一种核酸提取方法及其用途技术

本发明专利技术涉及一种核酸提取方法，所述方法包括：a.根据核酸上的目的核酸序列设计探针；b.将所述探针与固相载体连接，得到捕获载体；c.将所述捕获载体与样品混合，通过温度变化，使所述捕获载体与样品中的靶核酸结合；d.将捕获载体从样品中分离，通过温度变化将核酸与捕获载体解离，收集核酸。其中，靶核酸可以是cfDNA、基因组DNA或RNA。本发明专利技术采用杂交法对样品中的靶核酸进行提取，能够实现特定基因片段的靶向富集和提取，有利于降低后续的检测背景；通过调整野生型或者突变型探针的比例，使提取产物中突变型基因片段的比例上升，便于后续对低比例突变的检测，可大大提高检测灵敏度；并且本发明专利技术方法操作过程简单，有利于自动化操作。

【技术实现步骤摘要】
一种核酸提取方法及其用途
本专利技术涉及生物
，具体而言，本专利技术涉及一种核酸提取方法，特别是涉及一种低丰度突变核酸的提取方法。
技术介绍
提取生物样本中的核酸对目的核酸序列进行检测在产前诊断、肿瘤诊断筛查和预后检测以及免疫性疾病等非肿瘤类疾病的病情分析与疗效观察等领域具有重要意义，但相关样本中核酸的丰度一般较低，需要对其进行提取纯化。目前市场上多数核酸纯化试剂盒是通过硅胶膜离心柱或者表面经过特殊标记处理的磁珠进行纯化。该纯化原理是在高盐和低pH的溶液条件下，硅胶膜和磁珠能专一性的吸附核酸，由此将样本中的核酸吸附到硅胶膜或者磁珠之类的固相载体上；然后使用含有胍盐（盐酸胍或者异硫氰酸胍）的酒精溶液进行洗涤，去除固相载体上的蛋白质、脂质和盐离子；由于在低盐以及较高的pH溶液条件下，结合在硅胶膜或者磁珠上的核酸会与它们分离，最后用去离子水或TEbuffer（Tris-EDTA）进行洗脱，即得。如果目的核酸在样品中含量相对较少，为了提高核酸提取产量，一般在提取试剂盒中准备CarrierRNA，在提取的过程中将CarrierRNA加入到样本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种核酸提取方法，所述方法包括：/na. 根据核酸上的目的核酸序列设计探针；/nb.将所述探针与固相载体连接，得到捕获载体；/nc.将所述捕获载体与样品混合，通过温度变化，使所述捕获载体与样品中的靶核酸结合；/nd.将捕获载体从样品中分离，通过温度变化将核酸与捕获载体解离，收集核酸。/n

【技术特征摘要】
1.一种核酸提取方法，所述方法包括：
a.根据核酸上的目的核酸序列设计探针；
b.将所述探针与固相载体连接，得到捕获载体；
c.将所述捕获载体与样品混合，通过温度变化，使所述捕获载体与样品中的靶核酸结合；
d.将捕获载体从样品中分离，通过温度变化将核酸与捕获载体解离，收集核酸。


2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述核酸为cfDNA、基因组DNA或RNA。


3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述探针包括DNA探针和/或PNA探针。


4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述DNA探针包括突变型DNA探针和野生型DNA探针；所述PNA探针包括突变型PNA探针和野生型PNA探针。


5.根据权利要求4所述的方法，其特征在...

【专利技术属性】
技术研发人员：魏宏泉，孙相鑫，
申请(专利权)人：拓原合壹宁波生物技术有限公司，
类型：发明
国别省市：浙江;33