蒙药蒺藜乙醇提取物的制备方法及其应用技术

本发明专利技术公开了蒙药蒺藜乙醇提取物的制备方法及其应用，属于医药领域。本发明专利技术通过高脂饲料诱导大鼠高血糖模型，以灌胃给药的方式验证了蒺藜乙醇提取物能够降低高脂饲料诱导的高血糖症。实验结果显示，对于高脂饲料诱导的高血糖症，蒺藜乙醇提取物可改善代谢组分指标趋于正常值，提高抗氧化酶SOD、CAT、GSH‑Px指标，降低血清MDA指标，并且降低肝细胞凋亡率。表明蒺藜乙醇提取物能够通过抗氧化和降低肝细胞凋亡表达降血糖作用。本发明专利技术以代谢组学方法，筛选得到一组18个与蒺藜乙醇提取物相关的生物标志物，可在后续蒺藜乙醇提取物中有效成分的分离研究鉴定中发挥作用。

【技术实现步骤摘要】
蒙药蒺藜乙醇提取物的制备方法及其应用
本专利技术涉及医药领域，特别是涉及蒙药蒺藜乙醇提取物的制备方法及其应用。
技术介绍
糖尿病是一组以高血糖为特征的代谢性疾病。高血糖则是由于胰岛素分泌缺陷或其生物作用受损，或两者兼有引起。长期存在的高血糖，导致各种组织，特别是眼、肾、心脏、血管、神经的慢性损害、功能障碍。临床表现为多饮、多尿、多食和消，疲乏无力，肥胖等。降低或控制血糖是控制糖尿病发展的重要措施，目前临床上最直接的方式是通过胰岛素注射降低血糖，但其价格较贵，且给患者带来一定的痛苦。因此寻找成本低、效果好的口服降糖药物对糖尿病的防治十分必要。蒺藜(TribulusterrestrisL.)为蒺藜科蒺藜属一年生或多年生草本植物蒺藜的果实，蒙医称其为“亚蔓章古”,异名为“色玛”“色玛拉高”，分布广、易获得、价格低。蒺藜中含有蒺藜皂苷、黄酮类、多糖、生物碱和丰富的微量元素，目前尚未有以蒺藜乙醇提取物制备降血糖药物的相关报道。
技术实现思路
本专利技术的目的是蒙药蒺藜乙醇提取物的制备方法及其应用，以解决上述现有技术存在的问题，提供一种新的可用于制备降血糖药物的物质。为实现上述目的，本专利技术提供了如下方案：技术方案之一，提供了一种蒺藜乙醇提取物的制备方法，所述方法包括以下步骤：蒺藜粉浸泡2h，加10倍量95％乙醇，武火煮沸后，文火煎煮1h，收集上清液；药渣加8倍量95％乙醇，武火煮沸后，文火煎煮1h，收集上清液；药渣加6倍量95％乙醇，武火煮沸后，文火煎煮1h，收集上清液；合并3次上清液，回流浓缩，即得。技术方案之二，提供了一种根据所述的制备方法制备的蒺藜乙醇提取物。技术方案之三，提供了一种所述的蒺藜乙醇提取物在制备降血糖药物中的应用。技术方案之四，提供了一种所述的蒺藜乙醇提取物在制备抗氧化药物中的应用。技术方案之五，提供了一种所述的蒺藜乙醇提取物在制备抗肝细胞损伤的药物中的应用。技术方案之六，提供了一组血清生物标志物作为被检测对象在蒺藜乙醇提取物降血糖有效成分筛选中的应用，所述的生物标志物包括以下成分：胞嘧啶、甜菜碱、烟酰胺、胡椒酸、六氢吡啶-1-甲酸、L-(+)-赖氨酸、吡哆胺、半胱氨酸、吲哚乙酸、三甲基赖氨酸、Sn-甘油-3-磷酸胆碱、吡咯-2-羧酸、牛磺酸、b-胍基丙酸脂。本专利技术公开了以下技术效果：本专利技术提供了蒺藜乙醇提取物降糖作用的有效数据和实验结果。本专利技术通过高脂饲料诱导的大鼠高血糖模型，观察蒺藜乙醇提取物通过调节脂质代谢途径减轻高脂饲料诱导的高血糖症的作用及可能的分子机制。结果显示，对于高脂饲料诱导的高血糖症，蒺藜乙醇提取物可改善代谢组分指标趋于正常值，提高抗氧化酶SOD、CAT、GSH-Px指标，降低血清MDA指标，并且降低肝细胞凋亡率。通过抗氧化和降低肝细胞凋亡率通路的激活等作用表达降血糖作用。本专利技术提供的一组18个与蒺藜乙醇提取物相关的生物标志物，可在后续蒺藜乙醇提取物中有效成分的分离研究鉴定中发挥作用。附图说明为了更清楚地说明本专利技术实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本专利技术的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图。图1为代谢轮廓分析的工作流程图；图2为QC正离子色谱图；图3为QC负离子色谱图；图4为质控样本评估PCA得分图；图5为高给药剂量组(HD)与模型组(model)的PCA分析图；图中左侧为HD，右侧为model；交界处的四个点中，位于右下的为model组，其余为HD组；图6为高给药剂量组(HD)与模型组(model)的PLS-DA分析图；图中左侧为HD，右侧为model；图7为高给药剂量组(HD)与模型组(model)的OPLS-DA分析图；图中左侧为HD，右侧为model；图8为高给药剂量组(HD)与模型组(model)相比T检验排名前25的物质的热图分析；图9为火山图；图中左上和右上区域的点为在倍数检验中大于1.5并且T检验中小于0.05的物质；图10为代谢通路分析图；图中的每个点代表一个通路；图11为高给药剂量组(HD)与模型组(model)差异代谢物代谢通路影响因子分析图；图12为蒺藜乙醇提取物抗氧化作用指标检测图；图13为蒺藜乙醇提取物抑制肝细胞凋亡率显示图；图中(A)为Normal组；(B)为MODEL组；(C)为HD组；(D)为MD组；(E)为LD组。具体实施方式现详细说明本专利技术的多种示例性实施方式，该详细说明不应认为是对本专利技术的限制，而应理解为是对本专利技术的某些方面、特性和实施方案的更详细的描述。应理解本专利技术中所述的术语仅仅是为描述特别的实施方式，并非用于限制本专利技术。除非另有说明，否则本文使用的所有技术和科学术语具有本专利技术所述领域的常规技术人员通常理解的相同含义。虽然本专利技术仅描述了优选的方法和材料，但是在本专利技术的实施或测试中也可以使用与本文所述相似或等同的任何方法和材料。本专利技术所使用的材料、仪器、试剂和实验方法如无特殊说明，均为本领域常规的材料、仪器、试剂和实验方法。在不背离本专利技术的范围或精神的情况下，可对本专利技术说明书的具体实施方式做多种改进和变化，这对本领域技术人员而言是显而易见的。由本专利技术的说明书得到的其他实施方式对技术人员而言是显而易见得的。本申请说明书和实施例仅是示例性的。实施例1蒺藜乙醇提取物对高血糖症大鼠体内代谢的影响1、材料与方法1.1实验材料、试剂与仪器实验动物：SPF级雄性Wistar大鼠100只，体重(200±20)g，购自辽宁长生生物股份有限公司，许可证号：SCXK(辽)2015-0001。常规饲养，自由饮水，饲养环境光照12h/d，温度(22±1)℃，相对湿度为(45±5)％。实验药品：蒺藜，由内蒙古民族大学附属医院制剂室提供，水(water，屈臣氏)；质谱乙腈(Fisher)；甲酸(Sigma-Aldrich)。D-半乳糖、CAT、SOD、GSH-Px、MDA试剂盒(德国罗氏诊断有限公司)。主要实验仪器：漩涡振荡器(vortex)、M16710-33、ThermoScientific；超声波清洗器(UltrasonicWashingDevice)、KQ5200DE、昆山市超声仪器有限公司；台式高速冷冻离心机(highspeedbenchtoprefrigeratedcentrifuge)、HDcrofuge22R、BeckmanCoulter；质谱仪(MASS)、TripleTOF5600+、ABSCIEXTM；色谱(UHPLC)、NexeraUHPLCLC-30A、岛津SHIMADZU；RE52CS型旋转蒸发器(上海亚荣生化仪器厂)、DZTW型调温电热套、cobasc311全自动生化仪、NewBrunswick超低温冰箱。1.2实验本文档来自技高网...

【技术保护点】
1.一种蒺藜乙醇提取物的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：蒺藜粉浸泡2h，加10倍量95％乙醇，武火煮沸后，文火煎煮1h，收集上清液；药渣加8倍量95％乙醇，武火煮沸后，文火煎煮1h，收集上清液；药渣加6倍量95％乙醇，武火煮沸后，文火煎煮1h，收集上清液；合并3次上清液，回流浓缩，即得。/n

【技术特征摘要】
1.一种蒺藜乙醇提取物的制备方法，其特征在于，所述方法包括以下步骤：蒺藜粉浸泡2h，加10倍量95％乙醇，武火煮沸后，文火煎煮1h，收集上清液；药渣加8倍量95％乙醇，武火煮沸后，文火煎煮1h，收集上清液；药渣加6倍量95％乙醇，武火煮沸后，文火煎煮1h，收集上清液；合并3次上清液，回流浓缩，即得。


2.一种根据权利要求1所述的制备方法制备的蒺藜乙醇提取物。


3.一种权利要求2所述的蒺藜乙醇提取物在制备降血糖药物中的应用。

【专利技术属性】
技术研发人员：肖田梅，
申请(专利权)人：内蒙古民族大学，
类型：发明
国别省市：内蒙古;15