一种胸腺肽β4的制备方法技术

本发明专利技术提供一种胸腺肽β4的制备方法，其包括：应用Fomc/tBu方法，采用固相和液相相结合的方式在树脂上线性缩合合成胸腺肽β4，其中，胸腺肽β4氨基酸序列中的Lys

【技术实现步骤摘要】
一种胸腺肽β4的制备方法
本专利技术涉及药物制备
，特别涉及一种胸腺肽β4的制备方法。
技术介绍
公开该
技术介绍
部分的信息仅仅旨在增加对本专利技术的总体背景的理解，而不必然被视为承认或以任何形式暗示该信息构成已经成为本领域一般技术人员所公知的现有技术。胸腺肽β4最初是从牛胸腺中分离提取得到的一种肌动蛋白隐蔽蛋白，具有很高的序列保守性。胸腺肽β4在生物体内具有重要的生理学功能，例如：能够促进血管生成和促进人血管内皮细胞迁移，具有促进创伤愈合、修复角膜、抑制炎症反应、防脱发、肿瘤调控和心脏保护的功能。胸腺肽β4由43个氨基酸残基组成N端Ser的氨基被乙酰化的多肽，分子式为C212H350N56O78S，分子量为4963.5，其氨基酸序列为：Ac-Ser43-Asp42-Lys41-Pro40-Asp39-Met38-Ala37-Glu36-Ile35-Glu34-Lys33-Phe32-Asp31-Lys30-Ser29-Lys28-Leu27-Lys26-Lys25-Thr24-Glu23-Thr22-Gln21-Glu20本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种胸腺肽β4的制备方法，其包括：应用Fomc/tBu方法，采用固相和液相相结合的方式在树脂上线性缩合合成胸腺肽β4，其中，胸腺肽β4氨基酸序列中的Lys

【技术特征摘要】
1.一种胸腺肽β4的制备方法，其包括：应用Fomc/tBu方法，采用固相和液相相结合的方式在树脂上线性缩合合成胸腺肽β4，其中，胸腺肽β4氨基酸序列中的Lys30、Asp31和Lys33以三肽、二肽片段的形式进行缩合以引入序列，树脂采用HMP-氨基树脂。


2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，将Lys30、Asp31以三肽片段Fmoc-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Ser(tBu)-OH的形式进行缩合，将Lys33以二肽片段Fmoc-Lys(Boc)-Phe-OH的形式进行缩合。


3.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于，胸腺肽β4氨基酸序列中的重复二肽单位Ile10-Glu9和Ile35-Glu34分别以二肽片段Fmoc-Ile-Glu(OtBu)-OH的形式进行缩合引入序列；
胸腺肽β4氨基酸序列中的重复二肽单位Glu12-Thr11和Glu23-Thr22分别以二肽片段Fmoc-Glu(OtBu)-Thr(tBu)-OH的形式进行缩合引入序列；
胸腺肽β4氨基酸序列中的重复二肽单位Gln8-Glu7和Gln21-Glu20分别以二肽片段Fmoc-Gln(Trt)-Glu(OtBu)-OH的形式进行缩合引入序列。


4.根据权利要求1至3中任一项所述的制备方法，其特征在于，所述方法包括：
采用液相合成法合成二肽片段Fmoc-Gln(Trt)-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Ile-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-Phe-OH和三肽片段Fmoc-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Ser(tBu)-OH；
将Fmoc-Ser(tBu)-OH与HMP-氨基树脂进行缩合反应I，得Fmoc-Ser(tBu)-HMP-氨基树脂，并封闭；
脱除Fmoc-Ser(tBu)-HMP-氨基树脂的Fmoc保护基，按照胸腺肽β4的氨基酸序列依次将下述Fmoc保护的氨基酸和肽片段加入至脱除Fmoc保护的树脂中进行缩合反应II：
Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Gly-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Gln(Trt)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Ile-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Asn(Trt)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Gln(Trt)-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Thr(tBu)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Leu-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Ser(tBu)-OH、Fmoc-Lys(Boc)-Phe-OH、Fmoc-Ile-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Glu(OtBu)-OH、Fmoc-Ala-OH、Fmoc-Met-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Pro-OH、Fmoc-Lys(Boc)-OH、Fmoc-Asp(OtBu)-OH、Fmoc-Ser(tBu)-OH；
按顺序将第一个Fmoc保护的氨基酸Fmoc-Glu(OtBu)-OH加至脱除Fmoc保护的树脂中进行缩合反应II后，继续对树脂进行脱Fmoc处理，然后按顺序加入第二个Fmoc保护的Fmoc-Gly-OH至脱除Fmoc保护的树脂中进行缩合反应II，然后依次重复对树脂进行脱Fmoc处理，然后按顺序加入后续Fmoc保护的氨基酸或肽片段的操作直至将最后的Fmoc-Ser(tBu)-OH缩合引入；
其中，参与缩合的Fmoc保护的氨基酸或肽片段在加至脱除Fmoc保护的树脂前均进行活化处理。


5.根据权利要求4所述的制备方法，其特征在于，按照胸腺肽β4的氨基酸序列依次将Fmoc保护的氨基酸或肽片段缩合引入后对N端Ser氨基进行乙酰化，然后进行肽树脂进行收缩得到胸腺肽β4全保护肽树脂，其结构为：
Ac-Ser(tBu)-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Pro-Asp(OtBu)-Met-Ala-Glu(OtBu)-Ile-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Phe-Asp(OtBu)-Lys(Boc)-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Leu-Lys(Boc)-Lys(Boc)-Thr(tBu)-Glu(OtBu)-Thr(tBu)-Gln(Trt)-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Asn(Trt)-Pro-Leu-Pro-Ser(tBu)-Lys(Boc)-Glu(OtBu)-Thr(tBu)-Ile-Glu(OtBu)-Gln(Trt)-Glu(OtBu)-Lys(Boc)-Gln(Trt)-Ala-Gly-Glu(OtBu)-Ser(tBu)-HMP-氨基树脂。


6.根据权利要求4所述的方法，其特征在于，所述Fmoc-Gln(Trt)-Glu(OtBu)-OH的合成方法包括：将Fmoc-Gln(Trt)-OH和HOSu在DCC存在时生成Fmoc-Gln(Trt)-OSu；将Fmoc-Gln(Trt)-O...

【专利技术属性】
技术研发人员：姬胜利，殷金岗，蒋康健，邢昊，
申请(专利权)人：润辉生物技术威海有限公司，
类型：发明
国别省市：山东;37