提取调理包中腐败菌DNA的试剂盒及其提取方法技术

本发明专利技术公开了一种提取调理包中腐败菌DNA的试剂盒及其提取方法，所述试剂盒包括：样品清洗A液、细菌裂解B液、细菌裂解C液、细菌裂解D液；其中，所述样品清洗A液主要由Na

【技术实现步骤摘要】
提取调理包中腐败菌DNA的试剂盒及其提取方法
本专利技术属于生物
，具体涉及一种提取调理包中腐败菌DNA的试剂盒及其提取方法。
技术介绍
随着方便食品的快速发展，美味的方便食品越来越受到广大消费者的喜爱，其美味的核心是丰富多样、美味营养的调理包。经过高压杀菌的调理包，因不含防腐剂而广受欢迎，也因不含有防腐剂，在常温条件下，如遇到包装破损则容易受到微生物污染，腐败胀袋的风险也同时大大增加。因此，能否实现调理包中腐败微生物的快速检出，是进行进一步原因分析的技术关键，也对产品的质量安全保障至关重要。关于腐败微生物的分析，目前应用广泛的方法为依赖于培养的分析方法，主要分析方法包括通过样品处理、选择针对性不同的培养基培养出菌落、分离纯化、挑取单菌落鉴定这一系列的实验过程[1-3]。但依赖于培养的方法来培养腐败样品中的污染微生物，由于需氧微生物/兼性厌氧微生物/厌氧微生物所采用的培养基、培养温度时间均不相同，因此，通常得到不同菌种的单菌落需要5-7天的时间，十分费时费力。腐败样品中微生物DNA的提取难度，取决于样品本身的复杂程度。对于本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种提取调理包中腐败菌DNA的试剂盒，其特征在于，包括：/n样品清洗A液、细菌裂解B液、细菌裂解C液、细菌裂解D液；/n其中，所述样品清洗A液主要由Na

【技术特征摘要】
1.一种提取调理包中腐败菌DNA的试剂盒，其特征在于，包括：
样品清洗A液、细菌裂解B液、细菌裂解C液、细菌裂解D液；
其中，所述样品清洗A液主要由Na2HPO4、NaCl、NaH2PO4·2H2O配制得到；
所述细菌裂解B液主要由Tris、Na2EDTA、溶菌酶配制得到；
所述细菌裂解C液主要由SDS、蛋白酶K配制得到；
所述细菌裂解D液主要由Tris-HCl、NaCl、EDTA、CTAB配制得到。


2.如权利要求1所述的提取调理包中腐败菌DNA的试剂盒，其特征在于，所述样品清洗A液由以下方法配制得到：
称取1.07g的Na2HPO4、8.5g的NaCl和0.39g的NaH2PO4·2H2O置于500mL无菌容器中用水溶解，调节pH＝7.2并用水定容至1000mL，高压蒸汽灭菌配制得到样品清洗A液。


3.如权利要求1所述的提取调理包中腐败菌DNA的试剂盒，其特征在于，所述细菌裂解B液由以下方法配制得到：
称取0.121g的Tris和0.0372g的Na2EDTA置于500mL无菌容器中用水溶解，调节pH＝8.0并用水定容至1000mL，得到TE缓冲液，将所述TE缓冲液与溶菌酶以9：1的体积比混合得到细菌裂解B液。


4.如权利要求1所述的提取调理包中腐败菌DNA的试剂盒，其特征在于，所述细菌裂解C液由以下方法配制得到：
将10％w/vSDS水溶液与20mg/mL的蛋白酶K以5：2的体积比混合得到细菌裂解C液。


5.如权利要求1所述的提取调理包中腐败菌DNA的试剂盒，其特征在于，所述细菌裂解D液由以下方法配制得到：
称取3.15g100mM的Tris-HCl、16.38g1.4M的NaCl、1.17g20mM的EDTA、4g2％w/v的CTAB置于500mL无菌容器中，调节pH＝8.0并用水定容至200mL，得到细菌裂解D液。


6.如权利要求1所述的提取调理包中腐败菌DNA的试剂盒，其特征在于，所述调理包为调理酱包、调理肉包。


7.一种提取调理包中腐败菌DNA的方法，其特征在于，包括：采用权利要求1至6任一项所述的试剂盒对调理包中的腐...

【专利技术属性】
技术研发人员：唐晓阳，胡传琪，孙洪峰，黄仁皇，刘秀，梁玉林，周鹏飞，宋全厚，
申请(专利权)人：上海康识食品科技有限公司，中国食品发酵工业研究院有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31