一种氧化磷酸化通路缺陷的DBA细胞模型及其构建方法技术

本发明专利技术公开了一种氧化磷酸化通路缺陷的DBA细胞模型及其构建方法，属于细胞模型构造技术领域。该构建方法包括在红系诱导分化体系中抑制线粒体氧化磷酸化通路的步骤。具体包括以下步骤：对HPCs进行扩增培养；对步骤(1)所得细胞向红系方向进行定向诱导分化，在分化体系中加入氧化磷酸化通路抑制剂，连续培养，即获得所述氧化磷酸化通路缺陷的DBA细胞模型。本发明专利技术所建立的DBA细胞模型可用于进一步挖掘DBA的其他遗传学异常。该模型不需要实验动物参与，成本低、操作简便、建模周期短、可重复性高，可以简单快速开展相关实验研究，以及分析药物的治疗贫血功效，有利于贫血药物的研发。

【技术实现步骤摘要】
一种氧化磷酸化通路缺陷的DBA细胞模型及其构建方法
本专利技术属于细胞模型构造
，具体涉及一种氧化磷酸化通路缺陷的DBA细胞模型及其构建方法。
技术介绍
先天性纯红细胞再生障碍性贫血(Diamond-Blackfananemia，DBA)是一种罕见的以红系造血衰竭为特点的先天性骨髓衰竭综合征。红细胞发育不良是患者主要的血液学特征，主要表现为大红细胞贫血、红系祖细胞减少、网织红细胞减少、部分患者红细胞内腺苷脱氨酸酶明显上升、血清促红细胞生成素升高等特征。此外，还有约50％的患者伴有不同程度的身材矮小、颅面畸形等身体缺陷，并伴有恶性肿瘤易感性增高的风险。临床上，糖皮质激素治疗是该疾病的首选治疗方案，其他可行的治疗方案还有输血。造血干细胞移植是当前唯一可以治愈DBA的治疗手段，但寻找合适的配型仍有相当大的难度。现在最主要的临床问题是，不同的DBA患者对糖皮质激素(比如泼尼松)的敏感程度差异很大，部分患者需要持续用药，而部分患者对药物完全没有反应，且部分患者长时间用药后易于出现感染并发症和铁过载的问题，这可能是由于不同致病因素的DBA患者间的异质本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种氧化磷酸化通路缺陷的DBA细胞模型的构建方法，其特征在于，包括在红系诱导分化体系中抑制线粒体氧化磷酸化通路的步骤，所述模型为具有氧化磷酸化通路缺陷的DBA细胞模型。/n

【技术特征摘要】
1.一种氧化磷酸化通路缺陷的DBA细胞模型的构建方法，其特征在于，包括在红系诱导分化体系中抑制线粒体氧化磷酸化通路的步骤，所述模型为具有氧化磷酸化通路缺陷的DBA细胞模型。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)对HPCs进行扩增培养；
(2)对步骤(1)所得细胞向红系方向进行定向诱导分化，在分化体系中加入氧化磷酸化通路抑制剂，连续培养，即获得所述DBA氧化磷酸化模型。


3.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，所述HPCs的来源选自人脐血、骨髓、外周血中的至少一种。


4.根据权利要求2所述的方法，其特征在于，步骤(1)中所述扩增培养具体为：在增殖培养基中进行，所述的增殖培养基为含有SCF、Flt3Ligand、TPO和双抗的SFEMII培养基，细胞密度为5×104-1×105个/mL，接种于孔板中，置于细胞培养箱培养，3-4天更换次培养基，增殖3-7天，进一步优选为7天；
步骤(2)中，所述定向诱导分化具体为：在分化培养基中进行，所述的分化培养基为含有SCF、IL3、EPO和双抗的SFEMII培养基，细胞密度为5×104-1×10...

【专利技术属性】
技术研发人员：方向东，张昭军，肖茹丹，张立娟，阮修艳，
申请(专利权)人：中国科学院北京基因组研究所国家生物信息中心，
类型：发明
国别省市：北京;11