使非豆科作物结瘤固氮及培育菌剂的方法、制剂及应用技术

本发明专利技术提供一种使非豆科作物结瘤固氮及培育菌剂的方法、制剂及应用，通过以下步骤：（1）豆科植物菌土的培养：采集多种豆科植物根瘤及根系土壤，通过好氧发酵，富集、提纯、复壮其中的固氮菌、根瘤菌及内生菌，制成固体菌土；（2）非豆科作物的栽培结瘤：用获得的固体菌土栽培种植接种非豆科作物，经过光合作用和微生物酶等生物转化的作用，促使非豆科作物结出根瘤；（3）非豆科作物专用菌剂的培养：以非豆科作物结瘤的根瘤菌、固氮菌和内生菌为母种，经分类及混合培养，好氧发酵扩大繁殖后，制成对非豆科作物接种施用的菌剂，使非豆科作物结瘤固氮自肥。氮自肥。

【技术实现步骤摘要】
使非豆科作物结瘤固氮及培育菌剂的方法、制剂及应用


[0001]本专利技术属于农业种植和生态环保
，具体涉及一种使非豆科作物结瘤固氮及培育菌剂的方法、制剂及应用。

技术介绍

[0002]近年来，人们普遍发现施用氮肥的量总是达不到原来的产量，氮肥越施越多，效果却越来越差。而且发现氮肥过量使用造成的危害愈发严重，其主要危害突出表现在以下方面：氮肥在转换成氨才能够被作物所吸收的过程中，极易变成氨气挥发到空气中，这些氨气降低了臭氧层阻挡紫外线的作用，引起对生物圈的危害；以氮肥为主的化肥的过量施用造成土壤板结，作物根系吸收养分的能力降低，使氮肥不能被很好利用；氮肥极易水溶流失，氮肥的淋溶流失所导致的水质富养化，成为面源环境污染的最大根源；氮肥的过量施用还造成农作物品质下降，残留增加，危害人类健康。我国农业部2018年已经做出了在三年内实现对化肥农药0增长的决定。少施氮肥而又能使农作物产量增加品质提高，是当前农业种植和生态环境保护都需要急切解决的问题。
[0003]植物生长所需要的氮元素其实已经大量存在于空气中，占空气的五分之四。可对这来之天然的氮元素大部分植物却不能吸收利用。在自然界有些植物就能够利用空气中的氮而天然自肥，这种植物所需氮肥较少或不需施用氮肥。豆科植物就是其中的一大类，如大豆、豆角、花生、苜蓿、紫云英等。这类植物在微生物菌的作用下根系结有根瘤，里面生长大量根瘤菌、固氮菌和内生菌，这些菌群产生的酶类物质可将空气中分子态的氮加以固定转化为能被植物吸收的氨。而非豆科作物就没有这种固氮自肥的功能。
[0004]如何使非豆科作物也能充分利用空气中的氮，从而节省氮肥增产提质。人们发现，种过豆科植物的地，再种非豆科作物就能够节肥增产。比如，种过花生的地再种小麦或种过苜蓿草的地再种玉米，都会获得增产。这是千百年来先辈们流传下来的经验做法。现代科学证明，由于前茬豆科植物根系中的根瘤菌、固氮菌还大量存在于土壤之中，也可以使之后种植的非豆科作物有限地固氮自肥。本专利技术主要根据上述原理创造了能使非豆科作物结瘤固氮自肥的方法和制剂，使非豆科作物不必先经过种植豆科植物轮作，也能够固氮自肥。

技术实现思路

[0005]基于上述原理，本专利技术提供一种使非豆科作物结瘤固氮及培育菌剂的方法、制剂及应用。
[0006]为了达到上述目的，本专利技术技术方案如下：一种使非豆科作物结瘤固氮及培育菌剂的方法，包括以下步骤：（1）豆科植物菌土的培养：采集多种豆科植物根瘤及根系土壤，通过好氧发酵，富集、提纯、复壮其中的固氮菌、根瘤菌及内生菌，制成固体菌土；（2）非豆科作物的栽培结瘤：用步骤（1）中获得的固体菌土栽培种植接种多种非豆科作物，经过光合作用和微生物酶等生物转化的作用，促使非豆科作物结出根瘤；
（3）非豆科作物专用菌剂的培养：以非豆科作物结瘤的根瘤菌、固氮菌和内生菌为母种，经分类及混合培养，好氧发酵扩大繁殖后，制成对非豆科作物接种施用的菌剂。
[0007]进一步的，所述豆科植物用菌土的培养，包括以下步骤：（a）菌种的采集：选择已经生长成熟的8-10种豆科植物，如大豆、豇豆、绿豆、红豆、黑豆、苜蓿、田青、三叶草，把植物根、茎、叶以及根部周围2厘米的土壤挖出，每株约0.5千克左右；（b）固体菌土的第一次发酵：把采集的根、茎、叶、土全部粉碎，与有机质丰富的田园土按照1：1的比例混拌均匀，再加入第一次菌种培养基，充分混匀，用适量清水调节使土料含水率保持在35-45%；发酵条件：ph值在6.5-7.0之间；在自然环境下，堆成条堆，用塑料膜遮盖避光，发酵48小时，堆内温度保持在25-35度；（c）固体菌土的第二次发酵：在第一次发酵好的菌土中加入第二次菌种培养基，充分混匀；发酵条件：ph值在6.5-7.0之间；在自然环境下，用塑料膜遮盖堆放，避光发酵24-36小时，堆内温度保持在25-35度；（d）固体菌土的第三次发酵：把以上经过两次发酵好的菌土加入第三次菌种培养基，充分混匀；发酵条件：ph值在6.2-6.5之间；在自然环境下，堆放避光发酵24小时，堆内温度保持在25-35度。
[0008]更进一步的，所述第一次菌种培养基，按菌土的重量比，采用干酵母菌 0.1%，浓度为 6-8%的谷氨酸钠溶液 0.02%，依次溶入1-5%清水中备用。
[0009]更进一步的，所述第二次菌种培养基，按菌土的重量比，采用钼酸钠 0.1%，磷酸氢二钾 1.0%，氯化钠 0.01%，硼酸钠 0.1%，碘化钾 0.03%，硫酸亚铁 0.1%，硫酸锌 0.05%，谷氨酸钠 1.0%，酵母膏 0.1%，三种VB（2/6/12）各 0.01%，依次溶入1-5%清水中备用。
[0010]更进一步的，所述第三次菌种培养基，按菌土的重量比，采用浓度为25%的大豆浆 5%，浓度为10%的大豆豆芽汁 5%，浓度为6-8%的谷氨酸钠溶液 1%，活性干酵母1%；其中，大豆浆要加温至85度半熟。
[0011]进一步的，所述非豆科作物的栽培结瘤，包括以下步骤：（e）把经过三次发酵好的固体菌土分装至花盆，种植多种非豆科作物，如：水稻、小麦、玉米、芹菜、黄瓜、辣椒、茄子、番茄、香菜、油菜、百香果；按时浇水松土，保持一定的湿度，一般温度不低于18度；（f）把经过三次发酵好的固体菌土，用50-100倍的清水稀释，搅匀避光静置36小时后，滤取上清液用于盆栽植物叶茎喷施或淋根，隔天一次；（g）对即将成熟的盆栽作物抽样观察；把盆栽作物连盆到出，将作物连根取出，用清水浸洗根茎，发现根部结有根瘤的，同类作物即可采收。
[0012]进一步的，步骤（3）中的分类及混合培养，包括以下步骤：（h）把步骤（g）中即将成熟的盆栽作物连根全部取出，用清水浸洗干净，备用；（i）按第三次菌种培养基的比例配制培养液，分装三角瓶，每500ml瓶的装瓶量为250ml，备用；（j）分类接种：按类别把盆栽作物根部结的根瘤取下，用玻璃片压碎，再用第三菌种混料的比例配制的培养液冲入瓶内；尚未结根瘤的，在其根茎叶中有根瘤菌的类菌体，可以把根茎叶捣碎取汁放入瓶内；按作物品种贴上分类标签；
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（k）按第四次菌种培养基称量发酵培养材料；每震荡5分钟将其中的一种加入到三角瓶内，全部加入后，继续好氧震荡发酵24
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36小时。发酵条件：震荡频率125r/min ,pH值在6.2-6.5之间，温度保持在25-30度；（l）把分类培养的液体菌剂混合在一起，混匀、静置、均质后即成为可使非豆科作物结瘤固氮的一级菌种保存。
[0013]进一步的，步骤（3）中的好氧发酵扩大繁殖，包括以下步骤：（m）菌种的二级扩繁：按第四菌种混料的比例配制二级扩大培养基，一级菌种的添加比例为2-5%；发酵条件：ph值在6.2-6.5之间，温度保持在25-35度，好氧震荡发酵24-36小时；（n）菌种的三级扩繁：按第四菌种混料的比例配制三级扩大培养基，二级菌种的添加比例为2-5%；发酵条件：ph值在6.2-6.5之间，温度保持在25-35度，好氧震荡发酵24-36小时。
[0014]更进一步的，所述第本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.使非豆科作物结瘤固氮及培育菌剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：（1）豆科植物菌土的培养：采集多种豆科植物根瘤及根系土壤，通过好氧发酵，富集、提纯、复壮其中的固氮菌、根瘤菌及内生菌，制成固体菌土；（2）非豆科作物的栽培结瘤：用步骤（1）中获得的固体菌土栽培种植接种多种非豆科作物，经过光合作用和微生物酶等生物转化的作用，促使非豆科作物结出根瘤；（3）非豆科作物专用菌剂的培养：以非豆科作物结瘤的根瘤菌、固氮菌和内生菌为母种，经分类及混合培养，好氧发酵扩大繁殖后，制成对非豆科作物接种施用的菌剂。2.如权利要求1所述的使非豆科作物结瘤固氮及培育菌剂的方法，其特征在于，所述豆科植物菌土的培养，包括以下步骤：（a）菌种的采集：选择已经生长成熟的8-10种豆科植物，如大豆、豇豆、绿豆、红豆、黑豆、苜蓿、田青、三叶草等，把植物根、茎、叶以及根部周围2厘米的土壤挖出，每株约0.5千克左右；（b）固体菌土的第一次发酵：把采集的根、茎、叶、土全部粉碎，与有机质丰富的田园土按照1：1的比例混拌均匀，再加入第一次菌种培养基，充分混匀，用适量清水调节使土料含水率保持在35-45%；发酵条件：ph值在6.5-7.0之间；在自然环境下，堆成条堆，用塑料膜遮盖避光，发酵48小时，堆内温度保持在25-35度；（c）固体菌土的第二次发酵：在第一次发酵好的菌土中加入第二次菌种培养基，充分混匀；发酵条件：ph值在6.5-7.0之间；在自然环境下，用塑料膜遮盖堆放，避光发酵24-36小时，堆内温度保持在25-35度；（d）固体菌土的第三次发酵：把以上经过两次发酵好的菌土加入第三次菌种培养基，充分混匀；发酵条件：ph值在6.2-6.5之间；在自然环境下，堆放避光发酵24小时，堆内温度保持在25-35度。3.如权利要求2所述的使非豆科作物结瘤固氮及培育菌剂的方法，其特征在于，所述第一次菌种培养基，按菌土的重量比，采用干酵母菌 0.1%，浓度为 6-8%的谷氨酸钠溶液 0.02%，依次溶入1-5%清水中备用。4.如权利要求2所述的使非豆科作物结瘤固氮及培育菌剂的方法，其特征在于，所述第二次菌种培养基，按菌土的重量比，采用钼酸钠 0.1%，磷酸氢二钾 1.0%，氯化钠 0.01%，硼酸钠 0.1%，碘化钾 0.03%，硫酸亚铁 0.1%，硫酸锌 0.05%，谷氨酸钠 1.0%，酵母膏 0.1%，三种VB（2/6/12）各 0.01%，依次溶入1-5%清水中备用。5.如权利要求2所述的使非豆科作物结瘤固氮及培育菌剂的方法，其特征在于，所述第三次菌种培养基，按菌土的重量比，采用浓度为25%的大豆浆 5%，浓度为10%的大豆豆芽汁 5%，浓度为6-8%的谷氨酸钠溶液 1%，活性干酵母1%；其中，大豆浆要加温至85度半熟。6.如权利要求1所述的使非豆科作物结瘤固氮及培育菌剂的方法，其特征在于，所述非豆科作物的栽培结瘤，包括以下步骤：（e）把经过三次发酵好的固体菌土分装至花盆，种植多种非豆科...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘文，韩莉华，刘海龙，
申请(专利权)人：刘文，
类型：发明
国别省市：