一株伯克霍尔德氏菌、包括伯克霍尔德氏菌的菌剂、菌肥及制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一株伯克霍尔德氏菌、包括伯克霍尔德氏菌的菌剂、菌肥及制备方法和应用，属于微生物制剂技术领域。本发明专利技术的伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)K2b，保藏编号为：CGMCC NO.22002，其通过产生活性物质抑制辣椒疫霉病菌的生长，对辣椒疫病表现出较好的防治效果，抑制率最大可达88.53％。同时，其能有效在辣椒根茎叶上定殖，改善农作物微生态环境。室内盆栽药效结果表明，K2b菌剂对辣椒病病防效为85.64％，且不易产生抗药性。应用时在辣椒幼苗期或成株期灌根使用。该菌剂也可与有机肥混合制成菌肥使用。混合制成菌肥使用。混合制成菌肥使用。

【技术实现步骤摘要】
一株伯克霍尔德氏菌、包括伯克霍尔德氏菌的菌剂、菌肥及制备方法和应用


[0001]本专利技术涉及微生物制剂
，尤其涉及一株伯克霍尔德氏菌、包括 伯克霍尔德氏菌的菌剂、菌肥及制备方法和应用。

技术介绍

[0002]辣椒疫病是一种毁灭性土传病害，辣椒在生长过程中的任何时期、任何 部位均可患病。近年来，辣椒疫病的重病田死秧率达30％～100％。目前，辣 椒疫病是阻碍辣椒稳产增产的关键因素之一。化学杀菌剂在辣椒疫病的防治 中起到了至关重要的作用，如双炔酰菌胺对辣椒疫霉病菌菌丝生长有较强的 抑制作用。但是，随着化学杀菌剂的大量和不科学使用，很多弊端日益突出， 如病原菌的抗药性、对环境的污染和生态系统的破坏等，已成为当前应用化 学杀菌剂的主要问题。而生防菌剂与环境兼容性好，高效、低毒、低残留， 对病原菌的选择压力小，目前已成为农药研究开发领域的热门之一。
[0003]微生物生物防治的核心是筛选到有效的生防菌。目前还没有关于利用伯 克霍尔德氏菌防治辣椒疫霉病的记载或报道。

技术实现思路

[0004]本专利技术的目的在于提供一株伯克霍尔德氏菌、包括伯克霍尔德氏菌的菌 剂、菌肥及制备方法和应用，本专利技术的伯克霍尔德氏菌、包括伯克霍尔德氏 菌的菌剂和菌肥都能够有效有效防治辣椒疫霉病。
[0005]为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：
[0006]本专利技术提供了一株伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)K2b，保藏编号为： CGMCC NO.22002。
>[0007]本专利技术还提供了一种包括上述方案所述伯克霍尔德氏菌的菌剂。
[0008]优选的，所述菌剂中伯克霍尔德氏菌的有效活菌数为1
×ꢀ
108～8
×
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10
CFU/ml。
[0009]本专利技术还提供了上述方案所述菌剂的制备方法，包括以下步骤：
[0010]将所述伯克霍尔德氏菌接种于LB液体培养液，进行发酵培养，得到菌 剂。
[0011]优选的，所述发酵培养的条件包括：伯克霍尔德氏菌的种子液的OD值 为1.2，伯克霍尔德氏菌的接种量为LB液体培养液体积百分含量的5％～10％， LB液体培养液pH值为7.0，培养温度为28～30℃，摇床震荡速率为180～200 rpm，培养时间60～80h。
[0012]本专利技术还提供了一种菌肥，所述菌肥包括有机肥和上述方案所述菌剂或 所述制备方法得到的菌剂。
[0013]本专利技术还提供了上述方案所述伯克霍尔德氏菌、所述菌剂、所述制备方 法得到的菌剂或所述菌肥在防治辣椒疫病和/或促进辣椒生长中的应用。
[0014]优选的，所述应用包括以下步骤：
[0015]在辣椒苗期和/或成株期，施用含有所述伯克霍尔德氏菌的菌剂或菌肥。
[0016]优选的，当施用菌剂时，所述施用的方式包括灌根，每株辣椒的施用量 为50～100mL菌剂，所述施用的次数为2～3次，每两次施用的间隔时间为 8～12d。
[0017]优选的，在辣椒苗期和成株期共施用所述菌剂2～3次。
[0018]本专利技术的有益效果：本专利技术提供了一株伯克霍尔德氏菌(Burkholderiasp.)K2b，保藏编号为：CGMCC NO.22002。本专利技术的伯克霍尔德氏菌K2b通 过产生活性物质抑制辣椒疫霉病菌的生长，对辣椒疫病表现出较好的防治效 果，抑制率最大可达88.53％。同时，其能有效在辣椒根茎叶上定殖，改善农 作物微生态环境，促进辣椒生长。室内盆栽药效结果表明，K2b菌剂对辣椒 病病防效为85.64％，且不易产生抗药性。应用时在辣椒幼苗期或成株期灌根 使用。该菌剂也可与有机肥混合制成菌肥使用。本专利技术所述的菌株K2b是从 植物根围土壤中获得，与土壤生态和谐相容，无毒、无致病性，因此具有良 好的实际应用之价值。本专利技术伯克霍尔德氏菌K2b培养条件简单，易于工业 化生产，具有良好的开发应用前景。
[0019]生物保藏说明
[0020]伯克霍尔德氏菌(Burkholderiasp.)K2b，于2021年03月12日保藏在中国微生 物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号 中国科学院微生物研究所，保藏编号为：CGMCC NO.22002。
附图说明
[0021]图1为伯克霍尔德氏菌K2b菌落形态；
[0022]图2为伯克霍尔德氏菌K2b微观结构；
[0023]图3为伯克霍尔德氏菌K2b与相关种的gyrB序列系统发育树；采用 MEGA5.0软件，邻位连接法显示K2b与相关种的16S rDNA序列系统发育 树，进行1000次的相似度重复计算，图中发育树节点只显示Bootstrap值大 于50％数值，上标的“T”表示模式菌株；
[0024]图4为伯克霍尔德氏菌K2b对辣椒疫霉菌生长的抑制作用；注：其中A为 CK，B为K2b发酵液处理；
[0025]图5表示伯克霍尔德氏菌K2b在辣椒根上的定殖；
[0026]图6为伯克霍尔德氏菌K2b显著促进了辣椒生长，其中A为伯克霍尔 德氏菌K2b处理，B为CK发酵培养基处理。
具体实施方式
[0027]本专利技术提供了一株伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)K2b，保藏编号为： CGMCC NO.22002。
[0028]在本专利技术中，所述的伯克霍尔德氏菌K2b在TSA培养基，36℃培养15 h，菌落乳白色，圆形，不透明，表面湿润，边缘整齐；TSA培养基，36℃ 培养18h，菌体呈短杆状，0.5～0.8μm
×
0.8～1.8μm，单个或成对排列，革兰 氏阴性。
[0029]本专利技术伯克霍尔德菌K2b分离自中国福建漳州龙海市郊种植的毛豆根 茎交接处，与土壤生态和谐相容，有利于充分发挥菌株的优势。
[0030]本专利技术还提供了一种包括上述方案所述伯克霍尔德氏菌的菌剂。在本发 明中，所述菌剂中伯克霍尔德氏菌的有效活菌数优选为1
×ꢀ
108～8
×
10
10
CFU/ml。
[0031]本专利技术还提供了上述方案所述菌剂的制备方法，包括以下步骤：
[0032]将所述伯克霍尔德氏菌接种于LB液体培养液，进行发酵培养，得到菌 剂。
[0033]在本专利技术中，所述发酵培养的条件优选的包括：LB液体培养液pH值为 7.0，培养的温度为28～30℃，摇床震荡速率为180～200rpm，培养的时间 60～80h。在本专利技术中，所述培养的时间优选为72h。在本专利技术中，所述伯克 霍尔德氏菌的接种量优选为LB液体培养液体积分数的5％～10％；包含伯克 霍尔德氏菌的种子液的OD值为1.2。
[0034]本专利技术还提供了一种菌肥，所述菌肥包括有机肥和上述方案所述菌剂或 所述制备方法得到的菌剂。
[0035]在本专利技术中，所述有机肥优选的包括农业废弃物有机肥和/或畜禽粪便有 机肥；所述菌剂和所述有机肥的质量比优选为(本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一株伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)K2b，保藏编号为：CGMCC NO.22002。2.一种包括权利要求1所述伯克霍尔德氏菌的菌剂。3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂中伯克霍尔德氏菌的有效活菌数为1
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108～8
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10
CFU/ml。4.权利要求2或3所述菌剂的制备方法，包括以下步骤：将所述伯克霍尔德氏菌接种于LB液体培养液，进行发酵培养，得到菌剂。5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述发酵培养的条件包括：伯克霍尔德氏菌的种子液的OD值为1.2，伯克霍尔德氏菌的接种量为LB液体培养液体积百分含量的5％～10％，LB液体培养液pH值为7.0，培养温度为28～30℃，摇床震荡速率为...

【专利技术属性】
技术研发人员：刘裴清，李本金，王荣波，翁启勇，陈庆河，
申请(专利权)人：福建省农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：