磷酸戊糖变位酶突变体及其在构建高产核苷的枯草芽孢杆菌中的应用制造技术

本发明专利技术涉及生物工程领域，具体涉及一种磷酸戊糖变位酶突变体及其在构建高产核苷的枯草芽孢杆菌中的应用。本发明专利技术发现磷酸戊糖变位酶第159位(丝氨酸突变为苯丙氨酸)和第336位(组氨酸突变为酪氨酸)的突变对在核苷积累中起到了主要作用，利用该发现可以构建和筛选高产核苷的枯草芽孢杆菌，有利于提高核苷的产量，为核苷的工业化生产奠定了基础。

【技术实现步骤摘要】
磷酸戊糖变位酶突变体及其在构建高产核苷的枯草芽孢杆菌中的应用
本专利技术涉及生物工程领域，具体涉及一种磷酸戊糖变位酶突变体及其在构建高产核苷的枯草芽孢杆菌中的应用。
技术介绍
基因工程菌以细菌作为宿主菌优势明显，如发酵周期短、原料要求简单、基因工程技术成熟等。目前，微生物发酵是生产核苷主要的方法，所用生产菌主要是芽孢杆菌类，包括解淀粉芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌及短小芽孢杆菌等。芽孢杆菌类作为核苷的出发菌株，其优势是磷酸戊糖途径比较活跃，嘌呤核苷磷酸化酶活力低。在芽孢杆菌属中，包括枯草芽孢杆菌在内的许多菌株具有可靠的安全性。传统菌株选育发现，芽孢杆菌的突变株能够过量合成叶酸、腺苷、肌苷、鸟苷、核黄素等一系列嘌呤途径代谢中间产物或该途径的衍生代谢产物，成为选育高产核苷类代谢产物重要出发菌株。但目前生产上大多为芽孢诱变菌种，遗传背景不清晰，成本高、转化率低，造成工业化生产水平普遍偏低。因此，亟待通过代谢工程的手段，改善菌种性能。核苷是一类糖苷的总称。核苷是核酸和核苷酸的组成成分。核苷都是由D-核糖或D-Z-脱氧核糖与嘧啶碱或嘌呤碱缩合而成本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种磷酸戊糖变位酶突变体，其特征在于，其在序列如SEQ ID NO.1所示的磷酸戊糖变位酶的基础上发生以下至少一个突变：/n1)第159位丝氨酸突变为苯丙氨酸；/n2)第336位组氨酸突变为酪氨酸。/n

【技术特征摘要】
1.一种磷酸戊糖变位酶突变体，其特征在于，其在序列如SEQIDNO.1所示的磷酸戊糖变位酶的基础上发生以下至少一个突变：
1)第159位丝氨酸突变为苯丙氨酸；
2)第336位组氨酸突变为酪氨酸。


2.根据权利要求1所述的磷酸戊糖变位酶突变体，其特征在于，其同时发生了两个所述的突变。


3.根据权利要求1或2所述的磷酸戊糖变位酶突变体，其特征在于，所述磷酸戊糖变位酶突变体源于枯草芽孢杆菌；优选编码磷酸戊糖变位酶野生型的基因的核苷酸序列如SEQIDNO.2所示。


4.编码权利要求1-3中任一项所述的磷酸戊糖变位酶突变体的核酸。


5.权利要求1-3中任一项所述的磷酸戊糖变位酶突变体或权利要求4所述的核酸在以下任一方面的应用：
(1)构建高产核苷的枯草芽孢杆菌；
(2)筛选高产核苷的枯草芽孢杆菌。


6.一种枯草芽孢杆菌，其特征在于，其表达权利要求1-3中任一项所述的磷酸戊糖变位酶突变体；和/...

【专利技术属性】
技术研发人员：孙莹莹，胡丹，齐丹丹，李岩，
申请(专利权)人：廊坊梅花生物技术开发有限公司，
类型：发明
国别省市：河北;13