本发明专利技术公开了一株以乳酸为碳源的非脱羧勒克菌NJ22及其应用，该利用乳酸发酵产生乙酸和甘油的非脱羧勒克菌NJ22，其保藏号为CICC 25025。该菌株16S rDNA序列如SEQ ID NO.1所示。本发明专利技术筛选获得的利用乳酸发酵产生乙酸和甘油的非脱羧勒克菌，该菌株以乳酸为唯一碳源，进行发酵，发酵产物为乙酸和甘油。该菌株可以作为白酒发酵菌剂，利用白酒发酵后期产生的乳酸发酵产生乳酸和甘油，可以达到降低白酒中乳酸的作用，同时该菌株发酵产生的甘油可调和白酒的各种香气，增进白酒的绵软性和浓厚感。
【技术实现步骤摘要】
一株以乳酸为碳源的非脱羧勒克菌NJ22及其应用
本专利技术涉及微生物
，特别涉及浓香型窖泥中一株以乳酸为碳源，代谢产生甘油的非脱羧勒克菌NJ22。技术背景在白酒酿造过程中，在微生物提供的多种酶作用下，高粱中的淀粉首先被水解成葡萄糖，葡萄糖再经过糖酵解途径生成丙酮酸。在无氧条件下，酵母菌利用丙酮酸发酵产生酒精。在浓香型白酒发酵过程中，乳酸菌混入入窖的料醅后，利用糖类经糖酵解途径生成的丙酮酸，在乳酸脱氢酶作用下生成乳酸。有些乳酸菌还同时生成少量的乙酸、乙醇、丙酸、丁酸、丙酮酸、CO2、H2等物质。在发酵后期，酒醅中乳酸菌含量增加，产生大量乳酸，导致白酒中乳酸和乳酸乙酯的含量增高，酒的香气较短淡，主体香受抑，香味失调，使白酒呈现明显的酸涩感，降低白酒的品质。针对这种状况，比较提倡的做法是“增己降乳”或“增乙降乳”，即适当增加浓香型白酒中己酸乙酯或乙酸乙酯的质量浓度，降低乳酸乙酯的质量浓度。乳酸乙酯性质稳定，不易分解，要降解乳酸乙酯必须降低其前体物质乳酸。乳酸降解菌也称降乳菌，是指能够利用乳酸作为碳源或者电子受体的微生物，这类菌可以利用乳酸生成乙酸、丙酸、丁酸等香气前体物质，进而合成多种重要的酯类物质，增加白酒中的香气成分。现有技术中，公开号为CN110317762A一株产蛋白酶的聚乳酸(PLA)降解菌，该技术是从山东潍坊某铺设聚乳酸/聚对苯二甲酸己二酸丁二酯(PLA/PBAT)地膜的土壤中分离筛选出一株产蛋白酶的聚乳酸降解菌-假单胞菌，此菌产降解PLA的蛋白酶，且该菌具有良好的pH耐受性，同时具备良好的降解PLA的能力。该假单胞菌及其蛋白酶能够用作酶制剂、生物菌剂和生物强化剂应用于环境中PLA及PLA基可生物降解材料的环境修复，具有良好的应用价值。另一方面，丙三醇(甘油)则是蒸馏白酒中常见的添加剂，纯甘油为糖浆状液体，味甜而性粘。甘油在酒中能增进绵软性，有浓厚感，起调和酒样、平衡各种香气的作用。同时，可改善酒的甜度。因而如果发现以乳酸为碳源，代谢产生甘油的菌株，就能够实现降解乳酸的同时改善酒的品质。因而该设想的实现对酿酒工业来说是一项十分有意义的创新。
技术实现思路
本专利技术的目的：提供一株可以利用乳酸发酵产生乙酸和甘油的非脱羧勒克菌NJ22及其在酿酒工业中的应用。本专利技术是这样实现的：利用乳酸发酵产生乙酸和甘油的非脱羧勒克菌NJ22，其保藏号为CICC25025。该菌株16SrDNA序列如SEQIDNO.1所示。本专利技术所提供的细菌是非脱羧勒克菌(Leclerciaadecarboxylata)NJ22，所述菌株已于2020年11月30日保存于中国工业微生物菌种保藏管理中心(CICC)，地址为中国北京，保藏号为CICC25025。本专利技术的这种菌株经形态学特征、生理生化特性、16SrDNA序列分析鉴定为非脱羧勒克菌，该菌株在牛肉膏蛋白胨固体平板形成圆形或近似圆形的微黄色菌落，菌落湿润凸起，有光泽，表面光滑，边缘整齐，不粘稠，易挑取。通过生理生化特性测定，该菌革兰氏染色为阴性，糊精、D-麦芽糖、D-海藻糖、D-纤维二糖、龙胆二糖、蔗糖、D-松二糖、水苏糖、蜜二糖、β-甲酰-D-葡糖苷、D-水杨苷、N-乙酰-D-葡糖胺、N-乙酰-β-D-甘露糖胺、N-乙酰-D-半乳糖胺、N-乙酰神经氨酸、α-D-葡糖、D-甘露糖、D-果糖、D-半乳糖、3-甲酰葡糖、D-果糖、L-果糖、L-鼠李糖、肌苷、D-山梨醇、D-甘露醇、D-阿拉伯醇、肌醇、甘油、D-葡糖-6-磷酸、D-果糖-6-磷酸、D-天冬氨酸、D-丝氨酸、明胶、e氨基乙酰-L-脯氨酸、L-丙氨酸、L-精氨酸、L-天冬氨酸、L-谷氨酸、L-组胺、L-焦谷氨酸、L-丝氨酸、D-半乳糖醛酸、L-半乳糖醛酸内酯、D-葡糖酸、D-葡糖醛酸、葡糖醛酰胺、粘酸、奎宁酸、糖质酸、丙酮酸甲酯、D-乳酸甲酯、L-乳酸、柠檬酸、α-酮-戊二酸、D-苹果酸、L-苹果酸、溴-丁二酸、吐温40、γ-氨基-丁酸、α-羟基-丁酸、β-羟基-D，L丁酸、α-酮-丁酸、乙酰乙酸、丙酸、乙酸、甲酸反应为阳性，蜜三糖、α-D-乳糖、果胶、p-羟基-苯乙酸反应为阴性。能够在耐受8％NaCl、1％乳酸钠、梭链孢酸、D-丝氨酸、林肯霉素、盐酸胍、硫酸四癸钠、万古霉素、四唑紫、四唑蓝、萘啶酮酸、氯化锂、亚碲酸钾、氨曲南、丁酸钠、溴酸钠。经16SrDNA鉴定(GenBank登录号：MW079903)，该菌株为非脱羧勒克菌。本专利技术筛选获得的利用乳酸发酵产生乙酸和甘油的非脱羧勒克菌，该菌株以乳酸为唯一碳源，进行发酵，发酵产物为乙酸和甘油。该菌株可以作为白酒发酵菌剂，利用白酒发酵后期产生的乳酸发酵产生乳酸和甘油，可以达到降低白酒中乳酸的作用，同时该菌株发酵产生的甘油可调和白酒的各种香气，增进白酒的绵软性和浓厚感。附图说明图1为为色谱质谱测定发酵产物图；图2为色谱质谱测定发酵产物为乙酸；图3为色谱质谱测定发酵产物为甘油。具体实施方式下面结合实施例对本专利技术作进一步说明，但不作为对本专利技术的任何限制。本专利技术的实施例1：乳酸利用菌NJ22的分离与鉴定(1)乳酸利用菌NJ22的分离与筛选称取1g窖泥样品加入到改良Lu-Ye液体培养基(乳酸1g/L；(NH4)2SO42g/L；Na2HPO4·12H2O14.3g/L；KH2PO43g/L；MnSO4·H2O0.28mg/L；FeSO4·7H2O0.3mg/L；MgSO4·7H2O0.06mg/L；CaCl21mg/L；CuSO40.05mg/L；H3BO30.05mg/L)中，静置培养48h，对乳酸利用菌进行富集；将富集菌液进行稀释逐级稀释，选用10-1，10-2，10-3三个浓度梯度，吸取100uL稀释液，涂布在改良Lu-Ye固体培养基上；将培养皿倒置于培养箱中培养，32℃，3～5天。(2)纯化挑取培养皿上的单菌落，在改良Lu-Ye培养基上，用三划线法进行纯化，连续纯化三次后，获得纯种菌株。将获得的纯种菌株，同时做斜面保藏和甘油管保藏。(3)菌株鉴定1)乳酸利用菌NJ22的形态学鉴定：将处于对数生长期，且菌落大小稳定的乳酸利用菌NJ22进行单菌落状态描述，主要包括菌落的大小、颜色、透明度、湿润度、菌落表面状态、菌落边缘状态。结果表明：乳酸利用菌NJ22在牛肉膏蛋白胨固体平板形成圆形或近似圆形的微黄色菌落，菌落湿润凸起，有光泽，表面光滑，边缘整齐，不粘稠，易挑取。2)生理生化特征分析参考《微生物学实验》(沈萍，范秀容，李广武.微生物学实验(第三版).北京：高等教育出版社，1999.)和《常见细菌系统鉴定手册》(东秀珠，蔡妙英.常见细菌系统鉴定手册.北京：科学出版社，2011.)测定乳酸利用菌NJ22的生理生化特征。测定结果显示：该菌革兰氏染色为阴性，糊精、D-麦芽糖、D-海藻糖、D-纤维二糖、龙胆二糖、蔗糖、D-松二糖、水苏糖、蜜二糖、β-甲酰-D-葡糖苷、D-水杨苷、N-乙酰-D-葡糖胺、N-乙酰本文档来自技高网...
【技术保护点】
1.一株以乳酸为碳源的非脱羧勒克菌NJ22，其特征在于：该菌株是利用乳酸发酵产生甘油的非脱羧勒克菌，其保藏号为CICC 25025。/n
【技术特征摘要】
1.一株以乳酸为碳源的非脱羧勒克菌NJ22，其特征在于：该菌株是利用乳酸发酵产生甘油的非脱羧勒克菌，其保藏号为CICC25025。
2.根据权利要求1所述的一株以乳酸为碳源的非脱羧勒克菌NJ22，其特征在于：该菌株16SrDNA序列如SEQIDNO.1所示。
3.含有权利要求1所述的以乳酸为碳源的非脱羧勒克菌NJ22的生物液体菌剂。
4.含有权利要求1所述的以乳酸为碳源的非脱羧勒克菌NJ22的生物固体菌剂。
5.含有权利要求1所述的以乳酸为碳源的非脱羧勒克菌NJ22作为白酒发酵菌剂在酿酒中的应用。
6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：以乳酸为碳源的非脱羧勒克菌NJ22作为白酒发酵菌剂，利用白酒发酵后期产生的乳酸发酵产生乙酸和甘油，达到降低白酒中乳酸、增加白酒中乙酸的作用，同时该菌株发酵产生的甘油能够调和白酒的各种香气，增进白酒的绵软性和浓厚感。
7.一种采用如权利要求...
【专利技术属性】
技术研发人员：王新叶，赵亮，江璐，
申请(专利权)人：茅台学院，
类型：发明
国别省市：贵州;52
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