一种汞离子的检测方法技术

本发明专利技术涉及一种汞离子的检测方法。该方法包括S1、采用所述共同激发波长激发SG I和NMM分别获得两者的发射峰520nm和615nm；S2、将不同已知浓度的Hg

【技术实现步骤摘要】
一种汞离子的检测方法


[0001]本专利技术涉及汞离子浓度的检测分析
，尤其涉及一种汞离子的检测方法。

技术介绍

[0002]众所周知，汞离子(Hg
2+
)是一种有毒重金属离子。由于Hg
2+
与巯基具有较高的亲和力，可以通过形成Hg
‑
S键使一些关键酶和蛋白质失活，从而对人类健康造成严重损害，如引起耳聋、视力丧失和运动、认知障碍等。同时，Hg
2+
具有生物累积效应，可通过食物链在人体中富集。因此，即使在低浓度下，它也对人类健康有害。世界卫生组织(WHO)规定的饮用水中最高允许Hg
2+
含量为30nM。因此，开发一种简单、灵敏、选择性的Hg
2+
检测方法是非常重要和迫切的。
[0003]传统方法主要依靠原子吸收光谱法(AAS)、电感耦合等离子体质谱法(ICP
‑
MS)、X射线荧光光谱法(R
‑
FS)、冷蒸气原子荧光光谱法(CVAF)和高效液相色谱法(HPLC)等，但这些方法通常需要昂贵的设备和专业的操作人员。寡核苷酸DNA生物传感器由于成本低、稳定性高、易于修饰等优点，引起人们的广发关注。然而，这类方法大多只依赖于单个荧光信号的变化(引起信号上升或下降)，通常会受到环境条件波动的影响，从而导致检测的稳定性和可靠性较低。

技术实现思路

[0004]本专利技术所要解决的技术问题是：如何实现精准又不受其他离子干扰，且检测限低的检测汞离子。
[0005]本专利技术提出一种汞离子的检测方法，包括以下步骤：
[0006]S1、利用荧光分光光度计扫描SG I和NMM的激发光谱，获得SG I和NMM的共同激发波长，采用所述共同激发波长激发SG I和NMM分别获得两者的发射峰520nm和615nm；
[0007]S2、将不同已知浓度的Hg
2+
分别加入至含有DNA序列P1和P2的缓冲液中得到多组第一混合液；分别向每组所述第一混合液中添加NMM，SG I和KCl得到多组第二混合液；其中，P1序列为：5
’‑
AGGGTTTTGGGTTTTGGGTTTTGGGA
‑3’
，P2序列为：5
’‑
ACCCTTTTCCCTTTTCCCTTTTCCCT
‑3’
；
[0008]S3、获取每组所述第二混合液的荧光光谱图，得到每组所述第二混合液在发射峰520nm和615nm对应的荧光强度的比值R，得到Hg
2+
的浓度与荧光信号变化R/R0的对应关系；其中，R0为Hg
2+
的浓度为0时，所述第二混合液在发射峰520nm和615nm处的荧光强度的比值；
[0009]S4、根据待测液的荧光光谱图，结合所述Hg
2+
的浓度与荧光信号变化R/R0的关系，得到所述待测液中Hg
2+
的浓度。
[0010]进一步地，得到所述待测液中Hg
2+
的浓度进一步包括：
[0011]S41、将所述待测液加入至含有DNA序列P1和P2的缓冲液中得到第三混合液；
[0012]S42、向所述第三混合液中添加NMM，SG I和KCl得到第四混合液；
[0013]S43、获得待测液的荧光光谱图，得到所述待测液在发射峰520nm和615nm处的荧光
比值R1，结合所述待测液的荧光信号变化R1/R0和所述Hg
2+
的浓度与荧光信号变化R/R0的关系，得到所述待测液中Hg
2+
的浓度。
[0014]进一步地，在步骤S3中，所述Hg
2+
的浓度与荧光信号变化R/R0的关系为Y＝2.161X－0.3456，Y为R/R0，X为Hg
2+
的浓度。
[0015]进一步地，在步骤S1中，所述共同激发波长在380nm
‑
400nm之间。
[0016]进一步地，在步骤S1中，所述共同激发波长为395nm。
[0017]进一步地，在步骤S3中，还包括用酶标仪来记录发射峰520nm和615nm处的荧光信号的变化。
[0018]进一步地，在步骤S41中，所述缓冲液为磷酸盐缓冲液，所述磷酸盐缓冲液中，磷酸盐的浓度为20mM，P1和P2的浓度为200nM。
[0019]进一步地，在步骤S42中，添加7μM以上的NMM，添加3.92μM以上的SG I至所述第四混合液中。
[0020]进一步地，在步骤S41中，将所述待测液加入至含有DNA序列P1和P2的缓冲液中，并在37℃下反应2
‑
3h得到多组所述第三混合液。
[0021]进一步地，在步骤S42中，向所述第三混合液中添加NMM，SG I和KCl，并在37℃下反应30min以上得到所述第四混合液。
[0022]为解决上述技术问题，本专利技术提出了一种汞离子的检测方法。
[0023]本专利技术与现有技术对比的有益效果包括：利用荧光分光光度计扫描SG I和NMM的激发光谱，获得SG I和NMM的共同激发波长，采用所述共同激发波长激发SG I和NMM分别获得两者的发射峰520nm和615nm，相同的激发波长可同时检测出SG I和NMM，从而可在后续荧光光谱图中检测到相应浓度的SG I和NMM，在此基础上，将不同已知浓度的Hg
2+
分别加入至含有DNA序列P1和P2的缓冲液中得到多组第一混合液，Hg
2+
存在时，P1和P2可以通过T
‑
Hg
‑
T错配，实现完全互补配对；分别向每组所述第一混合液中添加NMM，SG I和KCl得到多组第二混合液，T
‑
Hg
‑
T错配后可与SG I结合，在520nm处有较强的荧光强度，并且P1不能形成G
‑
四聚体结构，不能与NMM结合，从而在615nm处的荧光强度减弱，之后获取每组所述第二混合液的荧光光谱图，得到每组所述第二混合液在发射峰520nm和615nm对应的荧光强度的比值R，进而可得到Hg
2+
的浓度与荧光信号变化R/R0的对应关系；其中，R0为Hg
2+
的浓度为0时，所述第二混合液在发射峰520nm和615nm处的荧光强度的比值，根据待测液的荧光光谱图，结合所述Hg
2+
的浓度与荧光信号变化R/R0的关系，得到所述待测液中Hg
2+
的浓度；通过双峰的荧光强度的比值确定Hg
2+
的浓度，并排除了单独的SG I和NMM本身的荧光强度的干扰，不受环境条件波动影响，检测结果精准可靠，而且该方法也不受其他干扰离子的影响对汞离子具有选择性，该方法的最低检测限为9.34nM，该方法能够实现精准又不受其他离子干扰，且检测限低的检测汞离子。
附图说明
[0024]通过参考附图会更本文档来自技高网...

【技术保护点】

【技术特征摘要】
1.一种汞离子的检测方法，其特征在于，包括以下步骤：S1、获取SG I和NMM的激发光谱，得到SG I和NMM的共同激发波长，采用所述共同激发波长激发SG I和NMM分别获得两者的发射峰520nm和615nm；S2、将不同已知浓度的Hg
2+
分别加入至含有DNA序列P1和P2的缓冲液中得到多组第一混合液；分别向每组所述第一混合液中添加NMM，SG I和KCl得到多组第二混合液；其中，P1序列为：5
’‑
AGGGTTTTGGGTTTTGGGTTTTGGGA
‑3’
，P2序列为：5
’‑
ACCCTTTTCCCTTTTCCCTTTTCCCT
‑3’
；S3、获取每组所述第二混合液的荧光光谱图，得到每组所述第二混合液在发射峰520nm和615nm对应的荧光强度的比值R，得到Hg
2+
的浓度与荧光信号变化R/R0的对应关系；其中，R0为Hg
2+
的浓度为0时，所述第二混合液在发射峰520nm和615nm处的荧光强度的比值；S4、根据待测液的荧光光谱图，结合所述Hg
2+
的浓度与荧光信号变化R/R0的关系，得到所述待测液中Hg
2+
的浓度。2.根据权利要求1所述的检测方法，其特征在于，得到所述待测液中Hg
2+
的浓度进一步包括：S41、将所述待测液加入至含有DNA序列P1和P2的缓冲液中得到第三混合液；S42、向所述第三混合液中添加NMM，SG I和KCl得到第四混合液；S43、获得待测液的荧光光谱图，得到所述...

【专利技术属性】
技术研发人员：杨华林，周玉，张兴平，徐明明，彭宇，
申请(专利权)人：长江大学，
类型：发明
国别省市：