一种组织干细胞分离和功能评价系统技术方案

本发明专利技术公开了一种组织干细胞分离和功能评价系统，包括以下步骤：将公鼠与母鼠放置于一起使其交配，将受精的母鼠静养几日，取得受精小鼠体内的卵母细胞，将获得的卵母细胞进行重新编程、激活和体外培养以形成胚泡；通过将胚泡培养完毕后，从胚泡中除去透明带或其部分，再从得到的胚泡除去滋养层分离内细胞团，小白鼠的基因序列和人类的差不多，它的全基因组和人类的相似度极高，很多人类难以治愈的疾病可以在小白鼠身上找到相似性状，从而加以实验发现治病基因，从而更容易得到组织干细胞分离后个成分的功能。

【技术实现步骤摘要】
一种组织干细胞分离和功能评价系统
本专利技术属于干细胞分离
，具体涉及一种组织干细胞分离和功能评价系统。
技术介绍
干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞，在一定条件下，它可以分化成多种功能细胞，根据干细胞所处的发育阶段分为胚胎干细胞和成体干细胞，根据干细胞发育潜能可分为三类：全能干细胞、多能干细胞和单能干细胞(专能干细胞)，干细胞是一种未充分分化，尚不成熟的细胞，具有再生各种器官和人体的潜在功能，医学界称为“万用细胞”。在现有技术中，细胞干细胞分离时多采用手动操作，难以精确控制生理盐水与干细胞原液的用量，手动操作造成操作环境一般不受控制，这样会影响分离出来的分离液不够纯，采用手动操作，导致分离效率低，并且容易出错，操作人员对于组织干细胞的离心提取一般都是采用人工逐次吸取不同深度的分离液，这种方式不能确保上清液提取干净，如若吸管插入较深，则会把下层沉淀物一同吸入，难以控制分离液的纯度，细胞分离效率较低，为此，我们提出一种组织干细胞分离和功能评价系统。
技术实现思路
本专利技术要解决的技术问题是克服现有的缺陷，提供一种组织干细胞分离和功能评价系统，以解决上述
技术介绍
中提出的在现有技术中，细胞干细胞分离时多采用手动操作，难以精确控制生理盐水与干细胞原液的用量，手动操作造成操作环境一般不受控制，这样会影响分离出来的分离液不够纯，采用手动操作，导致分离效率低，并且容易出错的问题。为实现上述目的，本专利技术提供如下技术方案：一种组织干细胞分离和功能评价系统，包括以下步骤：步骤一：将公鼠与母鼠放置于一起使其交配，将受精的母鼠静养几日，取得受精小鼠体内的卵母细胞，将获得的卵母细胞进行重新编程、激活和体外培养以形成胚泡；步骤二：通过使用5μM-15μM浓度的钙离子载体对卵母细胞进行激活，并随后使用1μM-5μM浓度的6-二甲基氨基嘌呤处理卵母细胞；步骤三：通过使用G1.2培养基和SNUnt-2两种不同的培养基实施体外培养，培养完毕后，从胚泡中除去透明带或其部分，再从得到的胚泡除去滋养层分离内细胞团；步骤四：将获得的胚泡放入离心装置内部进行离心处理，将离心获得的不同深度的干细胞分离液分别放入不同的培养皿内进行培养；步骤五：通过检测并筛选出具有特异性组织的干细胞，研究并记录其特异组织干细胞所具有的不同的功能特性；步骤六：再利用不同的特异性组织干细胞来扩增出有效的小分子化合物，并研究记录这些小分子化合物的功能特性，确定这些小分子化合物的特性后，参照多能干细胞，评价其形成微结构的能力；步骤七：建立不同生物模型，并移植这些干细胞进入这些生物模型中，通过对这些模型的观察与检测，初步确定进入不同模型中干细胞的功能，并进行功能上的评估；步骤八：再次建立不同的疾病生物模型，将干细胞移植入这些模型中，对干细胞能达到治疗疾病的方案和成果进行观察和确定；步骤九：最终建立两种以上通过组织干细胞及其形成结构移植治疗重大疾病的新方案。优选的，所述步骤一中的老鼠为刚成年的老鼠，交配后5天后进行卵母的提取，在将取出的胚胎放置于装有培养液的培养皿中进行培养。优选的，所述步骤二中使用的钙离子浓度为10μM，所述步骤二中使用的6-二甲基氨基嘌呤的浓度为2μM。优选的，所述步骤六中通过PCR扩增仪对组织干细胞进行扩增，随后纯化的小分子化合物再进行T克隆处理。优选的，所述T载体是一种突出端的载体，在酶的作用下，可以快速的、一步到位的把PCR产物直接插入到质粒载体的多克隆位点中。优选的，所述T载体是一种高效克隆PCR产物的专用质粒载体，为线性化载体，无需酶切可直接与具有PCR产物进行连接，得到相应的小分子化合物。与现有技术相比，本专利技术提供了一种组织干细胞分离和功能评价系统，具备以下有益效果：1、本专利技术通过将公鼠与母鼠放置于一起使其交配，将受精的母鼠静养几日，取得受精小鼠体内的卵母细胞，将获得的卵母细胞进行重新编程、激活和体外培养以形成胚泡，通过使用5μM-15μM浓度的钙离子载体对卵母细胞进行激活，并随后使用1μM-5μM浓度的6-二甲基氨基嘌呤处理卵母细胞，通过使用G1.2培养基和SNUnt-2两种不同的培养基实施体外培养，培养完毕后，从胚泡中除去透明带或其部分，再从得到的胚泡除去滋养层分离内细胞团，小白鼠的基因序列和人类的差不多，它的全基因组和人类的相似度极高，很多人类难以治愈的疾病可以在小白鼠身上找到相似性状，从而加以实验发现治病基因，从而更容易得到组织干细胞分离后个成分的功能；2、本专利技术通过将特异性组织干细胞扩增出来的小分子化合物，并研究记录这些小分子化合物的功能特性，确定这些小分子化合物的特性后，参照多能干细胞，评价其形成微结构的能力，建立不同生物模型，并移植这些干细胞进入这些生物模型中，通过对这些模型的观察与检测，初步确定进入不同模型中干细胞的功能，并进行功能上的评估，最终建立两种以上通过组织干细胞及其形成结构移植治疗重大疾病的新方案。附图说明附图用来提供对本专利技术的进一步理解，并且构成说明书的一部分，与本专利技术的实施例一起用于解释本专利技术，并不构成对本专利技术的限制，在附图中：图1为本专利技术提出的一种组织干细胞分离和功能评价系统的流程图。具体实施方式下面将结合本专利技术实施例中的附图，对本专利技术实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本专利技术一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本专利技术中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本专利技术保护的范围。本专利技术提供一种技术方案：一种组织干细胞分离和功能评价系统，包括以下步骤：步骤一：将公鼠与母鼠放置于一起使其交配，将受精的母鼠静养几日，取得受精小鼠体内的卵母细胞，将获得的卵母细胞进行重新编程、激活和体外培养以形成胚泡；步骤二：通过使用5μM-15μM浓度的钙离子载体对卵母细胞进行激活，并随后使用1μM-5μM浓度的6-二甲基氨基嘌呤处理卵母细胞；步骤三：通过使用G1.2培养基和SNUnt-2两种不同的培养基实施体外培养，培养完毕后，从胚泡中除去透明带或其部分，再从得到的胚泡除去滋养层分离内细胞团；步骤四：将获得的胚泡放入离心装置内部进行离心处理，将离心获得的不同深度的干细胞分离液分别放入不同的培养皿内进行培养；步骤五：通过检测并筛选出具有特异性组织的干细胞，研究并记录其特异组织干细胞所具有的不同的功能特性；步骤六：再利用不同的特异性组织干细胞来扩增出有效的小分子化合物，并研究记录这些小分子化合物的功能特性，确定这些小分子化合物的特性后，参照多能干细胞，评价其形成微结构的能力；步骤七：建立不同生物模型，并移植这些干细胞进入这些生物模型中，通过对这些模型的观察与检测，初步确定进入不同模型中干细胞的功能，并进行功能上的评估；步骤八：再次建立不同的疾病生物模型，将干细胞移植入这些模型中，对干细胞能达到治疗疾病的方案和成果进行本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种组织干细胞分离和功能评价系统，其特征在于：包括以下步骤：/n步骤一：将公鼠与母鼠放置于一起使其交配，将受精的母鼠静养几日，取得受精小鼠体内的卵母细胞，将获得的卵母细胞进行重新编程、激活和体外培养以形成胚泡；/n步骤二：通过使用5μM-15μM浓度的钙离子载体对卵母细胞进行激活，并随后使用1μM-5μM浓度的6-二甲基氨基嘌呤处理卵母细胞；/n步骤三：通过使用G1.2培养基和SNUnt-2两种不同的培养基实施体外培养，培养完毕后，从胚泡中除去透明带或其部分，再从得到的胚泡除去滋养层分离内细胞团；/n步骤四：将获得的胚泡放入离心装置内部进行离心处理，将离心获得的不同深度的干细胞分离液分别放入不同的培养皿内进行培养；/n步骤五：通过检测并筛选出具有特异性组织的干细胞，研究并记录其特异组织干细胞所具有的不同的功能特性；/n步骤六：再利用不同的特异性组织干细胞来扩增出有效的小分子化合物，并研究记录这些小分子化合物的功能特性，确定这些小分子化合物的特性后，参照多能干细胞，评价其形成微结构的能力；/n步骤七：建立不同生物模型，并移植这些干细胞进入这些生物模型中，通过对这些模型的观察与检测，初步确定进入不同模型中干细胞的功能，并进行功能上的评估；/n步骤八：再次建立不同的疾病生物模型，将干细胞移植入这些模型中，对干细胞能达到治疗疾病的方案和成果进行观察和确定；/n步骤九：最终建立两种以上通过组织干细胞及其形成结构移植治疗重大疾病的新方案。/n...

【技术特征摘要】
1.一种组织干细胞分离和功能评价系统，其特征在于：包括以下步骤：
步骤一：将公鼠与母鼠放置于一起使其交配，将受精的母鼠静养几日，取得受精小鼠体内的卵母细胞，将获得的卵母细胞进行重新编程、激活和体外培养以形成胚泡；
步骤二：通过使用5μM-15μM浓度的钙离子载体对卵母细胞进行激活，并随后使用1μM-5μM浓度的6-二甲基氨基嘌呤处理卵母细胞；
步骤三：通过使用G1.2培养基和SNUnt-2两种不同的培养基实施体外培养，培养完毕后，从胚泡中除去透明带或其部分，再从得到的胚泡除去滋养层分离内细胞团；
步骤四：将获得的胚泡放入离心装置内部进行离心处理，将离心获得的不同深度的干细胞分离液分别放入不同的培养皿内进行培养；
步骤五：通过检测并筛选出具有特异性组织的干细胞，研究并记录其特异组织干细胞所具有的不同的功能特性；
步骤六：再利用不同的特异性组织干细胞来扩增出有效的小分子化合物，并研究记录这些小分子化合物的功能特性，确定这些小分子化合物的特性后，参照多能干细胞，评价其形成微结构的能力；
步骤七：建立不同生物模型，并移植这些干细胞进入这些生物模型中，通过对这些模型的观察与检测，初步确定进入不同模型中干细胞的功能，并进行功能上的评估；
步骤八：再次建立不同的疾病生物模型，将干细胞移植入这些...

【专利技术属性】
技术研发人员：彭伟群，曹小伍，曹得明，李禅，华国明，
申请(专利权)人：杭州憶盛医疗科技有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33