一种他克莫司软膏异构体测定的前处理方法技术

本发明专利技术公开了一种他克莫司软膏异构体测定的前处理方法，根据他克莫司软膏本身的理化性质，在他克莫司软膏中加入正己烷水浴溶解，然后加入乙腈或甲醇，静置分层，冷冻，取乙腈层或甲醇层，作为供试品溶液。然后按照高效液相色谱法进行测定他克莫司异构体的含量。所述前处理方法操作简单，使得他克莫司异构体易于从他克莫司软膏中提取出来，进一步满足高效液相色谱法的测定，为他克莫司软膏的质量控制提供了研究。了研究。了研究。

【技术实现步骤摘要】
USP 40中所述色谱条件进行检测。
[0011]他克莫司易发生异构化成为异构体I和异构体Ⅱ，为了保证药品质量的均一性，需要将他克莫司异构体含量的控制订入他克莫司软膏的质量标准中，异构体I和异构体Ⅱ的峰面积之和不得超过主峰面积的8.0％。
[0012]本专利技术所述他克莫司软膏异构体测定的前处理方法，操作简单，使得他克莫司异构体易于从他克莫司软膏中提取出来，进一步满足高效液相色谱法的测定，能更好地监测他克莫司软膏异构体的含量，为他克莫司软膏的质量控制提供了研究。
附图说明
[0013]图1是参比制剂他克莫司软膏异构体的HPLC谱图；
[0014]图2是本专利技术实施例1所述他克莫司软膏异构体的HPLC谱图；
[0015]图3是本专利技术实施例2所述他克莫司软膏异构体的HPLC谱图；
[0016]图4是本专利技术实施例3所述他克莫司软膏异构体的HPLC谱图；
[0017]图5是本专利技术实施例1所述供试品溶液放置0h时他克莫司软膏异构体的HPLC谱图；
[0018]图6是本专利技术实施例1所述供试品溶液放置1h时他克莫司软膏异构体的HPLC谱图；
[0019]图7是本专利技术实施例1所述供试品溶液放置2h时他克莫司软膏异构体的HPLC谱图；
[0020]图8是本专利技术实施例1所述供试品溶液放置3h时他克莫司软膏异构体的HPLC谱图。
具体实施方式
[0021]本专利技术所述他克莫司软膏中他克莫司的含量为0.1％w/w，基质为碳酸丙烯酯、白凡士林、矿物油、白蜡、石蜡。自制他克莫司软膏中所用的他克莫司、碳酸丙烯酯、白凡士林、矿物油、白蜡、石蜡均可以在CDE官方网站上公布的厂家购买得到。所用参比制剂是安斯泰来制药(中国)有限公司生产的他克莫司软膏。
[0022]本专利技术所述他克莫司软膏的配方：他克莫司0.1％w/w、碳酸丙烯酯0.4g、白凡士林10g、矿物油1.5g、白蜡1.5g、石蜡1.5g。
[0023]实施例1
[0024]他克莫司软膏异构体含量的测定：
[0025](1)他克莫司软膏的前处理
[0026]取本品约2g，置10mL具塞玻璃管中，加入正己烷4.0mL，60℃水浴使溶解，精密量取乙腈4.0mL，置同一具塞玻璃管中，静置分层，置冷冻冰箱
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20℃放置20分钟，取乙腈层，作为供试品溶液；
[0027](2)他克莫司软膏异构体含量的测定
[0028]精密量取供试品溶液20μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，各异构体的峰面积之和不得过主峰面积的8.0％。
[0029]所用色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以6mmol/L的磷酸为溶液A，以乙腈
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叔丁基甲基醚(81︰19)为溶液B，以溶液A
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溶液B(体积比4︰1)为流动相A，以溶液A
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溶液B(体积比1︰4)为流动相B；检测波长为220nm；流速为每分钟1.5mL；柱温为60℃；按照表1进行梯度洗脱。
[0030]表1梯度洗脱条件
[0031]时间(min)流动相A(％)流动相B(％)07228307228531585547228607228
[0032]实施例2
[0033]他克莫司软膏异构体含量的测定：
[0034](1)他克莫司软膏的前处理
[0035]取本品约2g，置10mL具塞玻璃管中，加入正己烷4.0mL，65℃水浴使溶解，精密量取甲醇4.0mL，置同一具塞玻璃管中，静置分层，置冷冻冰箱
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18℃放置25分钟，取甲醇层，作为供试品溶液；
[0036](2)他克莫司软膏异构体含量的测定
[0037]精密量取供试品溶液20μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，各异构体的峰面积之和不得过主峰面积的8.0％。
[0038]所用色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以6mmol/L的磷酸为溶液A，以乙腈
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叔丁基甲基醚(81︰19)为溶液B，以溶液A
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溶液B(体积比4︰1)为流动相A，以溶液A
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溶液B(体积比1︰4)为流动相B；检测波长为220nm；流速为每分钟1.5mL；柱温为60℃；按照表1进行梯度洗脱。
[0039]实施例3
[0040]他克莫司软膏异构体含量的测定：
[0041](1)他克莫司软膏的前处理
[0042]取本品约2g，置10mL具塞玻璃管中，加入正己烷4.0mL，65℃水浴使溶解，精密量取乙腈4.0mL，置同一具塞玻璃管中，静置分层，置冷冻冰箱
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22℃放置22分钟，取乙腈层，作为供试品溶液；
[0043](2)他克莫司软膏异构体含量的测定
[0044]精密量取供试品溶液20μL，注入液相色谱仪，记录色谱图，各异构体的峰面积之和不得过主峰面积的8.0％。
[0045]所用色谱条件：用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以6mmol/L的磷酸为溶液A，以乙腈
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叔丁基甲基醚(81︰19)为溶液B，以溶液A
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溶液B(体积比4︰1)为流动相A，以溶液A
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溶液B(体积比1︰4)为流动相B；检测波长为220nm；流速为每分钟1.5mL；柱温为60℃；按照表1进行梯度洗脱。
[0046]实施例1所述供试品溶液的稳定性试验：
[0047]将实施例1步骤(1)制备好供试品溶液在室温下放置0h、1h、2h、3h后按照步骤(2)分别进样，考察所述供试品溶液的稳定性见图5
‑
图8的HPLC谱图，其考察结果见表2，计算其峰面积与主峰面积的和，试验结果表明供试品溶液室温放置3小时，他克莫司软膏中异构体的含量测定结果与0小时比较变化不大。
[0048]表2实施例1所述供试品溶液稳定性考察结果
[0049]规格(0.1％)0h峰面积(V)1h峰面积(V)2h峰面积(V)3h峰面积(V)
异构体II73833752018744986659主峰1886158192039622136862211969含量％3.913.923.953.92
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【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种他克莫司软膏异构体测定的前处理方法，其特征在于：他克莫司软膏中加入正己烷水浴溶解，然后加入乙腈或甲醇，静置分层，冷冻，取乙腈层或甲醇层，作为供试品溶液。2.根据权利要求1所述他克莫司软膏异构体测定的前处理方法，其特征在于：所述正己烷与乙腈或甲醇的体积比为1：1。3.根据权利要求2所述他克莫司软膏异构体测定的前处理方法，其特征在于：所述水浴温度为60℃
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65℃。4.根据权利要求3所述他克莫司软膏异构体测定的前处理方法，其特征在于：所述冷冻条件：冷冻温度零下18℃

【专利技术属性】
技术研发人员：曹慧敏，朱召贞，王守彬，吕敏，刘宗银，
申请(专利权)人：山东冠秀生物制药有限公司，
类型：发明
国别省市：