一株伯克霍尔德氏菌、包括伯克霍尔德氏菌的菌剂、菌肥及制备方法和应用技术

本发明专利技术提供了一株伯克霍尔德氏菌、包括伯克霍尔德氏菌的菌剂、菌肥及制备方法和应用，属于微生物制剂技术领域。本发明专利技术的伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)K2h，保藏编号为：CGMCC NO.22001，其通过产生活性物质抑制辣椒疫霉病菌的生长，对辣椒疫病表现出较好的防治效果，抑制率最高可达90.01％。同时，其能有效在辣椒根茎叶上定殖，改善农作物微生态环境。室内盆栽药效结果表明，K2h菌剂对辣椒病病防效为88.63％，且不易产生抗药性。应用时在辣椒幼苗期或成株期灌根使用。该菌剂也可与有机肥混合制成菌肥使用。

【技术实现步骤摘要】
一株伯克霍尔德氏菌、包括伯克霍尔德氏菌的菌剂、菌肥及制备方法和应用
本专利技术涉及微生物制剂
，尤其涉及一株伯克霍尔德氏菌、包括伯克霍尔德氏菌的菌剂、菌肥及制备方法和应用。
技术介绍
辣椒疫病是一种毁灭性土传病害，辣椒在生长过程中的任何时期、任何部位均可患病。近年来，辣椒疫病的重病田死秧率达30％～100％。目前，辣椒疫病是阻碍辣椒稳产增产的关键因素之一。化学杀菌剂在辣椒疫病的防治中起到了至关重要的作用。但是，随着化学杀菌剂的大量和不科学使用，很多弊端日益突出，如病原菌的抗药性、对环境的污染和生态系统的破坏等，已成为当前应用化学杀菌剂的主要问题。而生防菌剂与环境兼容性好，高效、低毒、低残留，对病原菌的选择压力小，目前已成为农药研究开发领域的热门之一。微生物生物防治的核心是筛选到有效的生防菌。目前还没有关于利用伯克霍尔德氏菌防治辣椒疫霉病的记载或报道。
技术实现思路
本专利技术的目的在于提供一株伯克霍尔德氏菌、包括伯克霍尔德氏菌的菌剂、菌肥及制备方法和应用，本专利技术的伯克霍尔德氏菌、包括伯克霍尔德氏菌的菌剂和菌肥能够有效有效防治辣椒疫霉病。为了实现上述专利技术目的，本专利技术提供以下技术方案：本专利技术提供了一株伯克霍尔德氏菌(Burkholderiasp.)K2h，保藏编号为：CGMCCNO.22001。本专利技术还提供了一种包括上述方案所述伯克霍尔德氏菌的菌剂。优选的，所述菌剂中伯克霍尔德氏菌的有效活菌数为1×108～5×1010CFU/ml。r>本专利技术还提供了上述方案所述菌剂的制备方法，包括以下步骤：将所述伯克霍尔德氏菌接种于LB液体培养液，进行发酵培养，得到菌剂。优选的，所述发酵培养的条件包括：伯克霍尔德氏菌的种子液的OD值为1.2，伯克霍尔德氏菌的接种量为LB液体培养液体积百分含量的5％～10％，LB液体培养液pH值为7.0，培养温度为28～30℃，摇床震荡速率为180～200rpm，培养时间60～80h。本专利技术还提供了一种菌肥，所述菌肥包括有机肥和上述方案所述菌剂或所述制备方法得到的菌剂。本专利技术还提供了上述方案所述肺炎克雷伯氏菌、所述菌剂、所述制备方法得到的菌剂或所述菌肥在防治辣椒疫病和/或促进辣椒生长中的应用。优选的，所述应用包括以下步骤：在辣椒苗期和/或成株期，施用含有所述肺炎克雷伯氏菌的菌剂或菌肥。优选的，当施用菌剂时，所述施用的方式包括灌根，每株辣椒的施用量为50～100mL菌剂，所述施用的次数为2～3次，每两次施用的间隔时间为8～12d。优选的，在辣椒苗期和成株期共施用所述菌剂2～3次。本专利技术的有益效果：本专利技术提供了一株伯克霍尔德氏菌(Burkholderiasp.)K2h，保藏编号为：CGMCCNO.22001。本专利技术的伯克霍尔德氏菌K2h通过产生活性物质抑制辣椒疫霉病菌的生长，对辣椒疫病表现出较好的防治效果，抑制率最高可达90.01％。同时，其能有效在辣椒根茎叶上定殖，改善农作物微生态环境，促进辣椒生长。室内盆栽药效结果表明，K2h菌剂对辣椒病病防效为88.63％，且不易产生抗药性。应用时在辣椒幼苗期或成株期灌根使用。该菌剂也可与有机肥混合制成菌肥使用。本专利技术所述的菌株K2h是从植物根围土壤中获得，与土壤生态和谐相容，无毒、无致病性，因此具有良好的实际应用之价值。生物保藏说明伯克霍尔德氏菌(Burkholderiasp.)K2h，于2021年03月12日保藏在中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址为北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，保藏编号为：CGMCCNO.22001。附图说明图1为伯克霍尔德氏菌K2h菌落形态；图2为伯克霍尔德氏菌K2h微观结构；图3为伯克霍尔德氏菌K2h与相关种的16SrDNA序列系统发育树；采用MEGA5.0软件，邻位连接法显示K2h与相关种的16SrDNA序列系统发育树，进行1000次的相似度重复计算，图中发育树节点只显示Bootstrap值大于50％数值，上标的“T”表示模式菌株；图4为伯克霍尔德氏菌K2h对辣椒疫霉菌丝生长的影响；注：其中A为CK，B为K2h发酵液处理；图5表示伯克霍尔德氏菌K2h在辣椒根上的定殖；图6为伯克霍尔德氏菌K2h显著促进了辣椒生长。具体实施方式本专利技术提供了一株伯克霍尔德氏菌(Burkholderiasp.)K2h，保藏编号为：CGMCCNO.22001。在本专利技术中，所述的伯克霍尔德氏菌K2h在TSA培养基，36℃培养24h，菌落黄色，圆形，不透明，边缘整齐，菌体呈杆状，0.4～0.6μm×0.6～1.8μm，单个或成对排列，革兰氏阴性。本专利技术伯克霍尔德菌K2h分离自中国福建漳州龙海市郊种植的毛豆根茎交接处，与土壤生态和谐相容，有利于充分发挥菌株的优势。本专利技术还提供了一种包括上述方案所述伯克霍尔德氏菌的菌剂。在本专利技术中，所述菌剂中伯克霍尔德氏菌的有效活菌数优选为1×108～5×1010CFU/ml。本专利技术还提供了上述方案所述菌剂的制备方法，包括以下步骤：将所述伯克霍尔德氏菌接种于LB液体培养液，进行发酵培养，得到菌剂。在本专利技术中，所述发酵培养的条件优选的包括：伯克霍尔德氏菌的种子液的OD值为1.2，伯克霍尔德氏菌的接种量为LB液体培养液体积百分含量的5％～10％，LB液体培养液pH值为7.0，培养的温度为28～30℃，摇床震荡速率为180～200rpm，培养的时间60～80h。在本专利技术中，所述培养的时间优选为72h。本专利技术还提供了一种菌肥，所述菌肥包括有机肥和上述方案所述菌剂或所述制备方法得到的菌剂。在本专利技术中，所述有机肥优选的包括农业废弃物有机肥和/或畜禽粪便有机肥；所述菌剂和所述有机肥的质量比优选为(5～10)：1000，进一步优选为8：1000。本专利技术所述菌肥是将有机肥和菌剂混合后得到，本专利技术对所述混合的方式没有特殊要求，以混合均匀为准。本专利技术还提供了上述方案所述肺炎克雷伯氏菌、所述菌剂、所述制备方法得到的菌剂或所述菌肥在防治辣椒疫病和/或促进辣椒生长中的应用。在本专利技术中，所述优选的应用包括以下步骤：在辣椒苗期和/或成株期，施用含有所述肺炎克雷伯氏菌的菌剂或菌肥。在本专利技术中，当施用菌剂时，所述施用的方式包括灌根，每株辣椒的施用量为50～100mL菌剂，所述施用的次数为2～3次，进一步优选的，在辣椒苗期和成株期共施用所述菌剂2～3次。每两次施用的间隔时间为8～12d，进一步优选为10d。在本专利技术中，当施用菌肥时，所述菌肥的施用方式优选为穴施，每株辣椒的菌肥施用量为1～1.5斤/株，所述施用的次数优选为2次，进一步优选为在辣椒苗期和成株期各施用一次。下面将结合本专利技术中的实施例，对本专利技术中的技术方案进行清楚、完整地描述。显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一株伯克霍尔德氏菌(Burkholderia sp.)K2h，保藏编号为：CGMCC NO.22001。/n

【技术特征摘要】
1.一株伯克霍尔德氏菌(Burkholderiasp.)K2h，保藏编号为：CGMCCNO.22001。


2.一种包括权利要求1所述伯克霍尔德氏菌的菌剂。


3.根据权利要求2所述的菌剂，其特征在于，所述菌剂中伯克霍尔德氏菌的有效活菌数为1×108～5×1010CFU/ml。


4.权利要求2或3所述菌剂的制备方法，包括以下步骤：
将所述伯克霍尔德氏菌接种于LB液体培养液，进行发酵培养，得到菌剂。


5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，所述发酵培养的条件包括：伯克霍尔德氏菌的种子液的OD值为1.2，伯克霍尔德氏菌的接种量为LB液体培养液体积百分含量的5％～10％，LB液体培养液pH值为7.0，培养温度为28～30℃，摇床震荡速率为180～200rpm，培养时间60～80h。

【专利技术属性】
技术研发人员：刘裴清，翁启勇，李本金，王荣波，陈庆河，
申请(专利权)人：福建省农业科学院植物保护研究所，
类型：发明
国别省市：福建;35