表达CAR和微小RNA的逆转录病毒载体及其应用制造技术

本发明专利技术提供一种表达CAR和微小RNA的逆转录病毒载体，该病毒载体中微小RNA与CAR共表达，所述微小RNA优选是miR155。本发明专利技术将miR155与anti

【技术实现步骤摘要】
表达CAR和微小RNA的逆转录病毒载体及其应用


[0001]本专利技术涉及肿瘤治疗
，特别涉及表达CAR和微小RNA的逆转录病毒载体及其应用。

技术介绍

[0002]微小RNA155(microRNA155，miR155)是微小RNA(microRNAs，miRNAs)家族成员之一，在进化过程中高度保守，在转录后水平通过不完全碱基配对识别和结合相应mRNA并将其降解，从而抑制靶mRNA翻译，调节其基因表达，参与调控体内多种生理和病理过程。miR155是最早发现的与炎症反应功能相关的miRNAs之一。
[0003]miR155位于人21号染色体短臂21位点，由长链非编码RNA转录本B细胞整合簇(B
‑
cell Integration Cluster，BIC)编码，其表达水平受BIC转录及成熟miRNA加工过程的影响。miR155的产生与成熟过程与绝大多数miRNAs相同：首先，由细胞核内RNA聚合酶II转录为加帽和加多聚腺苷酸尾的初级转录本，然后，经Drosha核糖核酸酶III剪切，产生含茎环结构的前体miRNA，本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种表达CAR和微小RNA的逆转录病毒载体，其特征在于，该病毒载体中微小RNA与CAR共表达，所述微小RNA优选是miR155。2.根据权利要求1所述的逆转录病毒载体，其特征在于，将U6启动子、miR155和EF1α启动子整合到所述表达CAR的逆转录病毒载体中，由U6启动子驱动miR155的表达，EF1α启动子驱动抗CAR的表达，所述抗CAR优选是抗CD19 CAR和/或CD38CAR。3.根据权利要求2所述的逆转录病毒载体，其特征在于，所述逆转录病毒载体中包括依次串联的U6启动子、miR155、EF1α启动子、上游的信号肽和用于检测的myc标签；CD19 CAR抗原结合区域；CD8铰链
‑
跨膜结构域；CD28或4
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1BB协同激活结构域和CD3ζ胞内信号传导结构域。4.根据权利要求3所述的逆转录病毒载体，其特征在于，所述CD19 CAR抗原结合区域是抗CD19 CAR的ScFv氨基酸序列SEQ ID NO:1，DIQMTQTTSSLSASLGDRVTISCRASQDISKYLNWY...

【专利技术属性】
技术研发人员：王建勋，张静，朱晶晶，冯娅茹，尚凤琴，
申请(专利权)人：北京中医药大学，
类型：发明
国别省市：