控制生物功能的新成分制造技术

本发明专利技术的目的是制备一种新的食品来源的外泌体组合物和提供含有新的有效成分的癌症抑制剂或组织弹性降低预防剂或弹性改善剂。对纯化工序深入研究的结果，本发明专利技术的发明专利技术人发现可以通过独特的制造方法从酒母和醪中提取外泌体。本发明专利技术人发现从酒母和醪中回收的外泌体具有抑制癌细胞增殖的能力、促进颗粒酶量增加的能力、促进胶原蛋白和弹力蛋白表达的能力。由此，本发明专利技术的发明专利技术人提供了一种含有来自日本酒的酒母和醪的外泌体的用于治疗或预防癌症的组合物、以及组织弹性降低预防剂或弹性改善剂。剂。剂。

【技术实现步骤摘要】
【国外来华专利技术】控制生物功能的新成分
[0001]相关申请的相互参照
[0002]本国际申请主张基于2019年2月1日在日本专利局所申请的日本专利申请第2019
‑
17296号的优先权，并且日本专利申请第2019
‑
17296号的全部内容通过参照被引入本国际申请。


[0003]本专利技术涉及利用来自酵母的外泌体(Exosome)的用于医疗和化妆的组合物等。

技术介绍

[0004]据报道，益生菌(Probiotic)乳酸菌对代谢综合征具有预防效果，例如抑制脂肪积累的效果和改善胰岛素抵抗的效果。其机制被认为是来自口服摄入并从肠道所吸收的乳酸菌的外泌体作用于远离肠道的组织，如脂肪组织和骨骼肌，并有助于预防代谢综合征。这些效果极有可能是由广泛众多对人体有益的细菌和酵母、以及口服摄取的许多蔬菜和水果所释放的，对其有用性的期待在增长。

技术实现思路

[0005]专利技术所要解决的技术问题
[0006]本专利技术的专利技术人认为日本酒生产之源的酒母是大量酵母的纯培养物，因此可能是外泌体的宝库，并且首次关注到来自作为日本酒制造过程之源的酒母的培养液中存在的外泌体。另外，本专利技术的专利技术人首次关注到与日本酒同样含有酵母的味噌、尤其是1年以上熟化的味噌所含有的外泌体。因此，本专利技术的一个目的是制备新型食品来源的外泌体组合物。另一方面，本专利技术的一个目的在于提供一种含有新型有效成分的癌症抑制剂或组织弹性降低预防剂或弹性改善剂。
[0007]用于解决技术问题的技术方案
[0008]本专利技术的专利技术人对其纯化工序深入研究的结果，发现可以通过独特的制造方法提取外泌体。本专利技术的专利技术人使用从酒母和醪(未过滤的酒，unrefined sake)中回收的外泌体研究了免疫细胞中细胞内颗粒酶(granzyme)量的变化，发现了增加的情况。关于细胞因子(cytokine)的分泌没有发现变化，另一方面，关于作为成纤维细胞(fibroblast)老化的指标的β
‑
半乳糖苷酶(β
‑
galactosidase)染色没有发现差异。作为另一个老化的指标，评价老化成纤维细胞中胶原酶(collagenase)的表达和弹力蛋白(Elastin)的表达，结果确认了胶原蛋白(collagen)和弹性蛋白的表达量增加。由此，本专利技术的专利技术人首次发现来自日本酒的酒母和醪的外泌体具有预防组织弹性降低和提高弹性的效果。
[0009]此外，本专利技术的专利技术人研究了添加有从味噌回收的外泌体的老化成纤维细胞中具有抗老化作用的I型胶原蛋白和弹性蛋白的基因量的变化，发现了增加的情况。另外，还发现通过添加从味噌回收的外泌体能提高NK细胞的免疫活性。
[0010]因此，本专利技术涉及以下专利技术：
[0011](1)一种从酵母所提取的外泌体。
[0012](2)根据(1)所述的外泌体，其中，酵母为日本酒的酒母或醪中所含的酵母。
[0013](3)一种从日本酒的酒母或醪中所提取的外泌体。
[0014](4)根据(2)或(3)所述的外泌体，其是通过将日本酒的酒母或醪以10,000～20,000
×
g离心而获得上清液，再以10,000～210,000
×
g超速离心上述上清液所得到的沉淀物。
[0015](5)根据(1)所述的外泌体，其中，酵母为味噌中所含的酵母。
[0016](6)一种从味噌所提取的外泌体。
[0017](7)根据(5)或(6)所述的外泌体，其中，味噌是熟化1年以上的味噌。
[0018](8)根据(7)所述的外泌体，其中，味噌是熟化3年以上的味噌。
[0019](9)一种含有(1)～(8)中任一项所述的外泌体的组合物。
[0020](10)根据(9)所述的组合物，其含有4
×
108个/ml以上或作为蛋白质的量为33ng/ml以上的(1)～(8)中任一项所述的外泌体。
[0021](11)根据(9)所述的组合物，其含有4.7
×
10
11
个/ml以上的(1)～(8)中任一项所述的外泌体。
[0022](12)根据(9)所述的组合物，其含有7.8
×
10
12
个/ml以上的(1)～(8)中任一项所述的外泌体。
[0023](13)一种用于抑制癌细胞增殖的组合物，其为含有上述外泌体作为有效成分的(9)～(12)中任一项所述的组合物。
[0024](14)根据(13)所述的组合物，其中，癌细胞是大肠癌、前列腺癌或乳腺癌。
[0025](15)一种NK细胞的颗粒酶表达促进剂，其为含有上述外泌体作为有效成分的(9)～(12)中任一项所述的组合物。
[0026](16)一种用于治疗或预防癌症的医药组合物，其为含有上述外泌体作为有效成分的(9)～(12)中任一项所述的组合物。
[0027](17)一种胶原蛋白和/或弹力蛋白产生促进剂，其为含有上述外泌体作为有效成分的(9)～(12)中任一项所述的组合物。
[0028](18)一种组织弹性丧失预防剂或组织弹性改善剂，其为含有上述外泌体作为有效成分的(9)～(12)中任一项所述的组合物。
[0029](19)根据(18)所述的组织弹性丧失预防剂或组织弹性改善剂，其中，上述组织是皮肤。
[0030](20)根据(19)所述的组织弹性丧失预防剂或组织弹性改善剂，其用于化妆。
[0031](21)一种(1)～(4)所述的外泌体的制造方法，包括：
[0032](a)将日本酒的酒母或醪以10,000～20,000
×
g离心的步骤；
[0033](b)将通过上述(a)所得到的上清液以10,000～210,000
×
g超速离心的步骤；以及
[0034](c)将沉淀物作为外泌体组分回收的步骤。
[0035](23)一种(5)～(8)所述的外泌体的制造方法，包括：
[0036](a)将味噌以10,000～20,000
×
g离心的步骤；
[0037](b)将通过上述(a)所得到的上清液以10,000～210,000
×
g超速离心的步骤；以及
[0038](c)将沉淀物作为外泌体组分回收的步骤。
[0039]专利技术效果
[0040]本专利技术成功地提取了激活免疫系统、抗衰老、维持身体健康的重要成分。通过这种独特的制造方法得到的含有外泌体的有效成分能够应用于日本酒、味噌以及其他饮料、食品、化妆品和医药品等所有形态的用于维持健康的产品。
附图说明：
[0041]图1是显示在4℃下将獭祭的酒母和醪以15,000
×
g离心15分钟的结果的照片。该上清液用于提取外泌体。
[0042]图2是显示使用纳米颗粒分析系统NanoSight(分析条件：Camera Level 14，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
【国外来华专利技术】1.一种从酵母所提取的外泌体。2.根据权利要求1所述的外泌体，其中，酵母为日本酒的酒母或醪中所含的酵母。3.一种从日本酒的酒母或醪中所提取的外泌体。4.根据权利要求2或权利要求3所述的外泌体，其是通过将日本酒的酒母或醪以10,000～20,000
×
g离心而获得上清液，以10,000～210,000
×
g超速离心所述上清液所得到的沉淀物。5.根据权利要求1所述的外泌体，其中，酵母为味噌中所含的酵母。6.一种从味噌所提取的外泌体。7.根据权利要求5或权利要求6所述的外泌体，其中，味噌是熟化1年以上的味噌。8.根据权利要求7所述的外泌体，其中，味噌是熟化3年以上的味噌。9.一种含有权利要求1～8中任一项所述的外泌体的组合物。10.根据权利要求9所述的组合物，其含有4
×
108个/ml以上或作为蛋白质的量为33ng/ml以上的权利要求1～8中任一项所述的外泌体。11.根据权利要求9所述的组合物，其含有4.7
×
10
11
个/ml以上的权利要求1～8中任一项所述的外泌体。12.根据权利要求9所述的组合物，其含有7.8
×
10
12
个/ml以上的权利要求1～8中任一项所述的外泌体。13.一种用于抑制癌细胞增殖的组合物，其为含有所述外泌体作为有效成分的权利要求9～12中任一项所述的组合物。14.根据...

【专利技术属性】
技术研发人员：权利要求书一页说明书一零页附图一三页，
申请(专利权)人：旭酒造公司，
类型：发明
国别省市：