一种用于扩增脐带血造血干细胞的培养基制造技术

本发明专利技术公开了一种用于扩增脐带血造血干细胞的培养基，包括基础培养基和添加在基础培养基中以下组分：雷公藤内酯醇、P27抑制剂、改性纳米二氧化钛、干细胞因子、2‑巯基乙醇、L‑肉毒碱、尼克酰胺、亚油酸、IL‑2。本发明专利技术提供的用于扩增脐带血造血干细胞的培养基，为细胞增殖提供稳定的外部环境，其中培养基中的雷公藤内酯醇和P27抑制剂、改性纳米二氧化钛发挥协同作用促进脐带血造血干细胞的体外扩增，刺激细胞生长，提高细胞的增殖能力，并且能保持细胞活性，避免细胞凋亡，极大地提高了脐带血造血干细胞的体外增殖效率。

【技术实现步骤摘要】
一种用于扩增脐带血造血干细胞的培养基
本专利技术涉及一种培养基，尤其涉及一种用于扩增脐带血造血干细胞的培养基。
技术介绍
造血干细胞(hematopoieticstemcells,HSCs)具有自我更新细胞增殖和分化到各种血液组织的能力。造血干细胞对于血液系统的发育、维持和再生发挥着至关重要的作用。通常情况下，造血干细胞在正常的血液系统中处于静息状态，但是一旦发生如移植器官过程中的血液损失和感染，造血干细胞被立即激活以发生快速造血的功能。大部分的造血干细胞处于细胞周期的G0期，大约每个月会更新一次，导致造血干细胞在体内的数量极少，大大的限制了造血干细胞在临床中的应用。骨髓、外周血和脐带血是造血干细胞的重要来源。与骨髓和外周血造血干细胞相比，脐带血造血干细胞更为原始，自我增殖能力最强，且脐带血具有富含更早期的造血干细胞、采集方便，造血半细胞免疫原性弱，对异源性抗原产生的抗体少，移植过程中不需要严格配型，成熟性T细胞较少，采集和保存容易，无肿瘤细胞污染，对供者无损伤和副作用等优点，因而，脐带血造血干细胞具有极大的临床应用价值。但是，造血干细本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种用于扩增脐带血造血干细胞的培养基，其特征在于，包括基础培养基和添加在基础培养基中以下组分：雷公藤内酯醇、P27抑制剂、改性纳米二氧化钛、干细胞因子、2-巯基乙醇、L-肉毒碱、尼克酰胺、亚油酸、IL-2；/n所述改性纳米二氧化钛的制备过程如下：/n（1）将棉花裁切后浸泡在75%乙醇中进行预处理，取出后经去离子水冲洗后烘干；/n（2）将烘干后的棉花送入碳化炉，在绝氧条件下进行碳化处理，得到碳纤维；/n（3）将钛酸丁酯溶于无水乙醇中加入抑制剂，再加入分散剂和去离子水，调节溶液pH至2.5-4.5，搅拌后得到二氧化钛溶胶；/n（4）将步骤（2）的碳纤维加入步骤（3）的二氧化钛溶胶中，充分吸附后...

【技术特征摘要】
1.一种用于扩增脐带血造血干细胞的培养基，其特征在于，包括基础培养基和添加在基础培养基中以下组分：雷公藤内酯醇、P27抑制剂、改性纳米二氧化钛、干细胞因子、2-巯基乙醇、L-肉毒碱、尼克酰胺、亚油酸、IL-2；
所述改性纳米二氧化钛的制备过程如下：
（1）将棉花裁切后浸泡在75%乙醇中进行预处理，取出后经去离子水冲洗后烘干；
（2）将烘干后的棉花送入碳化炉，在绝氧条件下进行碳化处理，得到碳纤维；
（3）将钛酸丁酯溶于无水乙醇中加入抑制剂，再加入分散剂和去离子水，调节溶液pH至2.5-4.5，搅拌后得到二氧化钛溶胶；
（4）将步骤（2）的碳纤维加入步骤（3）的二氧化钛溶胶中，充分吸附后取出碳纤维，用40%乙醇清洗后放入盛有去离子水的高压反应釜中，将高压反应釜置于烘箱中热处理后取出碳纤维，烘干得到负载在碳纤维上的改性纳米二氧化钛。


2.根据权利要求1所述用于扩增脐带血造血干细胞的培养基，其特征在于，以终浓度计，各组分的质量浓度为：雷公藤内酯15-25ng/mL、P27抑制剂3-5ng/mL、改性纳米二氧化钛5-10ng/mL、干细胞因子20-30ng/mL、2-巯基乙醇1-5ng/mL、L-肉毒碱12-18ng/mL、尼克酰胺1-5μg/mL、亚油酸20-30ng/mL、IL-25-10ng/mL。


3.根据权利要求2所述用于扩增脐带血造血干细胞的培养基，其特征在于，以终浓度计，各组分的质量浓度为：雷公藤内酯20ng/mL、P27抑制剂4ng...

【专利技术属性】
技术研发人员：陈友林，陈三飞，鄂国立，
申请(专利权)人：郑州优倍得生物科技有限公司，
类型：发明
国别省市：河南;41