一种检测外泌体PD-L1的荧光传感器及其制备与应用制造技术

本发明专利技术公开了一种检测外泌体PD‑L1的荧光传感器及其制备与应用，所述传感器包括外泌体PD‑L1、信号识别部分和信号转换部分，信号识别部分包括适体，适体上含有一段被封闭的引物序列，外泌体PD‑L1与适体结合使引物暴露；信号转换部分为：引物与发夹A结合触发级联引物交换反应(PER)，生成产物，产物与硫黄素ThT结合产生荧光，实现外泌体PD‑L1的检测。本发明专利技术首次将级联PER反应用于检测外泌体PD‑L1，通过PER的信号放大作用结合，使荧光信号进一步放大，提高灵敏度和特异性；无需洗涤，能一步法实现检测，操作简便；利用适体识别外泌体，适体可通过程序设计，无需复杂的DNA抗体偶联，且适体空间位阻较小可有效识别外泌体。

【技术实现步骤摘要】
一种检测外泌体PD-L1的荧光传感器及其制备与应用
本专利技术涉及生物
，特别是涉及一种检测外泌体PD-L1的荧光传感器及其制备与应用。
技术介绍
肝细胞癌(HCC，也称为原发性肝癌)是世界上最常见的癌症之一。每年大约有84万新发的HCC病例，并且至少有78万人死于HCC。肝癌的主要治疗方案是手术切除、肝移植、放疗或化学药物局部给药以及联合治疗。然而，由于HCC起病的隐匿性和缺乏特定的早期标志物，大多数患者通常被诊断时已经是晚期，不再适合手术治疗，生存时间通常只有6个月。射频消融(RFA)目前是较小的HCC的一线治疗，具有与外科手术切除相似的功效，并且损伤小、恢复快。然而，由于消融能量在肿瘤中的分布不均，杀死远端或末梢癌细胞的效率不高，可能导致残留肿瘤的存在。经导管动脉化疗栓塞(TACE)是晚期肝癌的另一种一线治疗方法。然而，由于缺氧后肿瘤中的代偿性血管增生，治疗效果也不能令人满意。索拉非尼是晚期肝癌的主流靶向治疗药物，可以显着延长患者的中位生存期，但在治疗后期逐渐会出现耐药性。因此，鉴定HCC的早期特异性诊断标志物并解决耐药性和疾病复发本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种检测外泌体PD-L1的荧光传感器，其特征在于，包括外泌体PD-L1、信号识别部分和信号转换部分，所述信号识别部分包括能与外泌体PD-L1结合的适体，所述适体上含有一段被封闭的引物序列，外泌体PD-L1与适体结合，使引物暴露；所述信号转换部分为：所述引物与发夹结合触发级联引物交换反应，生成产物，所述产物与硫黄素ThT结合产生荧光，实现外泌体PD-L1的检测。/n

【技术特征摘要】
1.一种检测外泌体PD-L1的荧光传感器，其特征在于，包括外泌体PD-L1、信号识别部分和信号转换部分，所述信号识别部分包括能与外泌体PD-L1结合的适体，所述适体上含有一段被封闭的引物序列，外泌体PD-L1与适体结合，使引物暴露；所述信号转换部分为：所述引物与发夹结合触发级联引物交换反应，生成产物，所述产物与硫黄素ThT结合产生荧光，实现外泌体PD-L1的检测。


2.根据权利要求1所述的荧光传感器，其特征在于：所述适体为适体AP，其核苷酸序列为：
5′-ACAGGTTCTGGGGGGTGGGTGGGGAACCTGTTAACAGGTTCCCC-3′(SEQIDNO.1)。
和/或，所述适体包含的引物选自引物1或引物2中的至少一种，所述引物1的核苷酸序列为：5′-GGTTCCCC-3′(SEQIDNO.2)，所述引物2的核苷酸序列为：5′-TCATCTTCTTCATTGAAGATGAC-3′(SEQIDNO.3)；
和/或，所述发夹选自发夹A与发夹B、发夹C与发夹D中的至少一种组合；所述发夹A的核苷酸序列为：
5′-TTAGGGCCCGGTTTTCCGGGCCCTAACGGGGAACGInvdT-3′(SEQIDNO.4)；
所述发夹B的核苷酸序列为：
5′-TTAGGGCCCGGTTTTCCGGGCCCTAACCCTAACCInvdT-3′(SEQIDNO.5)；
所述发夹C的核苷酸序列为：
5′-TTAGGGCCCGGTTTTCCGGGCCCTAACGTCATCTTCInvdT-3′(SEQIDNO.6)；
所述发夹D的核苷酸序列为：
5′-TTAGGGCCCGGTTTTCCGGGCCCTAACGGGGAACGInvdT-3′(SEQIDNO.7)；
和/或，所述产物为具有TTTAGGG重复序列域的长分支链。


3.根据权利要求2所述的荧光传感器，其特征在于：所述荧光传感器为单支级联引物交换反应(PER)体系，包括外泌体PD-L1、适体、发夹A、发夹B；
和/或，所述荧光传感器为分支级联引物交换反应(PER)体系，包括外泌体PD-L1、适体、引物2、发夹A、发夹B、发夹C、发夹D。


4.根据权利要求1-3任一项所述的检测外泌体PD-L1的荧光传感器的制备方法，其特...

【专利技术属性】
技术研发人员：丁世家，李新雨，陈奕蓉，
申请(专利权)人：重庆医科大学，
类型：发明
国别省市：重庆;50