组织透明化试剂盒和方法技术

本发明专利技术公开一种组织透明化试剂盒和方法，其中，组织透明化试剂盒包括芳香胺以及葡萄糖，芳香胺和葡萄糖用以配制分别将组织透明化处理的试剂一和试剂二；在试剂一中，芳香胺的质量比为25～40％，葡萄糖的质量比为5～10％；在试剂二中，芳香胺的质量比为30～45％，葡萄糖的质量比为30～45％。本发明专利技术组织透明化试剂盒可实现对组织(尤其是管状、腔体状组织)进行透明化处理，并对透明化的组织进行塑型，使得组织可用于制备冰冻切片或组织标本切片等。

【技术实现步骤摘要】
组织透明化试剂盒和方法
本专利技术涉及生物
，特别涉及组织透明化试剂盒和方法。
技术介绍
随着生命科学技术的快速发展，利用生物组织透明化技术获取生物组织的三维图像信息成为了研究的热点。目前，FOCM、SCALE、CUBIC、SEEDB、MACS等透明化技术已在生命科学领域得到了较为广泛的应用。但是，现有的透明化试剂处理后的组织(尤其是管状、腔体状的组织)比较松、软，难以塑型，使得组织无法再进行修饰或者切片等。上述内容仅用于辅助理解专利技术的技术方案，并不代表承认上述内容是现有技术。
技术实现思路
本专利技术的主要目的是提出一种组织透明化试剂盒和方法，旨在解决现有技术无法实现对生物组织塑型的技术问题。为实现上述目的，第一方面，本专利技术提出一种组织透明化试剂盒，包括芳香胺以及葡萄糖，所述芳香胺和所述葡萄糖用以配制试剂一和试剂二，所述试剂一和所述试剂二可将组织透明化处理；其中，在所述试剂一中，所述芳香胺的质量比为大于或等于25％，且小于或等于40％；所述葡萄糖的质量比为大于或等于5％，且小于或等于10％；在所述试剂二中，所述芳香胺的质量比为大于或等于30％，且小于或等于45％；所述葡萄糖的质量比为大于或等于30％，且小于或等于45％。可选地，所述组织透明化试剂盒还包括尿素，所述尿素用以与所述芳香胺、所述葡萄糖共同配制成所述试剂一，所述尿素在所述试剂一中的质量比为大于0，且小于或等于5％。可选地，所述组织透明化试剂盒还包括甘油，所述甘油用以与所述芳香胺、所述葡萄糖共同配制成所述试剂一，所述甘油在所述试剂一中的质量比为大于0，且小于或等于2％。可选地，所述组织透明化试剂盒还包括尿素，所述尿素用以配合所述芳香胺、所述葡萄糖配制所述试剂二，所述尿素在所述试剂二中的质量比为大于0，且小于或等于1％。可选地，所述芳香胺包括邻苯二甲胺、间苯二甲胺或对苯二甲胺及其衍生物的至少一种。第二方面，本专利技术还提出一种组织透明化方法，包括以下步骤：(1)将固定过的组织放入试剂一中孵育，得到初步透明化的组织；(2)将上步所得的初步透明化的组织放入试剂二中孵育，得到水凝胶包埋的透明化组织。可选地，所述组织放入所述试剂一中的孵育温度为大于或等于25℃，且小于或等于37℃；所述组织放入所述试剂一中的孵育时间为大于或等于4小时，且小于或等于48小时。可选地，所述组织放入所述试剂二中的孵育温度为大于或等于4℃，且小于或等于37℃；所述组织放入所述试剂二中的孵育时间为大于或等于6小时，且小于或等于48小时。本专利技术组织透明化试剂盒包括芳香胺以及葡萄糖，所述芳香胺和所述葡萄糖用以配制试剂一和试剂二，所述试剂一和所述试剂二可将组织透明化处理；其中，在所述试剂一中，所述芳香胺的质量比为大于或等于25％，且小于或等于40％；所述葡萄糖的质量比为大于或等于5％，且小于或等于10％；在所述试剂二中，所述芳香胺的质量比为大于或等于30％，且小于或等于45％；所述葡萄糖的质量比为大于或等于30％，且小于或等于45％。如此，所述芳香胺的-NH2基团可与组织的脂质结合，使脂质从组织内渗出，从而降低组织内各成分的折射率差异；所述葡萄糖可以避免组织的结构及内部的蛋白遭到破坏，以使组织保持原先的状态。当组织放置于所述试剂一中孵育时，所述芳香胺和所述葡萄糖共同作用，使得组织初步具有了透明化的效果；当组织放置于所述试剂二中孵育时，所述芳香胺和所述葡萄糖共同作用，使得组织在透明化的同时被水凝胶包埋，这样组织尤其管状、腔体状的组织，不会出现松、软、难以移动的情况，可被塑型并用于制备冰冻切片或组织标本切片等。本专利技术组织透明化方法，采用上述组织透明化试剂盒，至少具有上述组织透明化试剂盒所带来的所有有益效果。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图示出的结构获得其他的附图。图1为实施例二组织透明化处理的流程图；图2为实施例二组织透明化处理前、后的对比图；图3为实施例三不同透明化方法处理组织的流程和时间；图4为实施例三组织被不同透明化方法处理后透光率的对比图；图5为实施例四组织被不同透明化方法处理前、后荧光成像的对比图。本专利技术目的的实现、功能特点及优点将结合实施例，参照附图做进一步说明。具体实施方式需要说明，若本专利技术实施例中有涉及“第一”、“第二”等的描述，则该“第一”、“第二”等的描述仅用于描述目的，而不能理解为指示或暗示其相对重要性或者隐含指明所指示的技术特征的数量。由此，限定有“第一”、“第二”的特征可以明示或者隐含地包括至少一个该特征。另外，全文中出现的“和/或”的含义为，包括三个并列的方案，以“A和/或B”为例，包括A方案，或B方案，或A和B同时满足的方案。本专利技术提出一种组织透明化试剂盒，所述组织透明化试剂盒包括芳香胺以及葡萄糖，所述芳香胺和所述葡萄糖用以配制试剂一和试剂二，所述试剂一和所述试剂二可将组织透明化处理；其中，在所述试剂一中，所述芳香胺的质量比为大于或等于25％，且小于或等于40％；所述葡萄糖的质量比为大于或等于5％，且小于或等于10％；在所述试剂二中，所述芳香胺的质量比为大于或等于30％，且小于或等于45％；所述葡萄糖的质量比为大于或等于30％，且小于或等于45％。在本专利技术试剂盒中，所述芳香胺是指具有一个芳香性取代基的胺，包含-NH2基团、-NH-基团或含氮基团，种类多样，一般为高沸点的液体或者低熔点的固体。所述试剂一和所述试剂二可以采用蒸馏水作为溶剂，所述蒸馏水属于实验室常用试剂，容易获得。在所述试剂一中，所述蒸馏水的质量比可以为大于或等于50％，且小于或等于70％。在所述试剂二中，所述蒸馏水的质量比可以为大于或等于5％，且小于或等于40％。在所述试剂一和所述试剂二的配制过程中，先将所述蒸馏水与所述芳香胺混匀，再加入所述葡萄糖，充分搅拌溶解。由于所述试剂一和所述试剂二中含有所述葡萄糖，随着温度的升高和时间的延长会逐渐变黄，为了不影响对组织的透明化效果，所述试剂一和所述试剂二可以现配现用。在所述试剂一中，若，①所述芳香胺的质量比为小于25％，所述葡萄糖的质量比为小于5％；②所述芳香胺的质量比为小于25％，所述葡萄糖的质量比为处于5％～10％；③所述芳香胺的质量比为处于25％～40％之间，所述葡萄糖的质量比为小于5％；上述三种情况下，所述试剂一的浓度不高，所述组织可能存在过度吸水的现象，透明化的效果不好。在所述试剂一中，若，①所述芳香胺的质量比为大于40％，所述葡萄糖的质量比为大于10％；②所述芳香胺的质量比为大于40％，所述葡萄糖的质量比为处于5％～10％；③所述芳香胺的质量比为处于25％～40％之间，所述葡萄糖的质量比为大于10％；上述三种情况下，所述试剂一比较本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种组织透明化试剂盒，其特征在于，包括芳香胺以及葡萄糖，所述芳香胺和所述葡萄糖用以配制试剂一和试剂二，所述试剂一和所述试剂二可将组织透明化处理；/n其中，在所述试剂一中，所述芳香胺的质量比为大于或等于25％，且小于或等于40％；所述葡萄糖的质量比为大于或等于5％，且小于或等于10％；/n在所述试剂二中，所述芳香胺的质量比为大于或等于30％，且小于或等于45％；所述葡萄糖的质量比为大于或等于30％，且小于或等于45％。/n

【技术特征摘要】
1.一种组织透明化试剂盒，其特征在于，包括芳香胺以及葡萄糖，所述芳香胺和所述葡萄糖用以配制试剂一和试剂二，所述试剂一和所述试剂二可将组织透明化处理；
其中，在所述试剂一中，所述芳香胺的质量比为大于或等于25％，且小于或等于40％；所述葡萄糖的质量比为大于或等于5％，且小于或等于10％；
在所述试剂二中，所述芳香胺的质量比为大于或等于30％，且小于或等于45％；所述葡萄糖的质量比为大于或等于30％，且小于或等于45％。


2.如权利要求1所述的组织透明化试剂盒，其特征在于，还包括尿素，所述尿素用以与所述芳香胺、所述葡萄糖共同配制成所述试剂一，所述尿素在所述试剂一中的质量比为大于0，且小于或等于5％。


3.如权利要求1所述的组织透明化试剂盒，其特征在于，还包括甘油，所述甘油用以与所述芳香胺、所述葡萄糖共同配制成所述试剂一，所述甘油在所述试剂一中的质量比为大于0，且小于或等于2％。


4.如权利要求1所述的组织透明化试剂盒，其特征在于，还包括尿素，所述尿素用以配合所述芳香胺、所述葡萄糖配制所...

【专利技术属性】
技术研发人员：吴科锋，李茜，叶华，罗辉，朱宇珍，戚怡，
申请(专利权)人：南方海洋科学与工程广东省实验室湛江，
类型：发明
国别省市：广东;44