一种Cap2结构5`帽子类似物及其制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一种Cap2结构5'帽子类似物及其制备方法和应用，属于基因工程技术领域，所述Cap2结构5'帽子类似物的分子式为m7G(5')ppp(5')(2'OMeC)p(2'OMeC)。本发明专利技术提供的Cap2结构5'帽子类似物具有更高的合成效率、更高的加帽效率、更低的免疫原性和更高的蛋白翻译效率。率。率。

【技术实现步骤摘要】
一种Cap2结构5`帽子类似物及其制备方法和应用
[0001] 本申请是申请日为2020年08月20日、申请号为202010842263.2、专利技术名称为《一种Cap2结构5
′
帽子类似物及其制备方法》的分案申请，申请人深圳市瑞吉生物科技有限公司。


[0002]本专利技术属于基因工程
，尤其涉及一种Cap2结构5
′
帽子类似物及其制备方法。

技术介绍

[0003]翻译效率和免疫原性是mRNA药物行使功能的两大关键因素。自体免疫蛋白如RIG
‑
I和IFIT识别异常加帽的mRNA，降低了外源mRNA在细胞内的活性和半衰期，使得mRNA药物在体内难以发挥作用。因此，优化mRNA 帽结构对于提高mRNA的生物活性和降低免疫原性是至关重要的。
[0004]目前在体外合成带帽的mRNA有两种方法，第一种是mRNA转录后使用牛痘病毒加帽酶对其进行加帽，产生带Cap0或Cap1的RNA，这种加帽方法很高效，但是产量不稳定，价格也很昂贵。此外酶促加帽法不能产生 Cap2和m6Am的帽子本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种Cap2结构5'帽子类似物，其特征在于，所述Cap2结构5'帽子类似物的分子式为m7G(5')ppp(5')(2'OMeC)p(2'OMeC)。2.权利要求1所述的Cap2结构5'帽子类似物的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：1)将2'
‑
O
‑
Methyl
‑
CTP溶解在无RNA酶的水中，再与磷酸水解酶、2
×
ReactionBuffer混合后进行孵育，得到2'
‑
O
‑
Methyl
‑
CDP；2)将所述步骤1)得到的2'
‑
O
‑
Methyl
‑
CDP溶解在无RNA酶水中，再与7
‑
Methylguanosine、鸟苷转移酶、2
×
ReactionBuffer混合后进行孵育，得到m7G(5')ppp(5')(2'OMeC)；3)将所述步骤2)得到的m7G(5')ppp(5')(2'OMeC)溶解在无RNA酶水中，与T4 RNALigase1混合后，再与2'
‑
O
‑
Methyl
‑
CTP混合，再与2
×
T4 RNA Ligase ReactionBuffer混合后进行孵育，得到Cap2结构5'帽子类似物。3.根据权利要求2所述的制备方法，其特征在于，所述步骤1)2'
‑
O
‑
Methyl

【专利技术属性】
技术研发人员：胡勇，张苗苗，洪丹，胡迅，
申请(专利权)人：深圳市瑞吉生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：