根据权利要求1所述一种快速测定大米中4种农药残留量的方法...

【专利技术属性】
技术研发人员：李莹，郭文丽，汤丽华，王欣，张艾蕾，何秋菊，
申请(专利权)人：天津市食品安全检测技术研究院，
类型：发明
国别省市：