【技术实现步骤摘要】
基于双模式纳米探针对钙离子进行拉曼
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荧光双模式检测的方法
[0001]本专利技术涉及纳米材料和生命科学领域,尤其涉及一种基于双模式纳米探针对钙离子进行拉曼
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荧光双模式检测的方法。
技术介绍
[0002]Ca
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不仅在众多第二信使中处于枢纽地位,而且参与或协调其他第二信使的代谢和对细胞生理功能的调节。大量研究发现胞内Ca
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稳态失调是细胞凋亡中一个保守的生化事件,提示Ca
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参与了细胞凋亡中的信号转导过程。当细胞受到刺激时,细胞钙库Ca
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释放至细胞溶质,使细胞溶质内的Ca
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浓度增高,刺激相关通路并诱导细胞凋亡。关于Ca
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与细胞凋亡的关系认识也存在着许多亟待解决的问题,因此追踪细胞内Ca
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浓度的动态变化并了解Ca
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信号在细胞通路中的作用非常重要。目前,细胞内Ca
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浓度的测定方法包括电极法、同位素示踪法 ...
【技术保护点】
【技术特征摘要】
1.一种双模式纳米探针,其特征在于,所述双模式纳米探针包括纳米金星、Ca
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特异性脱氧核酶、表面配体一和表面配体二,所述Ca
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特异性脱氧核酶、表面配体一和表面配体二包裹在纳米金星表面;所述Ca
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特异性脱氧核酶包括底物链和酶链,所述底物链和所述酶链部分互补,酶切位点位于所述底物链上,所述酶链可经Ca
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激活作用于所述酶切位点并切断所述底物链;所述底物链的5
’
端或3
’
端修饰荧光基团,所述酶链的5
’
端或3
’
端修饰巯基;所述表面配体一包括甲氧基聚乙二醇硫醇、羧基聚乙二醇硫醇、氨基聚乙二醇硫醇、聚乙二醇硫醇和牛血清白蛋白中的一种或多种,所述表面配体二包括6
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巯基
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己醇、巯基乙酸和巯基二丁酸中的一种或多种;所述酶链、所述表面配体一和所述表面配体二通过Au
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S共价键与所述纳米金星连接。2.根据权利要求1所述的双模式纳米探针,其特征在于,所述纳米金星、底物链、酶链、表面配体一和表面配体二的摩尔比为0.5
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1.5:1600
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2200:1750
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2600:1000
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10000:1000
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10000。3.一种权利要求1所述的双模式纳米探针的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:(1)向酶链溶液中加入硫醇类还原剂反应1
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2h,加入纳米金星后于35
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40℃下震荡反应2
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4h,加氯化钠至其终浓度为200
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400mM,继续反应11
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13h,反应结束后加入表面配体一,离心洗...
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