血清淀粉样蛋白A2在制备检测肺癌试剂盒中的应用制造技术

本发明专利技术公开了一种血清淀粉样蛋白A2在制备检测肺癌试剂盒中的应用，属于生物技术和医学领域。本发明专利技术具体公开了一种血清淀粉样蛋白A2作为分子标志物在制备检测肺癌试剂盒或试剂中的应用，所述血清淀粉样蛋白A2作为分子标志物对肺癌进行早期筛查和临床分期。本发明专利技术通过试验验证，首次揭示了SAA2基因高表达与肺癌临床分期密切关联，发现SAA2可作为检测NSCLC患者组织和血浆样本的标志物，并开发了可用于临床的肺癌早期筛查和临床分期的快速检测试剂或试剂盒，从而为肺癌诊断提供新的手段。

【技术实现步骤摘要】
血清淀粉样蛋白A2在制备检测肺癌试剂盒中的应用
本专利技术涉及生物技术和医学领域，特别是涉及一种血清淀粉样蛋白A2在制备检测肺癌试剂盒中的应用。
技术介绍
肺癌是目前最常见的恶性肿瘤之一，也是全球发病率和死亡率增加最快的肿瘤，每年大概有120万患者被诊断为肺癌，110万人死于肺癌。肺癌依据其组织病理学可分为两大类：小细胞肺癌和非小细胞肺癌。非小细胞肺癌又包含鳞状细胞癌、腺癌、大细胞癌等。迄今为止，仍然缺乏有效的肺癌早期筛查和临床分期的分子检测手段。开发新的早期筛查和诊断技术己经成为肺癌防治急需解决的重大科学问题。肿瘤标志物的发现和合理应用是肿瘤早期发现、早期诊断的前提。基于外周血中蛋白标记物可以发展为早期癌症诊断的替代手段。SAA2蛋白在人原代单核细胞和巨噬细胞中表达，并在促进Th17介导的炎症性疾病中发挥独特作用。已发现SAA2可有效区分感染状态和正常状态，并有可能成为评估细菌血流感染(BSI)发生和发展的生物标志物。SAA2可用作诊断或治疗溃疡性结肠炎(UC)和肝细胞癌(HCC)的潜在标志物。目前SAA2对于肺癌的筛查和临床分期还没有商业化试剂盒。因此本专利技术开发出可供临床应用的检测试剂，以深入地研究和大规模验证SAA2与肺癌的相关性，对癌症进行诊断及为个体患者提供更好的辅助治疗方法。
技术实现思路
本专利技术的目的是提供一种血清淀粉样蛋白A2(SAA2)在制备检测肺癌试剂盒中的应用，以解决上述现有技术存在的问题，首次揭示了SAA2基因高表达与肺癌临床分期密切关联，并开发了可用于临床的肺癌早期筛查和临床分期的快速检测试剂或试剂盒，从而为肺癌诊断提供新的手段。为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：本专利技术提供一种血清淀粉样蛋白A2作为分子标志物在制备检测肺癌试剂盒中的应用,所述血清淀粉样蛋白A2作为分子标志物对肺癌进行早期筛查和临床分期。本专利技术还提供一种血清淀粉样蛋白A2作为分子标志物在制备检测肺癌试剂中的应用,所述血清淀粉样蛋白A2作为分子标志物对肺癌进行早期筛查和临床分期。本专利技术还提供一种试剂盒，以所述的血清淀粉样蛋白A2作为分子标志物对肺癌进行早期筛查和临床分期。优选的是，通过检测待测样品中血清淀粉样蛋白A2的表达量实现肺癌早期筛查和临床分期。优选的是，所述待测样品为外周血样本。本专利技术还提供一种检测所述的血清淀粉样蛋白A2的ELISA试剂盒，包括：血清淀粉样蛋白A2标准品、兔抗人WP02多克隆抗体包被的酶标板、辣根过氧化物酶标记的鼠抗人WM12单克隆抗体以及辅助试剂。优选的是，所述辅助试剂包括辣根过氧化物酶标记的鼠抗人WM12单克隆抗体稀释液、待测样品稀释液、洗板液、显色液以及终止液。进一步地，ELISA试剂盒包括：ELISA板：已包被好纯化的兔抗人HE4多克隆抗体并已进行了封闭；待检样品稀释液：含1％BSA和0.05％吐温-20的PBS；酶标二抗：辣根过氧化物酶标记的鼠抗人HE4单克隆抗体，保存于含50％甘油的PBS；酶标二抗稀释液：PH7.2的PBS；10×洗板液：0.2mol/L的Tris-HCl,1.5mol/L的NaCl,0.5％的吐温-20；显色液：A液为0.05mol/L的柠檬酸和0.1mol/L的磷酸氢二钠，B液为含2mg/mLTMB的无水乙醇，C液为0.75％H2O2；终止液：2M的硫酸；阳性标准品：纯化的SAA2蛋白。本专利技术公开了以下技术效果：本专利技术公开了一种血清淀粉样蛋白A2作为分子标志物在制备检测肺癌试剂盒中的应用，通过ELISA试剂盒检测SAA2的表达量，发现SAA2基因表达与非小细胞肺癌(NSCLC)患者组织和血浆样本的密切相关性，首次揭示了SAA2基因高表达与肺癌临床分期密切关联，并开发了可用于临床的肺癌早期筛查和临床分期的快速检测试剂或试剂盒，实验验证，通过该试剂盒检测SAA2蛋白表达量检测非小细胞肺癌早期筛查和临床分期准确率达到68.89％，远高于现有技术中肺癌诊断的准确率，从而本专利技术为肺癌诊断提供新的手段。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为SAA2在人血浆中表达含量及其在非小细胞肺癌临床诊断和临床分期的应用；w：正常组和肺癌组中SAA2表达量分析结果；x：LUSC组和LUAD组中SAA2表达量分析结果；y：不同性别中SAA2表达量分析结果；z：正常组、LUSC组和LUAD组中不同性别对SAA2表达量的影响；α：肺癌不同分期中SAA2表达量的表达情况；β：ROC曲线分析ELISA试剂盒检测肺癌的临界值、灵敏度以及特异性。具体实施方式现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本专利技术的限制，而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本专利技术。另外，对于本专利技术中的数值范围，应理解为还具体公开了该范围的上限和下限之间的每个中间值。在任何陈述值或陈述范围内的中间值以及任何其他陈述值或在所述范围内的中间值之间的每个较小的范围也包括在本专利技术内。这些较小范围的上限和下限可独立地包括或排除在范围内。除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本专利技术所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本专利技术仅描述了优选的方法和材料，但是在本专利技术的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本说明书中提到的所有文献通过引用并入，用以公开和描述与所述文献相关的方法和/或材料。在与任何并入的文献冲突时，以本说明书的内容为准。在不背离本专利技术的范围或精神的情况下，可对本专利技术说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本专利技术的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见的。本申请说明书和实施例仅是示例性的。关于本文中所使用的“包含”、“包括”、“具有”、“含有”等等，均为开放性的用语，即意指包含但不限于。为实现本专利技术肺癌诊断技术，用于肺癌(具体为非小细胞肺癌)早期筛查和分期的检测，包括制备SAA2蛋白和SAA2抗体等，并用SAA2蛋白和SAA2抗体构建肺癌早期筛查和临床分期的试剂盒，具体包括以下步骤：(1)重组蛋白制备：SAA2的编码序列(SEQIDNO.1)通过RT-PCR获得，引物分别是：SAA2-F：5’-AACCGGCGCGCCAAGCTTCTCACGGGCCTGGTTTTCTGT-3’和SAA2-R：5’-TAGGTTAATTAACTACAGTTCAGCTGAAAATAAACTGATC-3’，模板用的是肺癌组织cDNA。PCR反应程序为：94℃预变性5min；94℃变性30s，5本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种血清淀粉样蛋白A2作为分子标志物在制备检测肺癌试剂盒中的应用,其特征在于，所述血清淀粉样蛋白A2作为分子标志物对肺癌进行早期筛查和临床分期。/n

【技术特征摘要】
1.一种血清淀粉样蛋白A2作为分子标志物在制备检测肺癌试剂盒中的应用,其特征在于，所述血清淀粉样蛋白A2作为分子标志物对肺癌进行早期筛查和临床分期。


2.一种血清淀粉样蛋白A2作为分子标志物在制备检测肺癌试剂中的应用,其特征在于，所述血清淀粉样蛋白A2作为分子标志物对肺癌进行早期筛查和临床分期。


3.一种试剂盒，其特征在于，以权利要求1或2中所述的血清淀粉样蛋白A2作为分子标志物对肺癌进行早期筛查和临床分期。


4.根据权利要求3所述的试剂盒，其特征在于，通过检测待测样品中血清淀粉样蛋白A2的表达量...

【专利技术属性】
技术研发人员：孟民杰，张舒林，魏慧敏，万武，
申请(专利权)人：上海中乔新舟生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：上海;31